仪器网(yiqi.com)欢迎您!

| 注册 登录
网站首页-资讯-专题- 微头条-话题-产品- 品牌库-搜索-供应商- 展会-招标-采购- 社区-知识-技术-资料库-方案-直播- 视频

问答社区

土壤 的氮测定 微量凯氏定氮法

王佳妮丑兮兮 2018-12-15 04:29:12 418  浏览
  • 如题, 问下土壤的氮测定能不能跟植物的氮测定一样呢,二者可不可以都用微量凯氏定氮法,能的话 测土壤的氮时要不要对这个方法稍做修改

参与评论

全部评论(0条)

获取验证码
我已经阅读并接受《仪器网服务协议》

热门问答

土壤 的氮测定 微量凯氏定氮法
如题, 问下土壤的氮测定能不能跟植物的氮测定一样呢,二者可不可以都用微量凯氏定氮法,能的话 测土壤的氮时要不要对这个方法稍做修改
2018-12-15 04:29:12 418 0
微量凯氏定氮法

 微量凯氏定氮法

 (Mirco Kjeldahl determine)

一、目的

   1、学习微量凯氏定氮法的原理

   2、掌握微量凯氏定氮法的操作技术,包括标准硫酸铵含量的测定,未知样品的消化、蒸馏、滴定及其含氮量的计算等。

二、原理

   凯氏定氮法常用于测定天然有机物(如蛋白质,核酸及氮基酸等)的含氮量。

   天然的含氮有机物与浓硫酸共热时,其中的碳、氢二元素被氧化成二氧化碳和水,而氮则变成氨,并进-步与硫酸作用生成硫酸铵。此时程称之为“消化”。

    但是,这个反应进行得比较缓慢,通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高反应的沸点,并加入硫酸铜作为催化剂,以促进反应的进行。甘氨酸的消化过程可表示如下:

    浓碱可使消化液中的硫酸铵分解,游离出氮,借水蒸汽将产生的氨蒸馏到一定量,一定浓度的硼酸溶液中,硼酸吸收氨后,氨与溶液中的氢离子结合,生成铵离子,使溶液中氢离子浓度降低。然后用标准无机酸滴定,直至恢复溶液中原来氢离子浓度为止,后根据所用标准酸的当量数(相当于待测物中氨的当量数)计算出待测物中的氮量。

    滴定时用甲烯蓝和甲基红混合指示剂,其指示范围为pH5.2~5.6,NH4H2BO3的蓝色滴至原来H3BO3的蓝紫色即为终点。

    本法适用范围0.2-1.0毫克氮。相对误差应小于2%。

三、材料、试剂与器具

(一)材料

人的血清或猪的血清

(二)试剂

1、 浓硫酸(化学纯)

2、30%氢氧化钠(分析纯)溶液

3、0.9%NaC1 溶液

4、硫酸钾一硫酸铜混合物:硫酸钾与硫酸铜(CuSO4、 5H2O)以3: 1 (W/W)的配比混合研磨成粉末。

5、2%硼酸

6、混合指示剂的配制:

    方法一:取50毫升0.1%甲烯蓝无水醇溶液与200毫升0.1%甲基红无水乙醇溶液混合配成,贮于棕色瓶备用,这种指示剂酸性时为紫色,碱性时为绿色,变色范围窄且灵敏。

    方法二: 0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10毫升与0.1%甲基红乙醇溶液2毫升混和即成。

    本指示剂的变色范围为pH5.2→5.4→>5.6

                         紫红色 灰色 绿色

 7.0.0100M HC1

 8.硼酸一指示剂混合液:取100毫升2%硼酸溶液,滴加混合指示剂贮备液,摇匀后溶液呈现紫红色即可。(约加1毫升左右混合指示剂)

 9.标准硫酸铵溶液(0.3 毫克氮/毫升)

(三)器具

1、凯氏烧瓶

2、消化架

3、吸量管(1毫升、2毫升)

4、量筒(10毫升)

5、凯氏定氮蒸馏装置

6、微量滴定管(3毫升、5毫升,可读至0.02毫升)

