TritonX-100裂解细胞膜的浓度是多少

徐永二 2017-03-16 10:35:52 413 浏览

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惟惜恋鬼飘飘 2017-03-17 00:00:00

Triton X-100是一种非离子型去垢剂分子式：C14H22O(C2H4O)n 用途：Triton X-100是一种比较温和的去垢剂（表面活性剂或称界面活性剂），常作为添加剂使蛋白保持稳定，尤其是膜蛋白. 性质： 1.Triton X-100对细菌等微生物没有杀伤作用. 2.Triton X-100在紫外波段下有光吸收（lambda max = 275 nm and 283 nm in methanol），因此，当缓冲液中存在Triton X-100时不能通过测定280nm光吸收来进行蛋白定量. 3.Triton X-100常与CHAPS等zwitterionic 去垢剂一起使用来纯化膜蛋白，使膜蛋白保持其天然构象. 4.Triton X-100可以提高真核细胞细胞膜的通透性，因此在Immunostaining时常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100的PBS或TBS. 5.Triton X-100非常稳定，密封避光 +2 to +8℃条件下可以长期保存. 6.Triton X-100是透明，略显粘稠，稍微发黄的液体. 7.Triton X-100的密度为1.07 g/ml，pH6.0-8.0（5%的溶液）. 8.Triton X-100可以高压灭菌. 9.用Triton X-100来裂解细胞时，0.1% Triton X-100就足够了，不过，达到0.5%时也没问题. 10.蛋白酶K在含1% Triton X-100的溶液中依然保持活性. 11.可以使用Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161 cartridges 来去除Triton X-100 . 去垢剂(又称表面活性剂)是一类即具有亲水基又具有疏水基的物质，一般具有乳化、分散、和增溶作用，可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多种类型，中性去垢剂在蛋白提取中应用的较多. 中性去垢剂又称非离子表面活性剂，对蛋白质的变性作用影响较少，宜于蛋白质或酶提取之用.一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类，如PEG200；多元醇类表面活性剂，如山梨醇、司盘类和吐温类；聚氧乙烯脂肪醇醚，如苄泽类、平平加类；聚氧乙烯烷基苯酚醚，如Igepal CO、乳化剂OP、Triton、Pluronic(用作消泡剂、润湿剂、增溶剂)、泡敌.中性去垢剂作用后可通过Sephadex LH-50柱除去；也可直接上DEAE-Sephadex柱层析分离目的蛋白，不必先除去去垢剂.

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