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单细胞悬液制备方法︱原代细胞分离一看就会,快戳→

深圳市瑞沃德生命科技有限公司 2021-09-15 16:17:50 563  浏览
  • 原代细胞 (primary cell) 是指从机体的组织(如人体组织、小鼠组织等)经特定方法获得单个细胞,并在体外进行模拟机体培养的细胞。原代细胞离体时间较短,生物学特性未发生较大变化,仍保有机体组织的遗传特征,能更好地反映细胞在体内的生长状态,因此可获得与体内生理功能更接近的数据,更适合用于药物测试、细胞分化和转化等实验研究。

    原代细胞分离是指使用酶、螯合剂(常用EDTA)以及机械方法处理动物组织,使其分散为单细胞悬液样品,后续在适当的培养体系下使分离的原代细胞进行生存、生长和繁殖的过程。针对不同物种的不同组织类型,其具体的操作流程也要进行调整,常规原代细胞分离流程为取样→预处理→分离处理→过滤清洗→后处理

    01

    取样→预处理

    取样是原代单细胞悬液制备非常重要的一步,其质量会直接影响到后续处理效果。

    操作时,首先根据不同实验需求麻醉或处死动物后进行消毒、固定并切开相应位置皮肤暴露目的组织。

    (▲暴露目的组织)


    同时不同组织类型,取样时也有细微差别。


    其次操作过程中有以下几点也需要注意:

    • 严格无菌操作,快速处理;

    • 针对不同组织类型控制环境温度;

    • 保证工具锋利,减少机械损伤,动作轻柔,保持组织湿润;

    • 尽量去除非相关组织,尤其是残留的小血管等;

    • 完整记录组织情况、重量等信息。

    拿到样本后针对不同分离流程选择不同的预处理方式(如将肿瘤组织剪切到2-4mm左右的小块),如血液细胞等已经是单细胞悬液的样本在简单的离心换液过后就可以直接使用了,其他类型的组织还需要进一步解离。

    (▲组织预处理)


    02

    分离处理

    常规组织处理一般有两种方法,分别是通过物理机械剪切化学生物酶解来实现细胞分离。

    物理机械剪切是使用匀浆机打散组织或者使用剪刀、铜网或者组织研磨器进行的剪碎法、网搓法和研磨法。这种方法成本低,操作简单、快速,但对组织机械损伤巨大,而且细胞分散效果不尽人意,只适用于一些质地软且较为松散的软组织。

    化学生物酶解法是组织样本预处理之后,在酶的作用下,破坏组织间的胶原纤维和弹性纤维,同时水解粘多糖及其他连接细胞间的蛋白质;或者通过EDTA等化学物质与细胞上的钙、镁离子结合形成螯合物,利用结合后的机械力使细胞变圆而分散细胞,尤其对上皮组织的分散效果很好。

    使用酶解体系进行组织解离时还需注意酶的选择和配比,最常使用胰蛋白酶和胶原酶进行处理。其中胰蛋白酶对蛋白质有水解作用,主要作用于赖氨酸或精氨酸相连接的肽键,使细胞间质中的蛋白质消化溶解而使细胞分散开,适用于多种组织。

    胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶,对胶原有很强的消化作用。适用于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织,它对细胞间质有较好的消化作用。不同的胶原酶适用的组织也会有不同。



    除上述两种最常用的消化酶外,还有链霉蛋白酶这种解离效果强但容易造成细胞损伤以及解离效果弱,但对细胞损伤较小的裂解酶,可以根据实际样本的情况进调整,或者通过复配联用达到更好的效果,例如可以使用透明质酸酶与胶原酶联用消化细胞间基质等。


    同时,在进行消化处理的时候佐以机械剪切,便能使组织分散得更加均匀,样本处理效果更好。另外实验操作中还需要注意以下几点:

    • 预处理好的组织块需要在缓冲液中清洗,避免影响后续实验;

    • 酶量和作用时间应根据组织量及时调整,避免消化时间过长影响细胞状态,期间需要摇晃整个解离体系以保证组织块接触均匀;

    • 严格控制温度湿度条件,虽然胰蛋白酶发挥效果的最佳温度是56℃,但是细胞无法承受如此高温,所以需要在37℃环境进行处理,另外还有部分组织需要冷消化处理;

    • 酶的保存也需要注意,冻干粉要注意防潮,溶解后避免反复冻融,如蛋白水解酶可以自动分解,因此建议在使用前立即将其溶解,并在冰上保存2°C~8°C。


    原代细胞分离过程复杂,同时整个分离处理过程都需要人工参与,机械剪切过程难以控制实验可重复性。随着科技的进步,瑞沃德单细胞悬液制备仪轻松化解这一难题,自主研发的组织处理管、酶解试剂盒和内置不同组织优化处理程序,可将组织制备成高活性单细胞悬液或组织匀浆。

    现在购买还可赠送保修时长哦!

