赫施曼助力鸭源生物制品外源病毒的检测
我国鸭养殖数量位居世界首位,近年来鸭的疫病日益增多,生产和使用的鸭源生物制品种类越来越多。外源病毒检验是病毒类活疫苗质量控制项目之一,对保证产品质量至关重要。
根据GB/T 41698-2022,鸭源生物制品外源病毒的检测有:鸭瘟病毒、鸭肝炎病毒Ⅰ型、鸭坦布苏病毒、番鸭细小病毒、番鸭小鹅瘟病毒的鸭源生物制品外源病毒检测。以下简述鸭瘟病毒的检测方法:
1.加样与孵育:取抗原包被板,分别将阴性对照血清、鸭瘟病毒阳性对照血清和稀释好的待检血清加入到抗原包被板孔中,各2孔,100μL/孔。轻轻振匀孔中样品,用封板膜密封包被板,置37℃孵育1h。
2.洗涤:去除封板膜,弃去孔中液体,用Miragen电动移液器每孔加入300μL洗涤液,作用3min,弃去洗涤液,重复洗涤3次。可用洗板机或手动洗涤。
3.与鸭瘟病毒单克隆抗体作用:用Miragen电动移液器每孔加入鸭瘟病毒单克隆抗体100μL,用封板膜密封包被板,置37 ℃孵育1h。
4.洗涤:按2中方法洗涤。
5.与酶标抗体作用:用Miragen电动移液器每孔加入羊抗鼠酶标抗体100μL,用封板膜密封包被板,置37℃孵育1h。
6.洗涤:按2中方法洗涤。
7.显色:用Miragen电动移液器每孔中加入TMB底物溶液100μL,轻摇2s,20℃~25 ℃下避光显色10 min。
8.终止:用Miragen电动移液器每孔加入终止液50μL,置酶标仪在OD450nm 波长下测定各孔OD值。
9.试验成立条件,当阴性血清对照孔平均OD450nm值大于或等于0.8,且阳性对照孔的阳断率(PD)大于或等于50%,判定检测结果有效。
以上实验涉及多次小体积液体移取,实验室移取小体积(几微升到10毫升)的液体,一般采用移液器。Miragen电动移液器,数值靠设定或选定,电机控制活塞运动,吸液和排液也更加稳定,还有步骤少、调数快、模式多等诸多优势。Miragen电动移液器可给电机多段信号,从而达到吸液和排液分多次且各体积独立可调。比如上面的标准溶液的移取,就可设置单吸多排(如吸200uL,排2次,每次100uL),程序可存储和调用,非常便捷。
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