7、锥形瓶(50-100毫升)

8、容量瓶(50 毫升)

四、操作步骤

(一)样品的处理

    血清样品:取人血(或猪血),放于离心管中,于冰箱中放置过液,次8离心除去凝xue块,上层黄色透明清液即为血清。准确吸取血清1.0毫升加入0.9%NaCl4.0毫升,仔细混匀备用。

   固体样品:某一固体样品中的含氮量是100克该物质(千重中所含氮的克数)来表示(%)。因此在定氮前,应将固体样品中的水份除掉。一般样品干燥的温度都采用105°C,因为非游离的水都不能在100°C以下烘干。

   在称量瓶中称入一定量的磨碎的样品,然后置105°C的烘箱内干燥4小时。用坩埚将称量瓶放入干燥器内,待降至室温后称重,按上述操作继续烘干样品。每干燥1小时后,称量--次,直到两次称量的数量不变,即达恒重。

 (二)消化

   取2个50毫升的凯氏烧瓶,向号烧瓶内加2毫升稀释血清溶液(或4毫升核酸制品溶液,或200毫克固体粉末)。注意,用吸量管直接将溶液(或用试管加入固体样品)加至烧瓶底部,切勿沾于瓶口或瓶颈上,向2号烧瓶加入2毫升水作空白对照。

   在每个烧瓶内加入硫酸钾一硫酸铜混合物约0.2克,浓硫酸3毫升,小瓷片两粒,摇匀。将烧瓶约60度角固定在铁架上,每个瓶口放一小漏斗,在通风厨内的电炉上消化。

   在消化开始时,应控制火力,不要使液体冲到瓶颈。待瓶内水汽蒸完,硫酸开始分解并放出SO2白烟后,适当加强火力,继续消化,直至消化液呈透明绿色为止。消化完毕,待烧瓶内容物冷却后,加蒸馏水10 毫升(注意慢加,边加边摇)。冷却后将瓶内容物转入50毫升的容量瓶中,并用蒸馏水洗烧瓶数次,溶液一并倒入容量瓶,后定容至刻度摇匀,做上记号备用。

(三)蒸馏

1、仪器的洗涤:仪器应先经一般洗涤,再经水蒸气洗涤。

蒸馏器(图1-1)有几种,应用前需熟悉其使用方法。使用方法如下:

    开放自来水龙头,使水E进入G,从K管流出(水不宜开得过大以免水从G管溢出)。开放P3,使水进入A室,漏斗D中加蒸馏水约10毫升入B室。用拇指将管口按紧,同时开放P1,则B室中的水先从Y型管口冲出,随后A室中水经K管流出,一般情况下如此重复洗涤两次即可。若蒸馏器内有氨存在,则应加入蒸馏水后,不加样品蒸馏一次方可使用。(可用PH试纸检查。)

    A为蒸气发生室,P3为其开关,P1为出水开关,B为蒸馏室,与出气室M相遇,M管插入盛有定量酸液的锥形瓶,B室内有Y型管,一端与A室相通,另一端经P4与漏斗D相连,可经此将样品及试剂加入B室,F为指形冷凝管,E为进水管,水经F、G、K而流出,蒸馏时B室进消化好的样品及NaOH,二者反应产生氨,B室经M管进入锥形瓶中的酸吸收。

 2、滴定标准样品

    先用标准硫酸铵溶液试验2-3 次。蒸馏器洗净后,开放水龙头P3,使水进入A室,水放至A室球部即可。

    取3个50毫升的锥形瓶,各准确加入10毫升硼酸(内加有混合指示剂)。用表面皿复盖备用。

    加样:用吸量管吸取1毫升标准硫酸铵溶液,细心地由漏斗D倾入蒸馏室,再用蒸馏水1毫升清洗漏斗。取一个盛有硼酸一混合指示剂的锥形瓶,置于M管下,使管口恰好接触硼酸溶液,用量筒从漏斗D加入30%氢氧化钠8毫升,随即将P4夹紧,并往漏斗加入少量蒸馏水封闭。