    根据实际样本可在15-30min内完成活性高、均一性好的单细胞悬液制备,大大增加实验可重复性。拥有独立运行的四通道,搭配加热套实现全自动处理,提高组织处理效率。广泛应用在单细胞测序、原代细胞培养、流式分析、细胞分选、细胞治疗等研究领域。

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    03

    过滤清洗→后处理


    在分离处理操作结束后要对样品进行过滤、离心、换液,对获得的单细胞悬液进行细胞计数和活力分析,终止反应并将细胞置于培养体系或相应的缓冲体系中。

    (▲活细胞计数)


    自动细胞计数仪的使用可以对原代细胞进行精准计数,瑞沃德C100自动细胞计数仪可配合多荧光通道,对悬液中的细胞进行定量分析,并同时显示明场及荧光图像,清晰呈现计数结果及细胞形态。适用于免疫学及疫苗开发、细胞治疗、肿瘤研究、干细胞及代谢研究等研究领域的细胞分析。

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    细胞培养是原代细胞分离流程最后一步,瑞沃德二氧化碳培养箱,可精准控制温度、二氧化碳浓度,并且是维持高湿度环境的高性能细胞培养箱。HEPA高效过滤器可有效去除空气中的微粒污染,140℃高温干热灭菌功能可实现培养箱的定期灭菌维护,为原代细胞样品提供稳定洁净的培养环境。

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单细胞悬液制备方法︱原代细胞分离一看就会,快戳→

原代细胞 (primary cell) 是指从机体的组织(如人体组织、小鼠组织等)经特定方法获得单个细胞,并在体外进行模拟机体培养的细胞。原代细胞离体时间较短,生物学特性未发生较大变化,仍保有机体组织的遗传特征,能更好地反映细胞在体内的生长状态,因此可获得与体内生理功能更接近的数据,更适合用于药物测试、细胞分化和转化等实验研究。

原代细胞分离是指使用酶、螯合剂(常用EDTA)以及机械方法处理动物组织,使其分散为单细胞悬液样品,后续在适当的培养体系下使分离的原代细胞进行生存、生长和繁殖的过程。针对不同物种的不同组织类型,其具体的操作流程也要进行调整,常规原代细胞分离流程为取样→预处理→分离处理→过滤清洗→后处理

01

取样→预处理

取样是原代单细胞悬液制备非常重要的一步,其质量会直接影响到后续处理效果。

操作时,首先根据不同实验需求麻醉或处死动物后进行消毒、固定并切开相应位置皮肤暴露目的组织。

(▲暴露目的组织)


同时不同组织类型,取样时也有细微差别。


其次操作过程中有以下几点也需要注意:

  • 严格无菌操作,快速处理;

  • 针对不同组织类型控制环境温度;

  • 保证工具锋利,减少机械损伤,动作轻柔,保持组织湿润;

  • 尽量去除非相关组织,尤其是残留的小血管等;

  • 完整记录组织情况、重量等信息。

拿到样本后针对不同分离流程选择不同的预处理方式(如将肿瘤组织剪切到2-4mm左右的小块),如血液细胞等已经是单细胞悬液的样本在简单的离心换液过后就可以直接使用了,其他类型的组织还需要进一步解离。

(▲组织预处理)


02

分离处理

常规组织处理一般有两种方法,分别是通过物理机械剪切化学生物酶解来实现细胞分离。

物理机械剪切是使用匀浆机打散组织或者使用剪刀、铜网或者组织研磨器进行的剪碎法、网搓法和研磨法。这种方法成本低,操作简单、快速,但对组织机械损伤巨大,而且细胞分散效果不尽人意,只适用于一些质地软且较为松散的软组织。

化学生物酶解法是组织样本预处理之后,在酶的作用下,破坏组织间的胶原纤维和弹性纤维,同时水解粘多糖及其他连接细胞间的蛋白质;或者通过EDTA等化学物质与细胞上的钙、镁离子结合形成螯合物,利用结合后的机械力使细胞变圆而分散细胞,尤其对上皮组织的分散效果很好。

使用酶解体系进行组织解离时还需注意酶的选择和配比,最常使用胰蛋白酶和胶原酶进行处理。其中胰蛋白酶对蛋白质有水解作用,主要作用于赖氨酸或精氨酸相连接的肽键,使细胞间质中的蛋白质消化溶解而使细胞分散开,适用于多种组织。

胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶,对胶原有很强的消化作用。适用于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织,它对细胞间质有较好的消化作用。不同的胶原酶适用的组织也会有不同。



除上述两种最常用的消化酶外,还有链霉蛋白酶这种解离效果强但容易造成细胞损伤以及解离效果弱,但对细胞损伤较小的裂解酶,可以根据实际样本的情况进调整,或者通过复配联用达到更好的效果,例如可以使用透明质酸酶与胶原酶联用消化细胞间基质等。


