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【概述】本文简单介绍Celetrix细菌酵母电转仪电转细菌的实验步骤
【实验/设备条件】
【样品提取】尽量选择处于指数生长期的细菌
【实验/操作方法】
细菌电转流程(以20ul电击管电转大肠杆菌为例):
1) 收集处于指数生长期的细菌,冰浴;
2) 4℃离心收集细菌;
3) 轻柔重悬细菌于4℃预冷的无菌水中,再次4℃离心收集;
4) 轻柔重悬细菌于4℃预冷的10%甘油中,再次4℃离心收集;
5) 重悬细菌于10%甘油中,配成细菌悬浮液;
6) 加入DNA,加入20ul电击管盖好,冰中冷却;
7) 电击管从冰中取出,放入Celetrix电转仪马上进行电转;
8) 取出电转完成的细菌,转移到培养液进行细菌复苏。
9) 恒温摇床恢复。
10) 根据需要稀释到一定比例涂板。
【仪器/耗材清单】Celetrix细菌酵母电转仪、Celetrix细菌试剂盒
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