    蒸馏:用酒精灯加热(应用挡风板将灯围拢,维持火力恒定,沸腾不可高于Y管口以免A室溶液从Y管倒吸,待滴蒸馏液从冷凝柱F顶端滴下时起,继续蒸馏5分钟,然后将锥形瓶放低,使导管离开液面再蒸2分钟,后用蒸馏水洗导管外壁,蒸馏完毕,取下锥形瓶,随即将蒸馏器洗净。)

 3、样品及空白蒸馏:用吸量管分别吸取1毫升样品和1毫升蒸馏水按上述操作步骤进行蒸馏。

 4、滴定:蒸馏完毕,用0.0100N标准盐酸溶液滴定锥瓶内溶液至淡紫色或灰色,记录所用盐酸的量。

(四)计算

   式中: A为漓定样品用去的盐酸平均毫升数; B为滴定空白用去的盐酸平均毫升数; C为称量样品的克数:0.0100为盐酸的当量浓度(实际上,此项应按实验中使用盐酸的实际浓度填写); 14 为氮的原子量;6.25为常数(1毫升0.1N盐酸相当于0.14毫克氮)。
    若样品中除有蛋白外,尚有其他含氮物质,则样品蛋白质含量的测定要更复杂一些。首先需向样品中加入三lv乙酸,使其终浓度为5%,然后测定未加三lv乙酸的样品及加入三lv乙酸后的样品的上清液中的含氮量,从而计算出蛋白氨,再进一步算出;蛋白质的含量。
           蛋白氨=总氮-非蛋白氨
           蛋白质含量(克%) =蛋白氮X6.25

五、注意事项

   1、凯氏法的优点是适用范围广,可用于动植物的各种组织,器官及食品等成组复杂样品的测定,只要细心操作都能得到的结果。其缺点是操作比较复杂,含有大量碱性氨基酸的蛋白质测定结果偏高。

   2、普通实验室中的空气中常含有少量的氨,会影响结果,所以操作应在单独洁净的房间中进行,并尽可能快地对硼酸吸收液进行滴定。

六、实验报告

绘画蒸馏装置图,计算待测样品的总氮量和蛋白质含量

七、思考题

1、正式测定未知样品前为什么必须测定标准硫酸铵的含氮量及空白?

2、写出以下各步的化学反应式:

①蛋白质消化

②氨的蒸馏

❸氨的滴定

3.指出本测定方法产生的误差的原因。


2019-12-09 11:42:03 877 0
粗蛋白的定量测定——微量凯氏定氮法实验中的思考题
1.指出下面试剂的作用:蒸馏滴定中的30%的氢氧化钠溶液、2%的硼酸溶液及2%硼酸溶液中的指示剂。 2.正式测定未知浓度样品前为什么必须测定标准硫酸铵的含氮量及空白?
2011-04-22 06:50:12 726 2
求助:用凯氏定氮仪测定土壤全氮,有效氮的具体操作步骤!
求解:消化炉消化土壤的条件和蒸馏过程。
2014-09-27 09:14:47 445 1
凯氏定氮法中的常量,微量,和半微量有什么区别
 
2017-12-16 01:48:41 768 1
水样凯氏氮测定什么情况用常量法什么情况用半微量法
 
2016-10-14 09:57:06 420 1
微量凯氏定氮法的测定结果通常会高于样品蛋白质的实际含量为什么?
 
2011-11-03 16:22:02 434 1
凯氏定氮半微量法圆底烧瓶里放什么?
凯氏定氮半微量法圆底烧瓶里放什么?... 凯氏定氮半微量法圆底烧瓶里放什么? 展开
2016-10-12 20:15:34 718 1
凯氏定氮法测量土壤含氮量,土壤大概一般需要用浓硫酸消煮多久?
 
