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黄曲霉毒素(aflatoxins)是一种由黄曲霉和寄生曲霉等真菌经过聚酮途径产生的次生代谢产物，其结构通常包含一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮，天然产生的黄曲霉毒素根据其化学结构不同分为B₁、B₂、G₁ 、G₂四种。

食品遭受产毒真菌以及霉菌毒素污染的问题在世界范围内反复发生，被污染的农作物作为饲料资源被畜禽食用后， 携带的霉菌毒素又可在肉、蛋、奶等食品中蓄积，通过食物链传递， 危害人类健康。

逗点生物采用最新自主研发的Copure®228多功能净化柱，建立玉米粉中黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂检测的LC-MS/MS检测方法。该方法低、中、高三个水平的加标回收率均在90-100 %之间，RSD小于5 %，操作简便快捷，与国内外的竞品相比，具有回收率高和脱色净化效果好的优势，能够作为玉米粉中黄曲霉毒素检测的参考方法。

本方法适用于谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及籽类、油脂及其制品、调味品、婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品中黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂的测定。

参照 《GB 5009.22-2016  食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》。

一、样品前处理

1.1  样品提取

（1）称取 5 g试样于50 mL离心管中，加入一定量同位素内标工作液振荡混合后静置30 min。

（2）加入20 mL乙腈-水溶液（84+16），涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20 min，在6000 r/min下离心10 min，取上清液备用。

1.2  样品净化

（1）向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。

（2）将Copure® 228多功能净化柱（货号：COAF228）橡胶头从试管顶端插入试管中，并向下压净化柱至试管底端。

（3）将净化柱上部净化后的样品提取液取出至样品瓶或EP管中。

（4）取5 mL净化提取液，氮气吹干，用1 mL初始流动相复溶，涡旋 30s 溶解残渣，过微孔滤膜，上机分析。

二、仪器条件

仪器设备：液相色谱-串联质谱联用仪 SCIEX Triple Quad™ 4500 

色谱柱：Waters C18   2.1x100mm 1.7um

流动相：A：0.1%甲酸水    B：乙腈

流动相梯度：初始80%A，20%A（0 min~2 min），20%A（2 min~3 min），

80%A（3 min~3.1min），80%A（3.1min~5min）

流速：0.3 mL/min

柱温：室温

进样体积：10.0 μL

质谱条件：

检测方式：多离子反应检测（MRM）；

表1 离子源控制条件

表2 离子选择参数

（注：*为定量离子）

三、实验结果

表3  玉米粉中黄曲霉毒素加标回收实验结果

图1 不同品牌多功能净化柱处理加标样品后的脱色效果图（①玉米粉加标样品-未净化处理    ②Copure®228-净化处理    ③ 国外A品牌-净化处理     ④ 国内B品牌-净化处理）

Copure®228脱色效果明显，其脱色能力与国外A品牌相当，并显著优于国内B品牌。

图2 使用Copure®228净化后的加标样品的EIC色谱图

四、订购信息

现行使用的2020年版药典中，对于黄曲霉毒素的检测有明确要求，现检测品种由2015年药典要求的19种中药材增加到25种中药材原料，及用这些原料制成的饮片、丸剂等成品药，现有2020年版药典中对于黄曲霉的检测方法有三种，第一种是高效液相色谱法+光化学衍生法；第二种是高效液相色谱-串联质谱法；第三种是酶联免疫法。现在大部分药检所机构及中药企业实验室基本采用第一种方法居多，不管是从检测复杂程度、设备成本、耗材成本多方面考虑，第一法都有一定的优势。我们公司可以提供第一法的解决方案，并给国内100+中药企业提供过解决方案，如需要解决方案的可与我们沟通联系。

现行药典方法都是化验室用来定量检测的，从样品前处理到得到结果，最快也需要3小时以上，而这是样品已经入库，对于黄曲霉风险比较高的样品，例如酸枣仁、柏子仁、远志等中药材，如果已经入库后，且黄曲霉超标，该样品将无法进入到生产环节，这样对于企业的经济损失将是非常大的，那就急需要一种能现场快速检测黄曲霉的设备，并且结果有保证的检测方法。

