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现在市场上常见的电流探头类型是磁芯电流探头，或夹合式电流探头。这是一种间接电流检测技术，探头夹住带待测导线，以实现非接触性电流测量。探头的输出端会产生与测量的电流振幅成正比的电压信号。从而实现无创测定或隔离测量，过程中探头不会与待测设备进行电气连接。夹合式电流探头有交流和交流/直流不同的类型，并且有各种电流转换换算系数可用。电流探头被设计用于感应导体周围电磁场强度，并将其转为对应的电压以供示波器测量。

在常见的夹合式电流探头内采用了两种传感器技术。一种是测量直流或低频信号的霍尔效应传感器。另一项常见技术是使用电流互感器。交流电流在一次侧内产生磁场，然后在第二绕组电路中引出电流，并被送至至测量仪。第二绕组将带有与通过主要绕组电流成正比的感应电压，此技术仅可用于测量交流电流。

（电流探头）

电流探头是根据法拉第原理设计的用来测量导线中干扰电流信号的磁环，本质上是一个匝数为1的变压器。使用电流探头能够测量流经导线的电流大小。电流探头分为AC/DC电流探头以及AC电流探头。前者可以测量直流以及交流电流的大小，后者只可以测量交流电流的大小。

电流探头有两种形式，一种特定的探头类型，称为分芯探头。这类探头的线圈放在"U"形芯上，"U"形芯带有一铁氧体滑块，滑块盖住"U"形顶部。这类探头的优点在于，铁氧体滑块可以收缩，使得探头能够方便地卡到测量电流的导线上。在测量完成时，滑块可以收缩，探头可以移到其它导线上。另外一种电流探头是实芯电流转换器。这些电流转换器完全绕在被测导线上。结果，必须断开被测导线，把导线穿过转换器，然后重新把导线连接到电路上，才能安装这些转换器。实芯探头的主要优势是它们体积非常小，提供了非常快的频响，可以测量快速、低幅度电流脉冲和AC信号。到目前为止，分芯电流探头是常用的探头类型，其分为AC型和AC/DC型。

电流探头的使用方法：

A电容测试时使用的导线应选用横截面面积05mm2（AWG20）以上的导线

B将待测电容连接上导线时要将电容移动至基板的锡面侧，利用A和B方法测定，此外，尽可能的将导线缩短。

纹波电流测试示波器调试方法

A、调试

1、将对应的测试通道探头设置为电流，选择测是耦合直流档位。

2、将宽带选为20MHZ。

3、调试示波器屏幕显示测量值均方根大值峰峰值频率四个测量项目。

B、纹波电流测试前需对电流探头进行消磁调试。

电流探头虽然没有示波器的电压探头那么常见，但是它的作用是其他探头无法代替的。它能够在不破坏导线的情况下测量流经导线的电流。当电流探头与电压探头配合使用时能够测试功率、相位等数据。这对于测试测量系统来说非常的有用。

你了解电流探头了吗，你知道如何使用电流探头吗，如果想了解更多电流探头相关知识，欢迎访问普科PRBTEK网。

问：何为VOC ?  

答：VOC是 volatile organic compounds的英文简称，常温下以蒸汽形式存在于空气中的一类有机化合物，即会产生危害的那一类挥发性有机物，主要指烷烃类，芳烃类，卤代烃类，醛酮类等。

VOC来源

       室外：主要来自燃料燃烧和交通运输

       室内：主要来自燃煤和天然气等燃烧产物、吸烟、采暖和烹调等得烟雾，建筑和装饰材料、家具、家用电器、清洁剂和人体本身的排放等

       烟草行业：油墨、有机溶剂

       纺织品行业：鞋类制品所用的胶水等

       玩具行业：涂改液、香味玩具等

       家具装饰材料：涂料、油漆、胶黏剂等

       汽车配件材料：胶水、油漆等

       电子电气行业：在较高温度下使用时会挥发出VOC、电子五金的清洁溶剂等

VOC危害

对人体有以下三种危害：

1、基因毒性和致癌性

       肺，血液，肝脏，肾脏及新陈代谢中毒等

2、粘膜刺激

       眼睛粘膜刺激，呼吸道及皮肤损害

3、气味和感官危害

       鼻粘膜刺激，产生头痛，乏力和昏睡等

常压蒸馏仪如何产生VOC？

       在常压蒸馏过程中，样品的转移，倾倒和馏分的回收过程无时无刻不在产生VOC，尤其是馏分的回收，耗时久，聚集性较大是VOC产生的主要原因。

安东帕馏程仪通过三个设计，杜绝VOC的产生

       * 接受室体积缩小

       * VOC吸收装置

       * 量筒密封

如何wan美的处理VOC

       利用安东帕常压蒸馏分析仪Diana 700，此仪器标配了GX的 VOC 处理装置，可wan美的处理VOC。

VOC处理第1步 

（红框）

VOC吸收装置

VOC处理第2步 

（红框）

量筒密封装置

通过机械上压，密封量筒，可杜绝破损。

VOC处理第3步 

（红框）

接收室体积

接收室体积=1根量筒的体积空间

可减少VOC聚集，杜绝冷凝水。

处理优势

全封闭的小体积接收室设计

让VOC无处遁寻

Anton paar 馏程仪的接收室体积=1根量筒的体积

       * 更精确的温度控制——防止样品挥发 

       * 更微量的VOC排放——量筒密封严实 

       * 更GX的VOC吸收——主动抽气过滤并同时杜绝冷凝水

如此wan美的VOC处理装置您还在等什么？

关于安东帕 

常压蒸馏分析仪 Diana 700

       Diana 700 是在大气压下自动执行高精度馏程范围测定的理想解决方案。符合此类特征的典型样品包括石化产品、芳香烃以及其他挥发性有机液体。高端技术结合独特功能，使得操作极其简便、GX、安全。

