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　　人脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒使用说明书

　　人脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒是一种用于定量检测血清或血浆中人脂蛋白α浓度的实验工具。本使用说明书将详细介绍该试剂盒的组成、原理、操作步骤、注意事项以及存储条件等，以确保用户能够准确、可靠地进行检测。

　　一、试剂盒组成

　　本试剂盒主要包括酶标板、标准品、样品稀释液、酶标试剂、显色剂A液、显色剂B液、终止液、浓缩洗涤液(20倍)和说明书。所有试剂在使用前请仔细阅读说明书，按照操作步骤进行。

　　二、检测原理

　　本试剂盒采用双抗体夹心酶标免疫分析法。在酶标包被板上预包被人脂蛋白α(Lp-α)抗体，加入标准品或待测样品后，样品中的人脂蛋白α(Lp-α)与抗体结合形成复合物。然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体，与复合物中的脂蛋白α(Lp-α)结合。加入显色底物，在辣根过氧化物酶的催化下发生颜色反应，颜色的深浅与样品中的人脂蛋白α(Lp-α)浓度成正比。通过测定吸光度值，即可计算出样品中人脂蛋白α(Lp-α)的浓度。

　　三、操作步骤

　　1. 准备工作：将试剂盒从冰箱中取出，室温平衡30分钟。同时准备好实验所需的移液器、吸头、离心机等设备。

　　2. 标准品稀释：取5个离心管，分别标记为S1-S5，每管加入100μL样品稀释液。然后向S1管中加入100μL标准品原液，混匀后取出100μL加入S2管中，以此类推进行倍比稀释。S5管为空白对照。

　　3. 加样：分别设置空白对照孔、标准品孔和待测样品孔。在酶标包被板上标准品孔中加入不同浓度的标准品50μL，待测样品孔中加入待测样品50μL(若样品浓度过高，可进一步稀释)，空白对照孔不加。

　　4. 加酶标试剂：每孔加入酶标试剂100μL，空白对照孔除外。轻轻晃动酶标板，使试剂充分混匀。

　　5. 温育：将酶标板用封板膜封好，放入37℃恒温箱中温育60分钟。

　　6. 洗涤：揭去封板膜，弃去液体，甩干。每孔加入洗涤液350μL，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

　　7. 显色：每孔先加入显色剂A液50μL，再加入显色剂B液50μL，轻轻晃动酶标板，使试剂充分混匀。然后放入37℃恒温箱中避光显色15分钟。

　　8. 终止：每孔加入终止液50μL，终止反应。此时蓝色立转黄色。 9. 测定：以空白对照孔调零，在450nm波长下测定各孔的吸光度值(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

　　四、结果计算与判断

　　以标准品浓度为横坐标，对应的OD值为纵坐标，绘制标准曲线。

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