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SDS电泳和琼脂糖电泳的区别

宁静表 2017-11-24 08:32:25 1790  浏览
  • 为什么琼脂糖不用两种浓度的胶?

参与评论

全部评论(1条)

  • 小小玲玲玲玲9 2017-11-24 19:35:49
    你说的SDS电泳实际上是SDS-PAGE,SDS只是蛋白变性剂,而凝胶是聚丙烯酰胺。SDS-PAGE和琼脂糖凝胶电泳使用的是完全不同的凝胶材料。SDS-PAGE采用的是聚丙烯酰胺,它是靠化学反应形成的凝胶。而琼脂糖凝胶则是物理反应(加热融化,冷却凝固)。通常情况下,我们采用聚丙烯酰胺凝胶电泳来分离蛋白质,而琼脂糖凝胶电泳来分离核酸。当然,这并不,如果要用来分辨碱基数相近的核酸片段时,我们也会采用聚丙烯酰胺凝胶来进行电泳,如DNA测序反应中的变性聚丙烯凝胶电泳。至于为啥琼脂糖凝胶不用两种浓度不同的胶,实际上是和SDS-PAGE与琼脂糖凝胶电泳点样孔方向有关。SDS-PAGE是竖胶,电泳点样孔与电泳方向平行,点样的时候肯定会造成样品分布不均。所以需要一个高浓度的胶来预电泳保证在分离胶的时候所有蛋白处于同一水平。而琼脂糖凝胶电泳时,胶是横着的,点样孔方向与胶的方向垂直,所以加样的时候不会导致样品电泳时不在同一水平。故不需要两种不用浓度的凝胶。

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琼脂糖预染预制胶电泳试剂盒

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产品特点及优势:

本产品是用于核酸电泳的试剂盒,具有以下特点及优势:

1. 省事:您不用再四处采购琼脂糖、核酸染料、电泳液和 loading buffer 等试剂,一个试剂盒全部解决。

2. 省时:为您省去了您亲自制胶的繁琐,为您省出一个小时左右的实验时间。

3. 省力:琼脂糖预染预制胶采用特制安全可靠的核酸染料预染,电泳过程无需电泳液染色或后染色,简捷方便,即开即用。

4. 省心:用本产品电泳得到的 DNA 片段进行胶回收,不影响后续的 DNA 连接等反应。

5. 兼容:琼脂糖预染预制胶为 TAE 体系,与实验室常规自制的 TAE 琼脂糖胶完全一致,使用完美衔接,您只需要用您之前的 TAE 电压电泳即可。

货号及成分

1. 琼脂糖预染预制胶 10 块,规格:8 孔,每孔上样量:25µl,您有六个固定浓度可选,对应货号见下表:

当然,您也可以同您的供货商沟通定制您需要的其他浓度!

2. 6×DNA Loading Buffer 一支,货号:10052,规格:500µl。6×DNA Loading Buffer 用于琼脂糖凝胶电泳前 DNA 样本的处理,使用时将 1 倍体积的 6×DNA Loading Buffer 与 5 倍体积的 DNA 样品混合均匀后上样。缓冲液组分经过优化,其中的染料溶液包括指示剂溴酚蓝和二甲苯青 FF,电泳时可肉眼监控 DNA 的迁移。甘油确保样本在点样孔底部聚集;EDTA 结合二价金属离子并抑制金属离子依赖性核酸酶。在 1%的琼脂糖凝胶中,溴酚蓝的迁移率与 300bp 的双链线性 DNA 片段大致相同,二甲苯青 FF 的迁移率与 4000bp 的双链线性 DNA 片段大致相同。

3. TAE 电泳液一瓶,货号:1060,规格:60ml/瓶。

TAE 是广泛使用的核酸电泳缓冲液,主要成分是 Tris-乙酸盐和 EDTA。DNA 分子在高于等电点的缓冲液中带负电,向正极移动。TAE 缓冲液常用于基因组 DNA、大分子超螺旋 DNA、扩增DNA 片段电泳分离,电泳大于 13kb 的片段时用 TAE 缓冲液将取得更好的分离效果。

货 号

10088 10108 10128 10158 10188 10208

浓度

0.8% 1.0% 1.2% 1.5% 1.8% 2.0% MYDEER 使用手册

运输及保存:

琼脂糖预染预制胶电泳试剂盒的小黑盒需要 4℃保存和运输,有效期 12 个月。

6×DNA Loading Buffer 可以短时间 4℃运输,长期需要-20℃保存,有效期 12 个月。

TAE 电泳液需要常温运输和保存,有效期 24 个月。

自备试剂:

核酸样品、Marker、去离子水

使用方法:

