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- LZX7899 2019-04-19 16:46:58
- <p><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_46">1. 培养箱消毒:先用纯水擦洗,再用95的酒精擦洗,再照紫外就可以拉!注意周围环境的清洁就不会那么容易污染的拉!</span><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_46">2. 我的经验是在补充水时Z好把水加热一下,达到培养箱的温度。</span><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_46">3. 这么早就养细胞了,我们这里一般是用70%的乙醇擦洗,然后再用0.1%的新洁尔灭擦洗,不放心的话再用高锰酸钾加甲醛1:1比例熏一遍。注意要是熏的话千万注意混合之后马上离开,然后密闭细胞培养室,味道很刺激的。Z好在养细胞前消毒,否则,确实没地方放细胞。</span><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_46">4. 我们的方法比较简单,先用75%酒精擦拭内壁,通风10分钟,紫外线照射30分钟即可。</span><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_46">5. 我们的通常处理是先用75%的酒精擦拭内壁,然后用甲醛+高锰酸钾熏蒸一个晚上,然后通风一整天(同时打开紫外线照射)。</span><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_46">6. 我们是把培养箱里的板层拿出来高压一下,箱壁用75%酒精擦一遍,换用诗乐氏擦一遍,再紫外照一夜,效果很好,其他的请高手指教。</span><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_46">7. 熏蒸后吹一天是不够的,Z起码要一个星期才可以让甲醛散尽,要不细胞长不好的</span><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_46">8. 有的培养箱能加热内壁到90度,也有的带有紫外线功能。常规应该每周用酒精擦洗内部一次。具体的操作请参考培养箱的手册,或着咨询培养箱技术支持。使用消毒剂应小心,培养箱内有检测温度、湿度和二氧化碳浓度的传感器,腐蚀性消毒剂或有机溶剂有可能损坏某些器件,请慎用。另外,挥发性的甲醛有毒,易燃、易爆。如果在培养箱内残留甲醛的话,细胞会死光光哦(我实验室的真实故事)。总之,先看培养箱手册,再联系技术支持,方可万无一失啊。</span><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_46">9. 常规Z好什么也不放!硫酸铜的作用是YZ细菌生长(但多数用在处理污染的孔板)。因为现在的孵箱都有YJ功能。</span><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><br style="content: ""; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 15px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: "PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC", "Lantinghei SC", "Microsoft YaHei", arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_46">10. 我们实验室的做法:把平皿高压灭菌后,在无菌操作台内加入适量的灭菌双蒸水或者生理盐水.再加少量新洁尔灭,浓度没关系.细胞养的都可以.</span></p>
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细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。随着生物工程的逐壮发展,细胞培养是生物工程和生命科学研究基本的实验技术。干细胞生物学及再生医学等的发展及其应用在很大程度上基于细胞培养技术的发展。真核细胞或原核细胞培养在受人工控制的状态下,进行大规模的克隆。细胞培养技术是细胞生物学研究方法中重要和常用技术,通过细胞培养既可以获得大量细胞,又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等。
在进行细胞培养过程中,需要严格控制细胞培养的周围环境和配制合适的培养液。细胞培养中最困难的就是哺乳动物的细胞培养。研究一般需要在培养液中加热牛血清来为哺乳动物提供生长因子。根据培养细胞的不同分类,即贴壁细胞或者悬浮细胞,提供细胞的附着环境或者提供悬浮环境。更为重要的是,哺乳动物细胞培养需要一定的CO₂环境,来维持培养液的pH。因此针对细胞培养出现了能够控制细胞培养环境的CO₂培养箱。
CO₂培养箱的出现是一个跨时代的意义,通过严格控制箱体内CO₂的含量,即可保证培养液相对稳定的pH值,为细胞培养提供稳定的生长环境。众所周知,一般CO₂培养箱能提供的稳定的温度控制为37℃,来培养哺乳动物细胞如HePG、L-02、HBO等都是在37℃下进行培养。但是随之产生的问题,其他细胞如昆虫细胞(Sf9、Sf21)等需要比室温高一点或者接近的温度。如果采用低温生化培养箱,则会出现冷凝水的问题,且不能进行控制CO₂浓度,因此需要CO₂培养低温环境。
WIGGENS CO₂细胞培养箱,WCI 180能提供帕尔贴制冷套件,为培养箱提供低于室温5℃工作(zui低温度20℃)的环境,方便研究者能够进行更多种类细胞的培养。
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