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辣椒、花椒、香辛料中Aflatoxin检测方案

来源：青岛普瑞邦生物工程有限公司分类：应用方案 2024-03-02 14:14:19 69阅读次数

辣椒、花椒、香辛料中Aflatoxin检测方案

时间：2021/1/27阅读：496

我们吃的美食，比如麻辣烫、火锅、麻辣小龙虾当中，*的是辣椒、花椒、麻椒、香辛料等调味料。这些调料给我们带来舌尖上的盛宴的同时，安全问题也成为关键。其中Aflatoxin是这些调料当中比较常检测的毒素。

Pribolab针对辣椒、花椒、麻椒、香辛料等复杂基质，根据【GB 5009.22-2016 食品安全，国家标准食品中AflatoxinB族和G族的测定】，对辣椒、花椒、香辛料等基质做了Aflatoxin检测的方法验证，验证过程如下：

1检测方法

00001. （同位素稀释液相色谱法-串联质谱法）

实验步骤：

Aflatoxin混合标准工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2为1：0.25：1：0.25 ug/mL

Aflatoxin混合同位素内标工作液：13C17-AFB1：13C17-AFB2：13C17-AFG1：13C17-AFG2为0.5 ug/mL称取 5g试样+50uL混合标准工作液+40uL混合同位素内标工作液+84%乙腈 20mL→振荡30min→离心 10min（离心速度 4000r/min）→取上清液过PriboFast®MFC226固相净化柱→取4mL净化液+46mL吐温PBS稀释→将全部稀释液通过PriboFast®AFT免疫亲和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用流动相复容→微孔滤膜（0.22μm）过滤，取滤液上机。

验证结果：

	AFB1（%）	AFB2（%）	AFG1（%）	AFG2（%）
辣椒加标-1	104.0	101.1	96.3	96.0
辣椒加标-2	101.5	97.6	99.7	98.6
花椒加标-1	97.3	95.8	102.6	97.9
花椒加标-2	98.4	99.2	104.1	100.2
卤粉加标-1	102.9	96.8	98.0	95.1
卤粉加标-2	99.6	97.4	96.1	97.8

辣椒样品液质内标和外标谱图：

AFB1

AFB2

AFG1

AFG2

00001. 第二法（液相色谱法）

实验步骤：

Aflatoxin混合标准工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2为1：0.25：1：0.25 ug/mL

称取 5g试样+50uL混合标准工作液+84%乙腈 20mL→振荡30min→离心 10min（离心速度 4000r/min）→取上清液过PriboFast®MFC226固相净化柱→取4mL净化液+46mL吐温PBS稀释→将全部稀释液通过PriboFast®AFT免疫亲和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用流动相复容→微孔滤膜（0.22μm）过滤，取滤液上机。

验证结果：

	AFB1（%）	AFB2（%）	AFG1（%）	AFG2（%）
辣椒加标-1	90.6	91.1	86.3	92.1
辣椒加标-2	93.5	87.6	83.9	88.6
花椒加标-1	92.8	85.0	92.0	87.9
花椒加标-2	95.4	89.2	94.3	90.2
卤粉加标-1	91.0	86.1	88.5	85.1
卤粉加标-2	88.9	87.4	86.0	87.8

卤粉标准品和样品加标液相谱图：

采购指南：

产品编号	产品名称	规格
STD#1081	2ug/mLAflatoxinB1,G1、0.5ug/mLAflatoxinB2,G2/乙腈	1.2mL/瓶
STD#1082	1ug/mLAflatoxinB1,G1、0.3ug/mLAflatoxinB2,G2/乙腈	1.2mL/瓶
STD#1084	25ug/mLAflatoxinB1,G1,B2,G2/乙腈	1.2mL/瓶
STD#1085	100ug/mLAflatoxinB1,G1,B2,G2/乙腈	1.2mL/瓶
STD#1080U	Aflatoxin混合同位素内标（U-【13C17】-AFB1,AFB2,AFG1,AFG2）-0.5ug/mL-乙腈	1.2mL/瓶
M2006	PriboFast®MFC226固相净化柱	25T
IAC-011-3	Aflatoxin总量免疫亲和柱	25T