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- jmbmbmbmbm 2017-11-06 00:00:00
- 血液基组DNA提取试剂盒 操作步骤: 、体积全血操作步骤: <400ul全血300ul血液处理量例 1、向300ul抗凝剂血液加入2.5倍体积Solution A颠倒混匀12000rpm离1钟弃掉清 2、再重复步骤1弃掉清 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C混合液(Solution B与Solution C使用量见附表) 4、加入150ul混合液用移液器吹打均匀60℃水浴或孵箱孵育10钟孵育期间颠倒混匀溶液由红色变黄绿色或棕色 5、加入等体积异丙醇充颠倒混匀至现丝状或絮状基组DNA12000prm离1钟弃掉清 6、加入800ul 75%酒精颠倒数;12000prm离1钟用移液器吸掉清室温干燥10~15钟 7、加入150ul Elution buffer60℃孵育10~15钟或夜溶解DNA用移液器吹打均匀-20℃保存基组DNA 二、量全血操作步骤: 1~10ml血量3ml血液处理量例 1、向3ml抗凝剂血液加入2.5倍体积Solution A颠倒混匀3000rpm离5钟弃掉清 2、再重复步骤1弃掉清 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C混合液(Solution B与Solution C使用量见附表) 4、加入1.5ml混合液用1ml移液器或者性塑料吸管吹打均匀60℃水浴或孵箱孵育10钟孵育期间颠倒混匀溶液由红色变黄绿色或棕色 5、加入等体积异丙醇充颠倒混匀至现丝状或絮状基组DNA 6、用移液器絮状物移加800ul 75%酒精1.5ml EP管颠倒数12000prm离3钟弃掉清室温干燥10~15钟 7、加入500ul Elution buffer60℃孵育10~15钟或夜溶解DNA用移液器吹打均匀-20℃保存基组DNA 三、量全血操作步骤: 10~20ml血量10ml血液处理量例 1、向10ml抗凝剂血液加入2.5倍体积Solution A颠倒混匀8000rpm离5钟弃掉清; 2、再重复步骤1弃掉清 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C混合液(Solution B与Solution C使用量见附表); 4、加入5ml混合液用性塑料吸管吹打均匀60°C水浴或孵箱孵育10钟孵育期间颠倒混匀溶液由红色变黄绿色或棕色 5、加入等体积异丙醇充颠倒混匀至现丝状或絮状基组DNA; 6、用移液器絮状物移加800ul 75%酒精1.5ml EP管颠倒数12000prm离1钟弃掉清室温干燥10~15钟; 7、加入1000ul Elution buffer60℃孵育10~15钟或夜溶解DNA用移液器或性塑料吸管吹打均匀-20℃保存基组DNA
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