同时,在进行消化处理的时候佐以机械剪切,便能使组织分散得更加均匀,样本处理效果更好。另外实验操作中还需要注意以下几点:

  • 预处理好的组织块需要在缓冲液中清洗,避免影响后续实验;

  • 酶量和作用时间应根据组织量及时调整,避免消化时间过长影响细胞状态,期间需要摇晃整个解离体系以保证组织块接触均匀;

  • 严格控制温度湿度条件,虽然胰蛋白酶发挥效果的最佳温度是56℃,但是细胞无法承受如此高温,所以需要在37℃环境进行处理,另外还有部分组织需要冷消化处理;

  • 酶的保存也需要注意,冻干粉要注意防潮,溶解后避免反复冻融,如蛋白水解酶可以自动分解,因此建议在使用前立即将其溶解,并在冰上保存2°C~8°C。


原代细胞分离过程复杂,同时整个分离处理过程都需要人工参与,机械剪切过程难以控制实验可重复性。随着科技的进步,瑞沃德单细胞悬液制备仪轻松化解这一难题,自主研发的组织处理管、酶解试剂盒和内置不同组织优化处理程序,可将组织制备成高活性单细胞悬液或组织匀浆。

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根据实际样本可在15-30min内完成活性高、均一性好的单细胞悬液制备,大大增加实验可重复性。拥有独立运行的四通道,搭配加热套实现全自动处理,提高组织处理效率。广泛应用在单细胞测序、原代细胞培养、流式分析、细胞分选、细胞治疗等研究领域。

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03

过滤清洗→后处理


在分离处理操作结束后要对样品进行过滤、离心、换液,对获得的单细胞悬液进行细胞计数和活力分析,终止反应并将细胞置于培养体系或相应的缓冲体系中。

(▲活细胞计数)


自动细胞计数仪的使用可以对原代细胞进行精准计数,瑞沃德C100自动细胞计数仪可配合多荧光通道,对悬液中的细胞进行定量分析,并同时显示明场及荧光图像,清晰呈现计数结果及细胞形态。适用于免疫学及疫苗开发、细胞治疗、肿瘤研究、干细胞及代谢研究等研究领域的细胞分析。

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细胞培养是原代细胞分离流程最后一步,瑞沃德二氧化碳培养箱,可精准控制温度、二氧化碳浓度,并且是维持高湿度环境的高性能细胞培养箱。HEPA高效过滤器可有效去除空气中的微粒污染,140℃高温干热灭菌功能可实现培养箱的定期灭菌维护,为原代细胞样品提供稳定洁净的培养环境。

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2021-09-15 16:17:50 563 0
净信单细胞悬液制备仪|制备小鼠大脑单细胞悬液

实验目的:制备小鼠大脑的单细胞悬液

实验仪器:单细胞悬液制备仪,研磨套装管,滤管,移液枪,培养皿,镊子,手术刀

实验试剂:PBS液,净信消化酶,终止液

操作步骤:

1、开机预热,打开加热模块1,加热模块2

2、取活体组织后,放入PBS液中去红,然后取20-50mg(约小米粒大小),再分成若干等分

3、把消化酶用移液器加入研磨套装管中,将加满消化酶的离心管放入预热模块中预热几分钟

4、将处理好的组织用镊子转移到加满消化酶的离心管中

5、将装满消化酶和组织的离心管放置到加热板中,选择25分钟程序,开始运行

6、程序结束取出离心管,将消化好的组织液转移到过滤管中,即得到一管单细胞悬液

仪器介绍:

上海净信单细胞制备仪JX-CKSM-6WK(6通道加热型)是一种集成金属浴消化与温和剪切组织的新一代细胞悬液制备设备,应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验,具有起始组织量小,时间短,细胞得率高,细胞活性高的特点。采用国际DIN方法设计,低噪音,使用方便,性能稳定。

应用领域:肿瘤研究 心血管研究 干细胞研究 免疫研究 神经科学研究

产品应用:

单细胞测序(Single-Cell RNASeq)

多色流式分析(Multicolor Flow Cytometry)

质谱流式细胞计数(Mass Cytometry)

原代细胞分离培养(Primary Cell Isolation And Culture)

细胞ZLCAR-T

2021-05-21 16:54:28 260 0
净信单细胞悬液制备仪|制备小鼠肝、肾、脾的单细胞悬液实验

实验目的:制备小鼠肝、肾、脾的单细胞悬液

实验仪器:单细胞悬液制备仪,研磨套装管,滤管,移液枪,培养皿,镊子,手术刀

实验试剂:PBS液,净信消化酶,终止液

操作步骤:

1、开机预热,打开加热模块1,加热模块2

2、取活体组织后,放入PBS液中去红,然后取样品

3、把消化酶用移液器加入研磨套装管中,将加满消化酶的离心管放入预热模块中预热若干分钟

4、将处理好的组织用镊子转移到加满消化酶的离心管中

5、将装满消化酶和组织的离心管放置到加热板中,选择25分钟程序,开始运行

6、程序结束取出离心管,将消化好的组织液转移到过滤管中,即得到一管单细胞悬液

肝脏组织

脾组织

肾脏组织

仪器介绍:单细胞制备仪是一种集成金属浴消化与温和剪切组织的新一代细胞悬液制备设备,应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验,具有起始组织量小,时间短,细胞得率高,细胞活性高的特点。采用国际DIN方法设计,低噪音,使用方便,性能稳定,带加热功能,对样品的消化处理过程始终处在恒温状态。

优势:

1、组织高利用率、单细胞化过程高效、单细胞高产出

2、针对临床穿刺样本,使组织的利用率达到100%,细胞产量可达10万个以上v

3、针对原细胞培养样本,在15min内完成组织到单细胞过程,降低细胞逆境时间,提高细胞存活率

4、针对组织单细胞测序,快速完成单细胞化处理,获得高产且活率在85%以上的单细胞,以小鼠组织为例:

5、针对不同的样本选择不同的程序(6组预设程序),处理样品量4*2ml/6*2ml/8*2ml

2021-09-16 17:08:55 553 0
免费SY新品|单细胞悬液制备仪,GX开启你的原代细胞实验

无数细胞生物学研究实验表明,制备高质量的单细胞悬液是开展下游实验的关键环节。但在单细胞制备过程中,你是不是常被以下问题困扰着:

  • 单细胞样品活性低、活细胞数量少;分散效果不好、细胞团较多;杂质碎片过多

  • 单细胞样品制备流程复杂,人工误差大,难以保证样品稳定性;操作过程中还可能导致细胞污染

  • 制备单细胞样品处理速度慢,效率低

  • 作为实验室新手,对组织处理过程不清楚,需花费时间摸索,得出的实验结果重复性差

以上问题,都会影响到有效单细胞数的产出及质量等,导致ZZ得到的单细胞数据分析结果不可信。

现在,你将有机会一次性告别上述所有问题。

瑞沃德全新发布的单细胞悬液制备仪采用自主研发的组织解离技术搭配组织处理管、酶解试剂盒、内置不同组织优化处理程序,可将组织智能化地制备成高活性的单细胞悬液或组织匀浆。对于神经组织、脑组织、小鼠脾 脏、肺、肝脏、心脏以及小鼠和人的肿瘤组织,实现温和、自动化的组织解离。

(▲瑞沃德单细胞悬液制备仪)


该设备不仅能有效缩短操作时间,还更好地保留了细胞抗原表位的完整性,从而保障了优异的细胞活性,有利于细胞分选、细胞分析、细胞培养等下游实验。尤其利于肿瘤研究、干细胞研究、免疫研究、神经科学研究的原代细胞培养。更标准化的组织处理流程,增强了实验的可重复性。

下面让我们一起来看看瑞沃德单细胞悬液制备仪有哪些功能优势吧!


功能优势

1.高 效

  • 四通道独立工作,可同步处理不同组织,节约实验时间

  • 可配置加热套,实现全自动样品制备

  • 一机两用,不仅可以制备出高活性的单细胞悬液还可进行组织匀浆

2.温和

  • 专业的控制电机转速平稳可靠,满足从20到4000rpm的不同应用需求

  • 配合多种酶解试剂盒、组织处理管,ZD限度保证细胞活性、降低损耗

3.智能

  • 内置标准化的处理流程不但全程可见,而且操作简单,更能支持自定义另存

  • USB直接导入并轻松同步程序,实现多台机器协同工作

4.安全

  • 配件在位检测、抖动识别等多重报警机制全面保障用户和样本安全

  • 全密封组织处理管,防止细胞污染


案例分享

用瑞沃德单细胞悬液制备仪对组织解离,是一种什么样的体验?

山东省医学科学院:“单细胞悬液制备仪对实验帮助很大,实验结果细胞活率相对较高,细胞活性更好且染色及分群表达更清楚,数据更可靠。”

记住哦,你的单细胞样本制备,宝贵的肿瘤组织等,现在统统交给瑞沃德单细胞悬液制备仪就好;有了WM的样本制备,还怕得不到理想的实验数据么?


你就不想体验一下?

心动不如行动

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2021-07-12 14:45:30 392 0
单细胞悬液制备仪对膝关节滑液样品组织的悬液制备

  此次实验主要是为膝关节滑液组织制备单细胞,让我们一起来看看净信单细胞制备仪是如何制备膝关节滑液组织单细胞悬液,对其样品前处理效果和悬液效果如何?