如今，电子记录与签名的应用场景越来越多。可靠的电子签名，需具备与手写签名或者盖章同等法律效力。与纸质记录相比，电子记录的优点是节省了成本，减少了人员管理和文件维护文件，提高了数据安全性以及准确性。

早在1997年，CFR就对电子记录和电子签名作出了规定，即21 CFR Part 11。这项法规适用于在美国开展业务的制药公司、制药公司的供应商、制药相关分析仪器的制造商等。只有符合此法规，才可以正常销往美国市场，并且遵照此法规而保留的数据才可以作为通过检验或者今后追溯的有效数据来源。此法规确保了电子数据的有效性和可靠性，也是FDA的法规依据。

21 CFR Part 11

CFR全称Code of Federal Regulations即《美国联邦法规》，共有50篇内容，分别代表联邦法规的各个领域。其中21 CFR为联邦法规第21篇“食品与药品”（Title 21-Food and Drug），该篇有9卷、3章、共1499部。如下图：

Part 11则代表第11部。在Part 11规定中，电子记录被认为具有与书面记录和手写签名同等的效力，被美国的生物医药企业、医院、研究所和实验室广泛接受和遵照执行。

在21 CFR Part 11中

有下列几个重要信息需要我们了解

■ 电子记录

由计算机系统创建、修改、维护、存档、检索或分发的数字形式的文本、图形、数据、音频、图片或其他信息表示的任何组合。

■ 电子签名

由个人执行、采用或授权的，与个人手写签名具有法律约束力等效的任何符号或一系列符号的计算机数据汇编。

■ 封闭系统

由专属人员负责的记录内容的系统。

这里要特别说明一下，21 CFR Part 11法规是针对整个系统而言的。不仅仅需要分析仪器符合法规，还包括使用者的行为规范、企业管理政策以及ID管理等方面的合规。

如此重要的电子签名，我们一定给您安排上！瑞士万通Mira P手持式拉曼光谱仪专注入厂原辅料定性鉴别与确认。Mira P配备的Mira Cal软件带有多种特色功能，确保满足21 CFR Part 11对数据安全和审计跟踪的所有要求。

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●多级别的访问权限；默认包括3个预定义的不同权限用户。

●审计追踪功能可以追溯所有操作。

●安全电子记录功能可将数据同步到电脑端的安全数据库。

●可一键生成包含所有必要信息（设备信息、参数和电子签名）。

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很多客户在选择Proton的

氢气发生器时，

总是会问到PEM技术，

今天小编就给大家详细解释下，

帮助您更加充分地

了解我们的产品和技术。

“PEM就是质子交换膜技术，通过直接电解纯水产生氢气，无需添加碱液。较传统碱液电解制氢，PEM技术制氢效率高，能耗低，环保，并且不需要额外的腐蚀维护。”

质子交换膜纯水电解槽

 Proton氢气发生器采用催化电极和质子交换膜（PEM）技术，提高水电解速率和氢气转化率。

当电极通上直流电后，处在正极的水分子在催化剂的催化作用下迅速被氧化成氧和氢离子，并释放电荷；氢离子透过质子交换膜移动到负极并获得电子，由此产生了氢气。

整个电解过程中不产生氢气反渗透，能耗低，转化效率高。

纯水电解原理

美国Proton在设计和研发氢气发生器已有20多年的成功经验，并且已将质子膜纯水电解技术推广到了不同领域。

从实验室分析应用到半导体设备制造，以及军事航天航空领域均有Proton提供完整解决方案。 

THE END

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在细胞培养系列文章的前两弹中，我们介绍了细胞培养相关知识以及细胞房应该如何建设。那么在细胞培养最终章，我们将视线聚焦到常常会影响大家实验进程的一部分——细胞污染。

什么是细胞污染？

凡在细胞培养环境中混入对细胞生长以及生存有害的成分以及造成细胞不纯的异物都应视为污染。

一般情况下，细胞污染根据污染源的不同，可分为物理污染、化学污染和生物污染。

一、物理污染

物理污染是细胞培养过程中最容易被实验人员忽视的一种污染，往往是由一些放射性物质、辐射、或者是温度和其他物理环境的变化引发的。

这些物理性的变化会改变细胞培养体系中的一些生化成分，进而影响细胞的生长，导致细胞生长受抑制甚至死亡，或者细胞的代谢发生变化。

如何避免物理污染的产生？

通过合理设计细胞房布局和规范实验操作可以大大降低物理污染的概率。

1、合理设计实验室布局

一些会引发机械震动的设备如涡旋振动仪、离心机等，建议不要放在二氧化碳培养箱附近。常用试剂按照存放要求（4℃或者-20℃的温度条件下，某些特殊试剂有避光的要求）置于固定的位置，并且避免周围有同位素或者其他放射性物质的存在。