2018-12-14 19:24:57 268 0
凯氏定氮法能测定多肽吗
 
2011-11-25 02:32:33 344 2
凯氏定氮法测肝素钙中氮的含量

1 前言

肝素钙主要用于血液透析时预防血凝块形成,也可用于ZL深部静脉血栓形成。参照《2015 版 ZG药典 第四部 通则 0704 氮测定法 第三法(定氮仪法)》测定肝素钙中的氮含量。


2 仪器与试剂

2.1 仪器

K1160 全自动凯氏定氮仪,SH420F 石墨消解仪,分析天平。


2.2 试剂

硫酸(分析纯),催化剂片(分析纯无水硫酸钾 3g 和分析纯无水硫酸铜 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠。


3 实验方法

3.1 取样

将样品外包装打开,混匀样品,精确称取 0.1g 左右(精确值 0.1mg),用称量纸包好放入消化管内,然后分别加入 3g 硫酸钾与 0.2g 硫酸铜,沿消化管壁加硫酸 10mL。


3.2 消解

利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,

消化过程采用曲线升温模式,设定消解参数如表 1:

表 1 消解参数设置

3.3 测试

将消化管放置于凯氏定氮仪上,定氮仪参数设置如表 2:

表 2 定氮仪参数设置

4 测试结果

4.1 实验结果


4.2 结论

通过实验数据可以看出,测定肝素钙氮含量平均值为 1.8412%。


参考文献:

[1] 2015 版 ZG药典 第四部 通则 0704 氮测定法 第三法(定氮仪法)[M]


2020-08-26 13:02:48 210 0
用凯氏定氮法测土壤氮含量,消煮的时候为什么会烧干
土壤氮含量一般在0.04~0.08,浓硫酸加了8ml,有的会烧干有的就还有上清液。烧干的蒸馏出来氮含量要小很多。请问为什么会烧干,急求!多谢!
2012-12-06 06:49:45 713 5
凯氏定氮仪测定硝态氮肥料中的氮含量

1 前言

硝态氮肥,是指氮素以硝酸盐形态存在的氮肥。如硝酸钠、硝酸钙、硝酸铵钾、硝铵磷等。特点是:临界吸湿点相对湿度低,易吸湿结块;易溶于水,易被作物吸收。较适合施用于旱地作物,如玉米、甜菜、烟草等。本实验参照《GB/T 22923-2008 肥料中氮、磷、钾的自动分析仪测定法》中的方法对硝态氮肥的氮含量进行测定。


2 仪器与试剂

2.1 仪器

K1160 全自动凯氏定氮仪,SH420F 石墨消解仪,分析天平 。


2.2 试剂

盐酸(分析纯),20g/L 硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠,0.1mol/L硫酸标准滴定液。


3 实验方法

3.1 样品前处理

称取 0.5g 铬粉加入消化管中,再精密称取样品 0.1g(精确至 0.1mg)左右,用纯水将样品冲入消化管。将消化管置于通风橱中,向消化管中加入 5mL 盐酸,在室温下至少静置 5min,但不超过 10min。置消化管于已预先升温到 300℃的消化炉中,插上梨形玻璃漏斗,加热至沸腾后 1min~2min,注意,不能蒸干,冷却,冲洗漏斗及消化管壁。


3.2 测试

表 1 定氮仪参数设置


4 结果与讨论

4.1 实验结果

表 2 硝态氮肥料中氮含量测试结果


4.2 结论

结果表明本次测试的硝态氮肥料中氮含量分别为 13.710%、31.765%和 31.068%。且测试结果 RSD 分别为 0.066%、0.103%和 0.042%,重复性较好。


参考文献

[1]GB/T 22923-2008 肥料中氮、磷、钾的自动分析仪测定法[S]. 


注意事项

此方法适用于仅含有硝态氮或含有硝态氮和铵态氮的肥料样品,不适用于含有有机物及酰胺态氮的样品。

2020-12-08 15:14:09 554 0
凯氏定氮仪测定活性炭(粉状)中氮的含量

1 前言

活性炭是由木质、煤质和石油焦等含碳的原料经热解、活化加工制备而成,粉状活性炭是非常微细的粉末,绝大部分可通过 200 目筛网。它主要应用于味精、柠檬酸、氨基酸、啤酒等的脱色提纯。其氮含量测定原理是活性炭与浓硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化,使含氮有机质分解,分解生成的氨与硫酸结合生成硫酸铵,然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后以硫酸标准滴定溶液滴定,根据酸的消耗量,计算样品中的氮含量。