  

  实验地点:上海**大学医学院东区单细胞中心

  

  实验仪器:单细胞悬液制备仪(温控型)JX-CKSM-6WK

  样品前处理制备实验步骤:

  

  1、打开仪器电源开关,将仪器界面中的加热点开预热一段时间持恒温。

  

  2、将组织稍微剪切成小块,放入净信2ml研磨管中。

  

  3、加入净信消化酶旋上盖子,上下微微晃动将其组织和消化酶均匀混合。

  

  4、将混合好的研磨管放入加热模块中,再将研磨管放入热板中,盖上盖子。

  

  5、启动设备,待设备停止运行后打开仪器盖子,取出样品管

  

  6、将样品管中的液体和剩下的组织一起倒入过滤管中,再加入终止液后得到浑浊的液体,即单细胞悬液。

  

  样品处理前后效果图:

  显微镜下的细胞呈现:

  实验样品组织制备注意事项:

  

  1、消化酶和终止液均需要在冷冻环境下保存

  

  2、消化酶解冻时需在常温条件下解冻,不可以放入水浴或者其他加热仪器中解冻,温度升高对酶的活性会有很大的影响。

2022-12-19 17:27:20 136 0
单细胞悬液制备时,如何优化红细胞裂解效果?

2022-11-07 15:32:19 120 0
如何高效进行成年鼠脑单细胞悬液制备


作为构成神经系统的基本结构和功能单位,神经细胞的体外分离、培养在神经科学研究中占据前沿地位。由于神经元分离后不会再次分裂、增殖,因此在进行相关细胞实验时,需要高效地制备高质量原代神经细胞保证实验材料的供应。

然而神经细胞的分离制备难度较大,相较于新生鼠,成年鼠脑的解离更复杂,需要机械和酶解联合作用来降解细胞外基质,同时大量的髓鞘碎片和红细胞也会干扰下游实验。

那么,如何快速制备高质量的大/小鼠神经细胞悬液样本呢?接下来,我们从实验仪器及材料、实验步骤和实验结果一一介绍,希望对你的实验有所帮助。


实验仪器及材料

瑞沃德 DSC-400单细胞悬液制备仪;

瑞沃德 HJ-400 加热套;

瑞沃德 DHABE-5003大小鼠成年脑组织温和酶解试剂盒;

瑞沃德 SCT-100组织处理管;

70μm 细胞滤器;

瑞沃德眼科手术器械;

细胞培养耗材、移液枪等。


实验步骤

1、按照说明书要求,混合配置酶mix并37℃水浴激活。

2、剥离成年鼠(P>7)脑组织,暂存至盛有HBSS(含Ca2+和Mg2+)的培养皿中,用眼科镊轻轻地将脑组织的血管尽可能去除。

尽可能剔除脑组织上的血管

3、将脑组织和酶mix放于组织处理管中,用剪刀将全脑简单剪成4块。

4、将组织处理管倒置至单细胞悬液制备仪上,安装加热套,运行程序 M_ABrain_Heater_2。

5、润湿细胞滤器,过滤细胞悬液样本,300×g ,离心10 min。

使用细胞筛过滤杂质

6、转移细胞样本至15mL离心管,加入去碎片试剂后混匀,上层铺预冷的PBS,3000×g, 4℃,升速为5,降速为3,离心10min,保留下层细胞后洗涤收集。

去除碎片,收集下层细胞

7、裂红操作(可选)。

8、细胞计数及流式检测。


实验结果


使用瑞沃德单细胞悬液制备仪处理成年小鼠脑组织获得的细胞可达90%,细胞活性高,不影响下游实验。瑞沃德 DHABE-5003大小鼠成年脑组织温和酶解试剂盒,可用于成年大鼠或小鼠(P>7)全脑组织的单细胞悬液制备,可支持脑内所有神经及非神经细胞的分离。


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2022-05-30 14:29:33 160 0
流式细胞分析制备单细胞悬液collagenase i 加入多少dnase i
 
2016-05-09 02:15:47 426 1
客需为本,高标准单细胞悬液制备仪这样“炼”成

伴随着流式细胞术、单细胞基因组测序等原代细胞研究的快速发展,单细胞悬液制备的需求也日益扩增。同时,获取优质的单细胞悬液也是原代细胞研究的必需步骤。目前,人工手动操作仍是单细胞悬液制备的主要手段,但手动酶解,细胞活性率普遍偏低,耗时又耗力,对新手实验操作极不友好。而结合酶解与机械剪切原理,同时使用自动化流程来进行组织处理,可智能化地将组织制备成高活性单细胞悬液或组织匀浆,无需全程人工参与,省时省心又省力。

但国内相关技术落后于国外发展几十年,国产单细胞悬液制备仪仅占全 球市场1%的份额。国内科研人员想要体验智能高效的单细胞悬液制备仪,就不得不舍近求远,高价购买国外产品。


