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实验目的：以ActiPro为对照，测试新品基础培养基A01/A02性能以及CB5作为添加剂使用的效果；

细胞株：CHOK1Q；

N代：更换成各实验组培养基；

工艺：接种密度0.5M，D4-5降温，D3开始隔天补4%CB7a以及0.4%CB7b。

图2：各实验组中titer对比

在室温下（18℃-25℃） 加入配制终体积80%-90%的 WFI于配制容器中，比如需要配制1L的A01培养基，加入900mL的 WFI。

称量并缓慢加入22.11g/L A01培养基粉末。

搅拌至少20min(浑浊状态)至没有结块的粉末。

缓慢加入6.5mL/L 5N NaOH或者3.25 mL/L 10N NaOH（在5min内加完），搅拌至澄清。

加入1.8 g/L NaHCO3直至完全溶解。

使用5 N或者10 N NaOH or HCl调节pH至6.90-7.35，搅拌20min。

定容至最终重量，搅拌10min然后检测pH。

记录定容后培养基 pH 及渗透压，确保pH和渗透压在以下范围：pH 6.90 - 7.55 ；Osmolality270 - 330 mOsmol/kg。

用无菌滤器过滤并在2-8℃避光保存。

上述培养基均不含L-谷氨酰胺，在使用前除了GS 系统的细胞株，其他细胞系的培养需要添加 L-谷氨酰胺，推荐浓度为：4-6 mM。

上述培养基亦不含HT， 培养基用于培养GS系统的细胞时，如果细胞生长或表达不理想，添加1X的 HT 可能会有帮助。

将35g Cell Boost 5粉末加入900 mLWFI/纯水中。使用室温（22°C至25°C）WFI/纯水将缩短溶解时间。混合20 min或直至溶解。

拌20至30 min。

将pH值调节至6.9至7.4。

定容至1000 mL。

0.2 μm无菌过滤器过滤并避光低温储存。

由于Cell Boost 5添加剂中的脂质成分，液体制备温度必须保持在 20°C 以上。

干粉避光储存在 2°C 至 8°C 的密封容器中。

液体避光储存在 2°C 至 8°C 。

配制1L浓度为6-10%的Cell Boosts补料培养基（此处以Cell Boost5为例）。

将 800-900 mL WFI/纯水加入玻璃或不锈钢容器中。

确保在整个配制过程中水温保持在 37°C；或在配制初期水温提高到40-50℃后续不再控温。

置于磁力搅拌器上以 600-800 rpm 的速度搅拌。

在整个配制过程中，用 12N-NaOH维持pH值在 9.8。

在 1.5-2 h内尽可能缓慢地加入60-100克Cell Boosts 粉末。

加入WFI/纯水定容至最终体积 （1 L）。

用6N HCl将pH值调至7.05。

0.2 μm PES或 PVDF的无菌过滤器过滤并避光低温储存。

溶液颜色可能会随着pH值的调整而变暗，这不会影响性能。

预计会观察到一些不溶性颗粒，因为研磨和包装过程中的残留物是不可避免的。

由于Cell Boost 5中独特的脂质成分，液体制备温度必须保持在37oC，加热水将加速溶解并有助于过滤。

建议使用玻璃或不锈钢容器，尽量减少潜在的脂质成分吸附。