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- hevdvjd 2017-02-21 00:00:00
- 原理: 1. DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度Z低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。 2.DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 准备工作: 制备鸡血细胞液,方法是:将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL,置于500 mL烧怀中,注入新鲜的鸡血(约180 mL),用玻璃棒搅拌,使其充分混合,以免凝血。静置于冰箱内一天,使血细胞自行沉淀。(也可以用离心机离心2 min(转速1000转/分)。用吸管吸去上清液。 方法步骤: 1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。 5 min 2.溶解DNA: 3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢 4.过滤:取黏稠物 5.再溶解:顺时针方向搅拌,较慢。3 min 6.过滤:取滤液。 7.提取出含杂质较少的DNA,逆时针方向搅拌,稍慢。5 min 8.DNA的鉴定:沸水浴5min 要是其他用途你就在看看七他人的回答好了。
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- sunmoon9927 2017-02-20 00:00:00
- 有专门的血清DNA提取试剂盒,提取方法简便,效率高。
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- 如何在恒温摇床中培养细胞
为了在恒温摇床中成功培养细胞培养物,需要温和的混合、主动和卫生的加湿,以避免蒸发和精确的 CO2调节,从而使培养基中的 pH 值更稳定。此外,无菌在防止较长过程中的污染方面起着重要作用。
01 稳定和均匀的条件
为了从细胞培养中获得可重复的结果,在整个生物过程中必须有最 佳的培养条件。因此,针对细胞培养优化的培养箱摇床提供了精确调节 CO2供应和空气湿度的选项。加湿必须没有冷凝水,以避免摇床损坏和污染。可靠且高度的温度均匀性也很重要。
02 通过温和混合实现最 佳氧合
与静态培养箱不同,培养箱摇床确保细胞培养物的理想混合,从而为它们提供足够的氧气。具有低搅拌速度的相应温和驱动确保氧气可用于对剪切敏感的细胞培养物。
03 细胞培养的卫生环境
细胞培养中的污染会耗费大量时间和金钱。因此,用于细胞培养的培养箱具有特殊功能,可将污染风险降至最低。理想情况下,摇床配备额外的卫生功能、抗 菌涂层和紫外线辐射。选择恒温摇床时,请确保它可以快速彻底地清洁及包含泄漏到内部的液体。
04 智能设计缩短培养中断时间
即使是最轻微的条件变化也会损坏细胞。在实践中,这意味着尽可能少地打开恒温摇床的门,并尽可能缩短必要的中断时间。因此,可以快速操作的门结构以及快速的自动启停是重要的功能。此外,用户应该能够轻松操作,且符合人体工程学。
05 符合 GMP 的文档和全面的报告
恒温摇床可根据客户要求进行鉴定:工厂验收测试 (FAT) 和现场验收测试 (SAT)、安装验证 (IQ) 和操作验证 (OQ)。一个生物过程软件记录了整个培养过程,此外还可以在较长时间内进行自动监控和调节。
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