2020年初,通过大量的市场调查及客户调研,我们发现大量客户希望拥有一台能够实现一体化加热功能且性价比高的单细胞悬液制备仪。目前,很多客户只将酶解体系置于独立的恒温培养设备进行消化,比如置于水浴锅内或者在培养箱中加热。这种方式很大程度上影响了客户实验操作的连贯性和一致性,且实验效率和实验结果不尽人意。同时,不少客户反馈市面上常见的2通道产品无法满足他们的实验需求,仪器操作繁琐不方便。“我们希望单细胞悬液制备仪产品,不管是谁,一看便会,一做便知。”

随着客户需求及痛点在市场调查中不断清晰化,我们的单细胞悬液制备仪产品也逐渐被清晰勾勒出来:内置加热功能且控温稳定,保证实验可重复性;多通道独立运作,可同步处理不同组织,节约实验时间;开发智能操作系统,内置标准化处理流程,方便操作……


在充分了解客户真正的需求后,单细胞悬液制备仪产品正式进入研发阶段。研发初期,我们便深知在现有同类产品专利技术封锁形势下,要想生产出“让客户满意”的单细胞悬液制备仪面临着两大挑战。

第一、如何实现产品内置加热且稳定控温?单细胞悬液制备仪内置加热功能,不是简单的零部件叠加,它不仅要保持酶解体系温度的恒定,更重要的是能实时检测并保证各通道温度的均一性,防止加热过度导致细胞损伤,这就需要产品拥有完善的加热方案及高精度的元器件保驾护航。如果沿用传统加热方案实现我们对产品加热预定的效果,就需要超高精度物料匹配,但全 球市场上能满足我们要求的供应商屈指/可数,且传统加热方案在加热精度上的性能仍有待提高。为保障后续产品质量及服务的稳定性,开发新的加热方案成为研发突破关键点。得益于瑞沃德自主研发的产品体系和平台,我们借鉴了不同产品技术特性,并在此基础上,查阅大量文献和资料,同行业专家进行理论探讨,针对产品加热功能的精准算法,不断进行演算、推论、验证,在无数次新方案设计修改、硬件结构调整,软件调度优化下,我们最终完成了新加热方案的设计、验证和最终评审。

第二、如何保证各独立通道温度一致性?作为可独立运行的多通道单细胞悬液制备仪,温度精度和各通道的温度一致性是产品运行的基础,也是帮助客户更好实现酶解效果的强有力保障。为杜绝产品不同通道加热过快或过慢,我们不断调整产品加热平衡点、校准标准方案,并在市场上寻找更优质的产品元器件,通过优化电路设计、调试元器件及软件、整理优化调度逻辑,最大限度地发挥产品不同元器件性能,充分保障各通道温度精度可控及温度一致性。

从产品加热方案创新到元器件优化升级,瑞沃德单细胞悬液制备仪研发“软硬”并进,只为给客户创造出更好的精品服务。新开发的加热方案及元器件调整,大大提升了产品加热性能,客户使用产品进行加热时,即可快速达到预定温度,并以较高的温度精度持续维持,有效缩短了实验时间,提升了实验效率。


以客户需求驱动产品研发,不断寻求更优质产品元器件,优化产品加热方案,提升产品质量。经过夜以继日地努力与奋斗,我们的产品获得了客户的认可。重庆医科大学团队给予了我们高度的评价,他们说:“我们进行原细胞提取,做PCR和WB的组织都喜欢用瑞沃德单细胞悬液制备仪。因为它操作简单且功能强大。相比于其他通道的设备,瑞沃德产品的四通道设置也非常合理,经它提取出来的细胞活性高,贴壁良好。”同样的,来自电子科技大学神经免疫实验室的客户也对我们的产品赞不绝口。“以前我们做小胶质细胞分离培养时,手工提取存活率一般都在80%左右,如今我们用瑞沃德单细胞悬液制备仪进行提取,存活率高达96%,细胞瘤明显增多,效果非常好,我们非常爱用。”山东第一医科大学的客户也在产品试用中果断种草了我们的产品,“用瑞沃德单细胞悬液制备仪进行小鼠肺癌肿瘤的解离,效果比我们之前使用的设备好太多。细胞数量不仅提升了4倍多,存活率也是大大提升,我们都可以直接开展流式等相关实验,大大提升了我们的实验效率。”

产品可靠,客户夸赞,行业认可。在第二十三届中国国际高新技术成果交易会上,瑞沃德单细胞悬液制备仪凭借自主创新的加热方案及过硬的产品质量荣膺“优秀产品奖”,可谓是客户口碑与行业荣誉双认证的实力代表。

以客户为中心,快速洞察客户真正需求,才能创造出更适合客户的产品;不断驱动产品技术创新,“软硬”兼顾才能做出客户更满意的产品。这是瑞沃德单细胞悬液制备仪的研发坚守,也是瑞沃德品牌走向世界的常胜秘诀。


