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原代培养

来源:上海喆图科学仪器有限公司      分类:产品评测 2019-07-19 09:46:29 204阅读次数

1.  用PBS液漂洗盖玻片的原代细胞3次,每次30s;

      2.  在室温中用3%甲醛/PBS固定20min;

      3.  用PBS液再漂洗3次,每次1min,Z后用滤纸吸干多余的PBS液;

      4.  投入冷丙酮中(-10—-20℃)7min;

      5.  用PBS漂洗3次,每次1min,Z后用滤纸吸干多余的PBS液;

      6.  向直径6cm的干净碟皿ZY滴一滴浓度为0.1—0.2mg/ml的一级抗微管蛋白抗体,令小盖片细胞面向下扣在抗体液上,覆以皿盖,于37℃生化培养箱中放置45min—1h;

      7.  向碟皿内匀速缓慢滴加PBS,令盖片浮起在液面,用镊子夹出,按步骤3处理;

      8.  向干净碟皿ZY滴一滴浓度为0.1—0.2mg/ml的荧光标记的二抗,其后操作按步骤6进行;

      9.  按步骤7和3操作;

      10. 滴pH8.5的90%的甘油/PBS少许于载玻片上,把小盖片的原代细胞面覆在大盖片上;

      11. 将盖片置于荧光显微镜下观察;

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最近更新:2024-09-05 09:08:13
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