2 仪器与试剂

2.1 仪器

K1160 全自动凯氏定氮仪;SH420F 石墨消解仪;电子分析天平。


2.2 试剂

硫酸(分析纯),20g/L 硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠,混合催化剂片(3gK2SO4、0.2gCuSO4),0.1mol/L 硫酸标准滴定液。


3 实验方法

3.1 取样

准确称取混匀样品 0.2g(精确值 0.1mg)左右,加入消化管,再加入混合催化剂 3gK2SO4、0.2gCuSO4,加入 10mL 浓硫酸,然后再加入 0.2g 高锰酸钾。


3.2 消解

利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,消化完毕后,将消化管取下冷却至室温。消化过程采用曲线升温模式,设定消解参数:


3.3 测试

将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下:


4 结果与讨论

4.1 实验结果



4.2 结论

通过实验数据可以看出,该粉状活性炭样品测定的氮含量平均值为 2.7191%。以上数据显示,使用 K1160 全自动凯氏定氮仪测定粉状活性炭中氮的含量,所得结果误差符合《GB/T 19227-2008 煤中氮的测定方法》标准要求的重复性限为 0.08%。


参考文献

[1]GB/T 19227-2008 煤中氮的测定方法[S]. 


注意事项

加高锰酸钾时反应很剧烈,要在通风橱内进行,戴好护目镜,做好防护措施。剧烈反应结束放置 10min 再进行消解。




2020-10-20 13:51:51 470 0
测定蛋白质含量只有凯氏定氮法吗
测定奶粉中蛋白质含量的方法 除了凯氏定氮法 还有什么别的方法
2017-12-07 04:05:45 888 2
微量凯氏定氮法在蒸馏时为什么要加入氢氧化钠
 
2018-11-23 15:07:55 361 0
凯氏定氮法测瓜尔胶中氮的含量

1 前言

瓜尔胶为大分子天然亲水胶体,属于天然半乳甘露聚糖,品质改良剂之一,一种天然的增稠剂。外观是从白色到微黄色的自由流动粉末,能溶于冷水或热水,遇水后及形成胶状物质,达到迅速增稠的功效。主要分为食品级和工业级(油田使用的属于工业级)两种。参照《2015 版 ZG药典 第四部 通则 0704 氮测定法 第三法(定氮仪法)》测定瓜尔胶中的氮含量。


2 仪器与试剂

2.1 仪器

K1160 全自动凯氏定氮仪,SH420F 石墨消解仪,分析天平。


2.2 试剂

硫酸(分析纯),催化剂片(分析纯无水硫酸钾 3g 和分析纯无水硫酸铜 0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠。


3 实验方法

3.1 取样

将样品外包装打开,混匀样品,精确称取 0.3g 左右(精确值 0.1mg),用称量纸包好放入消化管内,然后分别加入 3g 硫酸钾与 0.2g 硫酸铜,沿消化管壁加硫酸 10mL。


3.2 消解

利用石墨消解炉进行消解,将消化管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,消化过程采用曲线升温模式,设定消解参数如表 1:

表 1 消解参数设置

3.3 测试

将消化管放置于凯氏定氮仪上,定氮仪参数设置如表 2:

表 2 定氮仪参数设置


4 测试结果

4.1 实验结果


4.2 结论

通过实验数据可以看出,测定瓜尔胶氮含量平均值为 1.3658%。


参考文献

[1] 2015 版 ZG药典 第四部 通则 0704 氮测定法 第三法(定氮仪法)[M]


2020-08-26 11:33:06 197 0
请问,凯氏定氮法能测出硝基中的氮吗?
 
2011-08-29 08:57:35 375 1
如何理解凯氏定氮法中总氮量的计算公式?
 
2017-09-24 06:22:35 2424 1
含氮量多少以下用常量凯氏定氮法
 
2018-12-11 17:32:51 379 0

11月突出贡献榜

推荐主页

最新话题