2022-12-08 13:55:05 126 0
瑞沃德单细胞悬液制备仪荣获第二十三届高交会优秀产品奖

第二十三届中国国际高新技术成果交易会近日在深圳圆满落幕,瑞沃德携多项自研生命科学创新产品亮相,其中单细胞悬液制备仪荣获中国国际高新技术成果交易会“优秀产品奖”,得到专家评委的充分认可与观众的喜爱。

(▲优秀产品获奖证书)

高交会是中国高新技术领域对外开放的重要窗口和高新技术成果产业化的重要平台。该会由商务部、科技部、工业和信息化部、国家发展改革委、农业农村部、国家知识产权局、中国科学院、中国工程院和深圳市人民政府共同举办,自1999年首届以来,已成功举办二十三届。

(▲高交会现场,瑞沃德展品区域)

据高交会网站信息显示,“优秀产品奖”是通过各展区负责人审核后;经由高交会相关部门组织专家,对参展企业及产品进行审核与综合评定;同时评审专家亲赴展会现场对入围产品及项目进行严格的核查;核查属实的产品和项目报高交会组委办最终审定;终甄选出的优秀参展产品。

(▲高交会现场,瑞沃德单细胞悬液制备仪)

瑞沃德单细胞悬液制备仪采用自主研发的组织解离技术搭配组织处理管、酶解试剂盒、内置不同组织优化处理程序,可将组织智能化地制备成高活性的单细胞悬液组织匀浆。对于神经组织、脑组织、小鼠脾 脏、肺、肝脏、心脏以及小鼠和人的肿瘤组织等,实现温和、自动化的组织解离。

该设备不仅能有效缩短操作时间,还能更好地保留了细胞抗原表位的完整性,从而保障了优异的细胞活性,有利于细胞分选、细胞分析、细胞培养等下游实验;尤其利于肿瘤研究、干细胞研究、免疫研究、神经科学研究、原代细胞养等;更标准化的组织处理流程,增强了实验的可重复性。

(▲华中科技大学武汉光电国家研究中心祁老师课题组在手工进行黑色素瘤组织处理细胞活率仅有31.6%的情况下,使用瑞沃德单细胞悬液制备仪,可轻松获得活率高于92%的单细胞悬液样品。)

(▲电子科大神经免疫实验室用户在提取小胶质细胞时,使用瑞沃德单细胞悬液制备仪进行新生鼠脑组织处理,手工+胰酶提取细胞活率仅为80%,手工提取+RWD试剂盒组活率提升至90%,而使用仪器和配套试剂盒可将活率提升至96%)

在原代细胞获得之后,还可基于磁力柱进行细胞分选。瑞沃德细胞分选系列产品,高活率、高纯度、低刺激,低残留,实现温和快速的细胞分选。新品即将上市,敬请期待。

(▲瑞沃德细胞分选试剂盒、细胞分选柱;高活率,高纯度;低刺激,低残留)

自2002年成立以来,瑞沃德始终把“创新研发”作为重要的发展战略,深耕生命科学领域,持续为客户创造价值。目前在职员工达600多人,其中研发人员占比25%左右,每年投入营业额的15% 进行研发,已获得近百项专利;并于2021年底成功入选“深圳创新企业100强”。产品及服务覆盖海内外 100 多个国家和地区,已助力全 球1000+科研院所,6000+高等院校,700+医疗机构取得成功。未来,瑞沃德将继续加大研发投入,进一步与客户、行业伙伴加强协作,共同为生命科学产业的进步与发展贡献智慧与力量。

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单细胞悬液制备仪及其相关耗材


2022-01-27 15:42:39 199 0
贴壁细胞计数的细胞悬液如何制备?
想问的是把贴壁细胞制成细胞悬液的过程中不是需要用缓冲液吹打么,那这个液体具体的使用量是多少?有没有什么规定?... 想问的是把贴壁细胞制成细胞悬液的过程中不是需要用缓冲液吹打么,那这个液体具体的使用量是多少?有没有什么规定? 展开
2010-05-19 11:38:01 461 1
净信通告|国内首台温控型单细胞悬液制备仪顺利下线通过客户验收

  近日,由上海净信自主研发的国内首台温控型单细胞悬液制备仪顺利下线并通过客户验收。从组织获得存活单细胞是一个复杂过程,目前市面上组织单细胞化的方法均存在处理时间长、细胞处于逆境状态时间长、 细胞得率低、细胞存活率低、操作繁琐等问题。聚焦单细胞测序领域,获得优质的细胞悬液是研究单细胞的前提条件,针对不同的样本类型,如何制备高质量的单细胞悬液是目前比较关注的问题。

  净信单细胞悬液制备仪针对组织单细胞测序,快速完成单细胞化处理,能获得高产且活率在85%以上的单细胞。


  在江苏中新医药,客户现场做了结肠癌实体瘤样本制备实验,实验结果令人满意,客户反馈极好。做测序流式没有任何问题,如果做培养就加大样品量就可以。


(制备后细胞计数)


