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凯氏定氮法测量粗蛋白实验中消化样品的几个要点

1 催化剂及其用量

在环境污染小、价格便宜、催化效果好的前提下，目前催化剂多为硫酸铜和无水硫酸钾( 或无水硫酸钠)。其添加量不同公司差异较大，其中硫酸铜: 无水硫酸钾( 或无水硫酸钠) 主要有1∶9、1∶10、1∶15 和1∶17 等，国标为0.4g 硫酸铜和6g 无水硫酸钾( 或无水硫酸钠)，比例为1∶12。若添加量加大，消化液易结块不易转移；添加量减少，消化时间加长或者消化不完全。建议大家按国标执行为好。亦可根据自己的经验以及试样的多少、消化的难易程度、蛋白含量的多少自行调整。

2 硫酸的用量

浓硫酸的用量应视试样的重量、含水量及其所含蛋白高低而适当调整。对于体积大重量轻的粗饲料、高蛋白饲料或者含水量较高的试样、淀粉含量多的精料, 应适当加大浓硫酸的用量，多为15mL 左右。这是由于此类样品，浓硫酸在对其脱水和碳化是消耗量加大，当加入的浓硫酸量不足或者刚刚够试样脱水和碳化时就会出现烧干现象。反之则需加入10mL 左右。若通风柜的排风量较大时应适当多加浓硫酸2mL 左右，以防止浓硫酸的蒸发而使其浓度降低，试样消化不完全从而导致所测得的数值偏低。

3 消化温度

刚开始时以低温(200 ～ 300℃ ) 加热，待试样焦化泡沫消失后，逐步缓慢提高温度(360～410℃ )。起初低温加热是为防止试样起泡沫，而溢出烧瓶外或碳化后的颗粒粘附于烧瓶壁，导致消化不完全，所测结果偏低。对于富含脂肪或者在消化过程中易发泡的样品，可在消化前滴加少量消泡剂，如辛醇、液体石蜡等。

4 消化时间

消化时间也是许多文献一直在探讨的问题，也有许多快速消化法的研究。其消化时间的标准为消化呈透明蓝绿色后，再加热消化15min。根据苏军等研究表明，消化液澄清后再继续消化30min 为宜。此试验只是针对于蛋白含量低于蚕蛹的样品，而对于蛋白含量高于蚕蛹的样品，如进口鱼粉、血粉、羽毛粉等并未进行试验性研究。因此我个人认为，可根据试样的重量、蛋白含量的多少以及消化的难易程度而适当调整消化液澄清后的消化时间。对于所称试样质量较多、蛋白含量高于蚕蛹或者难消化的试样，消化液澄清后继续消化的时间可控制在45m i n ～ 2h 不等，具体时间化验工作者可根据自己的工作经验而自行定夺。