中检维康生物公司提供一套现场快速检测中药材黄曲霉的方案，基于胶体金免疫层析快速检测技术（GICA）通过图像分析技术定量快速检测中药材中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素总量、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮，以及赭曲霉毒素A等真菌毒素的含量。

油茶是指山茶属植物中种子含油率较高、具有经济栽培价值的油用物种的总称，在我国长江流域以南被广泛种植，且种植历史悠久，在先秦古书《山海经》绪书中记载：“员木，南方油食也”。这里说的“员木”即油茶，它与油棕、油橄榄、椰子并称为世界四大木本油料植物。

茶油是指以油茶籽或仁为原料制取的油品，又称茶油籽油、山茶油，是一种具有高营养价值的健康食用油，具有“东方橄榄油”的美誉。相较于普通植物油，茶油中不饱和脂肪酸高达90%以上，油酸达到80-83%, 亚油酸达到7-13%, 并富含蛋白质和多种维生素成分, 尤其是它所含的丰富的亚麻酸是人体必需而又不能合成的。长期食用，具有降低胆固醇、预防心血管疾病的作用。

黄曲霉是一种常见的腐生真菌，常见于霉变的粮食作物及其他霉腐的有机物上，在其生长代谢过程中会产生毒性很强的黄曲霉毒素。

目前已分离鉴定出十几种黄曲霉毒素，包括B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1和毒醇等，其中黄曲霉毒素B1为毒性及致癌性很强的物质。

在油茶的生长环境如土壤水质中可能遭到黄曲霉等的浸染，以及茶油果在雨季成熟采摘、晾晒、剥壳得到的茶油籽因储备不当温度高湿度大，就可能存在发霉腐败现象，加上运输过程中可能的交叉污染，就会造成茶油中检出黄曲霉毒素的风险。而且通常掺杂霉变油茶籽炼制成的茶油其酸价和过氧化值会升高，还可能存在气味和口感上的差异。

在食品安全国家标准 植物油 （GB 2716-2018）中规定了我国市场上在售的植物油各项指标要求，如感官要求、理化指标、污染物和真菌毒素限量等。此外GB/T 11765-2018更细致地规范了商品化茶油的物理参数和质量指标，其中未涉及黄曲霉毒素的限量要求，但因存在暴露风险，越来越多的地方和企业已将黄曲霉毒素检测纳入茶油生产监管，如企业标准Q/XYK 0001S-2021规定了山茶籽油中黄曲霉毒素B1限量应≤10.0 μg/kg。

Pribolab技术应用在同行中率先开展茶油中黄曲霉毒素检测技术方法开发，见文献液相色谱-柱后光化学衍生法测定油茶中黄曲霉毒素的方法研究

此外，在开发茶油中黄曲霉毒素检测技术的基础上，对市面上的部分茶油进行了检测分析，结果大部分均未检出黄曲霉毒素B1、G2和G1，个别样品含有极微量的黄曲霉毒素B2，为后续市场监管检测茶油中黄曲霉提供了方法和数据支撑。

某品牌茶油黄曲霉毒素检测液相色谱图

某品牌茶油中黄曲霉毒素与AFT标准品（B1:0.5ppb）液相色谱图

产品速递

1.质控样品名称

玉米粉中黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）（天然毒素非添加）质控样品

产品编号：TMQC0035a    规格：100g

产品编号：TMQC0035 规格：50g

2.质控样品描述

天然玉米粉中黄曲霉毒素B1（AFB1）和脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）分析质控样品，固体粉末，铝箔袋真空封装，分为50g/100g二种包装。

本质控样品选用自然玉米，基质中黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）为天然生长，经除杂、粉碎、过筛、混匀、包装、均匀性考察、稳定性考察、定制等制备而成。