1. 在低温条件下 TAE 电泳液会有沉淀物析出,请 37℃水浴溶解并摇晃均匀后使用,不影响使用效果。用去离子水稀释 50 倍(1 mL 本产品加 49 mL 去离子水),用作电泳液,倒入电泳槽中,电泳液以没过胶面 1mm 为宜。

2. 取出一块独立包装的琼脂糖预染预制胶,撕掉表面的塑料膜,反转包装,用两手的食指和中指托住塑料壳边缘,开口向下没入电泳液中,然后用两个大拇指轻轻按压塑料壳背面中心部分,琼脂糖预染预制胶就会落入电泳液中,此时的预制胶带孔面向上,移动胶块,使孔侧端靠近电泳槽负极。如样品孔内有气泡,应设法除去。

3. 在 DNA 样品中加入 6×DNA loading buffer,混匀后,用移液器将样品混合液缓慢加入被浸没的凝胶加样孔内,同时加入您自己准备的 Marker。

4. 接通电源,红色为正极,黑色为负极,切记 DNA 样品由负极往正极泳动 (靠近加样孔的一端为负)。

5. 根据指示剂泳动的位置,判断是否终止电泳。

6. 电泳完毕,关闭电源,用凝胶成像仪观察电泳条带及其位置,与 Marker 比较扩增产物的大小。

电泳胶图:

100bp 2% 2000bp 1% 1kb 1%

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1. 省事:您不用再四处采购琼脂糖、核酸染料、电泳液和 loading buffer 等试剂,一个试剂盒全部解决。

2. 省时:为您省去了您亲自制胶的繁琐,为您省出一个小时左右的实验时间。

3. 省力:琼脂糖预染预制胶采用特制安全可靠的核酸染料预染,电泳过程无需电泳液染色或后染色,简捷方便,即开即用。

4. 省心:用本产品电泳得到的 DNA 片段进行胶回收,不影响后续的 DNA 连接等反应。

5. 兼容:琼脂糖预染预制胶为 TAE 体系,与实验室常规自制的 TAE 琼脂糖胶一致,使用衔接,您只需要用您之的 TAE 电压电泳即可。

货号及成分

1. 琼脂糖预染预制胶 10 块,规格:8 孔,每孔大上样量:25µl,您有六个固定浓度可选,对应货号见下表:

当然,您也可以同您的供货商沟通定制您需要的其他浓度!

2. 6×DNA Loading Buffer 一支,货号:10052,规格:500µl。6×DNA Loading Buffer 用于琼脂糖凝胶电泳 DNA 样本的处理,使用时将 1 倍体积的 6×DNA Loading Buffer 与 5 倍体积的 DNA 样品混合均匀后上样。缓冲液组分经过优化,其中的染料溶液包括指示剂溴酚蓝和二甲苯青 FF,电泳时可肉眼监控 DNA 的迁移。甘油确保样本在点样孔底部聚集;EDTA 结合二价金属离子并抑制金属离子依赖性核酸酶。在 1%的琼脂糖凝胶中,溴酚蓝的迁移率与 300bp 的双链线性 DNA 片段大致相同,二甲苯青 FF 的迁移率与 4000bp 的双链线性 DNA 片段大致相同。

3. TAE 电泳液一瓶,货号:1060,规格:60ml/瓶。

TAE 是广泛使用的核酸电泳缓冲液,主要成分是 Tris-乙酸盐和 EDTA。DNA 分子在高于等电点的缓冲液中带负电,向正移动。TAE 缓冲液常用于基因组 DNA、大分子超螺旋 DNA、扩增DNA 片段电泳分离,电泳大于 13kb 的片段时用 TAE 缓冲液将取得更好的分离效果。

货 号

10088 10108 10128 10158 10188 10208

浓度

0.8% 1.0% 1.2% 1.5% 1.8% 2.0% MYDEER 使用手册

运输及保存:

琼脂糖预染预制胶电泳试剂盒的小黑盒需要 4℃保存和运输,有效期 12 个月。

6×DNA Loading Buffer 可以短时间 4℃运输,需要-20℃保存,有效期 12 个月。

TAE 电泳液需要常温运输和保存,有效期 24 个月。

自备试剂:

核酸样品、Marker、去离子水

使用方法:

1. 在低温条件下 TAE 电泳液会有沉淀物析出,请 37℃水浴溶解并摇晃均匀后使用,不影响使用效果。用去离子水稀释 50 倍(1 mL 本产品加 49 mL 去离子水),用作电泳液,倒入电泳槽中,电泳液以没过胶面 1mm 为宜。