  净信单细胞悬液制备仪是一种集成金属浴消化与温和剪切组织的新一代细胞悬液制备设备,应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验。具有起始组织量小,时间短,细胞得率高,细胞活性高的特点。采用国际DIN方法设计,低噪音,使用方便,性能稳定。这款制备仪还带加热功能,对样品的消化处理过程始终处在恒温状态。在肿瘤研究、心血管研究、干细胞研究、免疫研究、神经科学研究等领域都能应用的到。


(常见样品)


  操作简单,省时GX,仅需几步就能完成实验。


  主要优势:组织高利用率、单细胞化过程GX、单细胞高产出

  *针对临床穿刺样本,使组织的利用率达到100%,细胞产量可达10万个以上

  *针对原细胞培养样本,在15min内完成组织到单细胞过程,降低细胞逆境时间,提高细胞存活率

  *针对组织单细胞测序,快速完成单细胞化处理,获得高产且活率在85%以上的单细胞


  JX-CKSM-12WK温控型单细胞悬液制备仪是上海净信实业发展有限公司自主研发,核心成员在上海交通大学、上海市中山医院、中科院药物所等国内外知名高校或者企业从事多年产品开发或者技术研究。公司将分子生物学、细胞领域的高科技人才有效聚集在一起,突破现术瓶颈,突破进口垄断,开发出了单细胞悬液制备仪器。

  我们有强大的技术团队做我们的坚实后盾,使用净信单细胞悬液仪,让单细胞技术研究变得简单。

2021-01-28 14:48:04 295 0
净信单细胞悬液仪在肿瘤研究领域的应用

近日,2020年ZX癌症负担报告由世界卫生组织下属国际癌症研究机构(IARC)发布,报告对2020年度常见的癌症类型、导致死亡主要癌症类型以及未来的癌症发展趋势进行了全面的分析。

  

2020年最常见新发癌症类型及占比

  
  肿瘤研究领域是全世界的科研热点,随着对肿瘤研究的白热化,越来越多的科学家需要从肿瘤组织里来获得细胞,从而建立原代肿瘤细胞系、分选肿瘤干细胞或者其它细胞以进行下游的信号通路检测、药物试验、疾病发生等。在对肿瘤细胞的研究中,从肿瘤组织中获得细胞的DY步就是制备单细胞悬液。那么,细胞悬液制备一般原则是什么呢?

  

细胞悬液制备一般原则

  
  传统的单细胞悬液制备方法有机械法、酶消化法以及两者的组合等,这些方法需要繁琐的操作过程,费时费力。净信单细胞悬液仪将会使单细胞悬液制备变得快速、简单。仅需30min即可获得大量单细胞悬液,细胞活性可达80%以上,具有自动温控的特点。样品范围包括人类及小鼠肿瘤组织/正常组织,哺乳动物软组织,植物愈伤及根尖组织。

  SM-12型单细胞悬液仪器,由净信实业发展有限公司自主研发,核心成员在上海交通大学、上海市中山医院、中科院药物所等国内外知名高校或者企业从事多年产品开发或者技术研究。公司将分子生物学、细胞领域的高科技人才有效聚集在一起,突破现术瓶颈,突破进口垄断,开发出了单细胞悬液仪器。
  
  从组织获得存活单细胞是一个复杂过程,目前市面上组织单细胞化的方法有采用机器处理或者人工处理方法,以上处理方法均存在处理时间长、细胞处于逆境状态时间长、 细胞得率低、细胞存活率低、操作繁琐等问题。单细胞悬液仪结合特定组织松解剂,快速、轻柔、安全、简捷、GX、自动化的从组织如(脂肪、骨骼肌、动脉血管内皮、心脏、肝脏、pi脏、肺泡、肾脏、脑、肿瘤)30min内全自动完成组织单细胞的解离。

  

操作流程

  
  净信单细胞悬液仪可应用于单细胞测序、多色流式分析、质谱流式细胞技术、原代细胞分离培养、细胞ZL等。具有组织利用率高、单细胞化过程GX、大细胞高产出的优势。
  
  使用净信单细胞悬液仪,让科学研究变得简单GX。

2020-12-29 10:53:28 345 0
进行酸碱度试验时,需制备土悬液,该悬液土样应过多大孔径筛
 
2017-06-04 01:33:45 416 1
制备冻存管菌悬液的溶液中为什么要加入甘油
 
2016-08-27 22:51:07 411 1
制备冻存管菌悬液的溶液中为什么要加甘油
 
2016-01-18 09:57:30 397 1
做流式细胞时候,制备细胞悬液加入荧光染料后,还要做什么处理么?
收集的荧光会不会包含有来自未结合于抗原的抗体?就是说会不会有游离的抗体,且激光激发标记于游离抗体上的荧光素?
2012-10-23 13:50:15 278 1
固态电极/电解质材料气相制备方法好还是液相制备方法好
 
2017-05-02 03:04:27 356 1

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