样品-20°C保存，有效期至2020年3月31日。

使用前请将样品充分混匀，样品一旦开封请尽快使用，避免样品相关特性发生变化。

3.用途

  本质控样品主要用于内部质量控制、方法证实/确认，人员考核和分析过程的质量控制等。

4.验收要求

  收到样品后，应于当日认真检查样品状态，如果发生样品内包装破损，标识污损、样品泄露等异常情况，请勿开封样品，立即与联系人联系，经联系人确认同意更换样品后，请采购方按照保存条件妥善保存样品，并于48小时内将原样品原包装寄回。如收到样品当日未反馈样品异常情况，过后发现，由采购方自负。

5.指定值及标准差

6.均匀性和稳定性检验

根据《标准物质定值的通用原则及统计学原理》规定进行样品均匀性和稳定性研究检测。结果显示，样品是均匀的。避光、冷冻保存，12个月内质控样品稳定性良好。

7.溯源性

本质控样品，使用满足计量学特性要求的容量器具和定值方法，在检测中使用有证标准物质绘制工作曲线，以确保质控样品量值溯源性。

8.正确使用说明

本质控样品Z小称样量不低于10g，质控样品从冰箱取出后，待恢复至室温再开袋使用；每次使用完迅速将铝箔袋口密封后，适宜的温度下保存。

9.运输和贮存

冰袋加保温盒的包装形式运输，未开封时短期可常温  保存，推荐冷冻保存。

10.安全警示

使用时请戴口罩、手套在生物安全柜或通风橱中操作。用过的器皿应放入5%次氯酸钠溶液脱毒处理。本质控样品实验室使用，不可食用。

研制单位：北京坛墨质检科技有限公司

咨询方式

全国免费客服电话：4008-099-669

传真：010-64338939   010-64339205

QQ：800022809

邮箱：gbw@gbw-china.com

网址：www.gbw-china.com

（来源:北京坛墨质检科技有限公司）

一、质控样品名称

花生粕粉中黄曲霉毒素总量定量分析质控样品

二、质控样品描述

花生粕粉中黄曲霉毒素总量定量分析质控样品，固体粉末，铝箔袋真空封装，每袋50 g。

本质控样品选用自然花生，压榨提炼油脂后得到花生粕，经除杂、粉碎、过筛、混匀、包装、均匀性考察、稳定性考察、定值等制备而成。

样品-20 °C保存，有效期至2020年7月30日。使用前请将样品充分混匀，样品一旦开封请尽快使用，避免样品相关特性发生变化。

三、用途

本质控样品主要用于内部质量控制、方法证实/确认，人员考核和分析过程的质量控制等。

四、验收要求

收到样品后，应于当日认真检查样品状态，如果发生样品内包装破损，标识污损、样品泄露等异常情况，请勿开封样品，立即与联系人联系，经联系人确认同意更换样品后，请采购方按照保存条件妥善保存样品，并于48小时内将原样品原包装寄回。如收到样品当日未反馈样品异常情况，过后发现，由采购方自负。

五、指定值及标准差

六、均匀性和稳定性检验

    根据《标准物质定值的通用原则及统计学原理》规定进行样品均匀性和稳定性研究检测。结果显示，样品是均匀的。避光、冷冻保存，12个月内质控样品稳定性良好。

七、溯源性

本质控样品，使用满足计量学特性要求的容量器具和定值方法，在检测中使用有证标准物质绘制工作曲线，以确保质控样品量值溯源性。

八、正确使用说明

本质控样品Z小称样量不低于10 g，质控样品从冰箱取出后，待恢复至室温再开袋使用；每次使用完迅速将铝箔袋口密封后，适宜的温度下保存。

九、运输和贮存

冰袋加保温盒的包装形式运输，未开封时短期可常温保存，推荐冷冻保存。

十、安全警示

使用时请戴口罩、手套在生物安全柜或通风橱中操作。用过的器皿应放入5%次氯酸钠溶液脱毒处理。本质控样品实验室使用，不可食用和饲用。

（来源：北京坛墨质检科技有限公司）