2. 取出一块独立包装的琼脂糖预染预制胶,撕掉表面的塑料膜,反转包装,用两手的食指和中指托住塑料壳边缘,开口向下没入电泳液中,然后用两个大拇指轻轻按压塑料壳背面中心部分,琼脂糖预染预制胶就会落入电泳液中,此时的预制胶带孔面向上,移动胶块,使孔侧端靠近电泳槽负。如样品孔内有气泡,应设法除去。

3. 在 DNA 样品中加入 6×DNA loading buffer,混匀后,用移液器将样品混合液缓慢加入被浸没的凝胶加样孔内,同时加入您自己准备的 Marker。

4. 接通电源,红色为正,黑色为负,切记 DNA 样品由负往正泳动 (靠近加样孔的一端为负)。

5. 根据指示剂泳动的位置,判断是否终止电泳。

6. 电泳完毕,关闭电源,用凝胶成像仪观察电泳条带及其位置,与 Marker 比较扩增产物的大小。

电泳胶图:

100bp 2% 2000bp 1% 1kb 1%

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3. 省力:琼脂糖预染预制胶采用特制安全可靠的核酸染料预染,电泳过程无需电泳液染色或后染色,简捷方便,即开即用。

4. 省心:用本产品电泳得到的 DNA 片段进行胶回收,不影响后续的 DNA 连接等反应。

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1. 琼脂糖预染预制胶 10 块,规格:8 孔,每孔最大上样量:25µl,您有六个固定浓度可选,对应货号见下表:

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2. 6×DNA Loading Buffer 一支,货号:10052,规格:500µl。6×DNA Loading Buffer 用于琼脂糖凝胶电泳前 DNA 样本的处理,使用时将 1 倍体积的 6×DNA Loading Buffer 与 5 倍体积的 DNA 样品混合均匀后上样。缓冲液组分经过优化,其中的染料溶液包括指示剂溴酚蓝和二甲苯青 FF,电泳时可肉眼监控 DNA 的迁移。甘油确保样本在点样孔底部聚集;EDTA 结合二价金属离子并抑制金属离子依赖性核酸酶。在 1%的琼脂糖凝胶中,溴酚蓝的迁移率与 300bp 的双链线性 DNA 片段大致相同,二甲苯青 FF 的迁移率与 4000bp 的双链线性 DNA 片段大致相同。

3. TAE 电泳液一瓶,货号:1060,规格:60ml/瓶。

TAE 是广泛使用的核酸电泳缓冲液,主要成分是 Tris-乙酸盐和 EDTA。DNA 分子在高于等电点的缓冲液中带负电,向正极移动。TAE 缓冲液常用于基因组 DNA、大分子超螺旋 DNA、扩增DNA 片段电泳分离,电泳大于 13kb 的片段时用 TAE 缓冲液将取得更好的分离效果。

8孔(货号) 25孔(货号) 浓度

10088 100825 0.8%

10108 101025 1.0%

10128 101225 1.2%

10158 101525 1.5%

10188 101825 1.8%

10208 102025 2.0%


运输及保存:

琼脂糖预染预制胶电泳试剂盒 25孔 8孔的小黑盒需要 4℃保存和运输,有效期 12 个月。

6×DNA Loading Buffer 可以短时间 4℃运输,长期需要-20℃保存,有效期 12 个月。

TAE 电泳液需要常温运输和保存,有效期 24 个月。

自备试剂:

核酸样品、Marker、去离子水

琼脂糖预染预制胶 电泳试剂盒

使用方法:

1. 在低温条件下 TAE 电泳液会有沉淀物析出,请 37℃水浴溶解并摇晃均匀后使用,不影响使用效果。用去离子水稀释 50 倍(1 mL 本产品加 49 mL 去离子水),用作电泳液,倒入电泳槽中,电泳液以没过胶面 1mm 为宜。

2. 取出一块独立包装的琼脂糖预染预制胶,撕掉表面的塑料膜,反转包装,用两手的食指和中指托住塑料壳边缘,开口向下没入电泳液中,然后用两个大拇指轻轻按压塑料壳背面中心部分,琼脂糖预染预制胶就会落入电泳液中,此时的预制胶带孔面向上,移动胶块,使孔侧端靠近电泳槽负极。如样品孔内有气泡,应设法除去。

3. 在 DNA 样品中加入 6×DNA loading buffer,混匀后,用移液器将样品混合液缓慢加入被浸没的凝胶加样孔内,同时加入您自己准备的 Marker。

4. 接通电源,红色为正极,黑色为负极,切记 DNA 样品由负极往正极泳动 (靠近加样孔的一端为负)。

5. 根据指示剂泳动的位置,判断是否终止电泳。

6. 电泳完毕,关闭电源,用凝胶成像仪观察电泳条带及其位置,与 Marker 比较扩增产物的大小。

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