2、规范实验操作

培养箱在使用过程中，尽量避免频繁开关门以免造成二氧化碳浓度和温度的长时间或者大幅度的波动。处理细胞（如进行传代操作）时，也不宜长时间让细胞处于室温状态，影响其生长。

用于细胞培养的培养基、缓冲液、胎牛血清等，一般情况下需保证温度在37℃左右时再用于细胞，以免温度过低损伤细胞。

二、化学污染

化学污染往往存在于培养环境的各种介质中，是造成细胞培养过程中常见的污染之一。培养介质中的杂质、水、试剂、耗材、以及常用的玻璃器皿等都可能造成化学污染。

一些常用的玻璃器皿，清洗不到位也会导致一些清洗剂的残留，进而影响其盛放试剂的纯净度。

在细胞培养过程最常使用到的水（包括蒸馏水、双蒸水、超纯水等），或多或少都会存在一些杂质。即使是去除了金属离子、内毒素等的超纯水，也会随着放置时间纯净度会下降，在实验室中尽量需要现配现用。另外，大部分自行配制的试剂溶液，依据性质不同需要通过过滤或者高温灭菌的方式除去其中的杂质。

如何避免化学污染的产生？

严格清洗实验室常用器皿，以及控制用水和试剂能极大的降低化学污染的风险。

细胞实验常用的玻璃器皿建议进行多层级清洗再用蒸馏水润洗灭菌后使用；实验室用水建议即配即用。一些试剂如胎牛血清这种细胞培养过程中必不可少的。但由于血液物质的成分复杂性，和生产工艺的成熟度不同，导致每一批次的血清制品都会有略微的差别。尽可能的使用同一批次的血清产品，是保证化学环境稳定的前提。

三、生物污染

生物污染是细胞培养新手最容易遇到的一种污染情况。通常情况下科研人员普遍认知的污染是细菌污染，其实生物污染还包含真菌、病毒、支原体、酵母等其他微生物以及不同细胞之间的交叉污染。

常见的细菌通常是大肠杆菌、葡萄球菌等。细菌污染比较容易察觉，细菌的快速增殖会产生大量的酸性代谢物质，导致培养基迅速变黄，并有肉眼可见的浑浊现象。在细胞培养过程中，如无特殊要求，在培养液中加入一定浓度的抗生素是有助于抵御细菌污染的。

相较而下，真菌的生长就会缓慢许多，其对细胞培养体系的影响也相对较慢。一般情况下，实验室常见的产生污染的真菌多为白色念珠菌、酵母菌、黑霉菌等。这些菌株在污染后期往往会形成白色或者是黄色的肉眼可见的漂浮物，在高倍显微镜下也可以看到明显的菌丝。

而对于病毒和支原体这种污染情况，则更难在污染初期被研究人员察觉，并且会在潜移默化中对细胞的生长增殖产生一定的危害与影响。

另外，细胞污染也是一种生物污染，如在多种细胞培养的过程中，某细胞混入了另一种细胞的培养体系。

如何避免生物污染的产生？

以上生物污染的发生，往往是实验人员在同时进行多次细胞传代、操作时未更换吸头或是共用移液管等造成的。严格标准化执行无菌操作流程就可以避免。
同时，实验人员也需要保持个人卫生，在开始实验操作前，应保证实验服、手套、口罩等防护措施准备齐全。

无论何种污染，合理的使用规范都能有效避免。那么为细胞选择一个合适的“家”是在细胞培养中最最重要的一步，瑞沃德二氧化碳培养箱将是您的不二之选。

瑞沃德二氧化碳培养箱，通过精 准控制温度、二氧化碳浓度，维持内腔高饱和湿度，并采用140℃高温干热灭菌程序保证高洁净度，为细胞提供更加稳定的培养环境。是干细胞研究、免疫学研究、神经生物学研究和癌症研究等领域必不可少的细胞培养工具。

瑞沃德二氧化碳培养箱

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脑立体定位手术是一种用于微创操作大脑的方法，通过脑图谱和三维坐标系可以准确地定位大脑内部的小目标，并对其执行一些操作，例如消融（切除），活检，病变，注射，刺激，植入等。

//神经科学家面临的难题

在20世纪以前，神经外科医生在进行脑部手术时面临着一个重要问题，脑部病变的区域若位置较深，需要先将大脑皮层切开，手术创伤面积大，可能损伤重要功能区域，并且往往不能精确找到目标位点。

//DY台脑立体定位设备问世

1908年，英国两位科学家Victor Horsley和Robert H. Clarke首先发明了立体定位的方法（图1），这种定位的方法成功运用了笛卡尔坐标系统，即通过与三个平面的关系来定义空间中的一个点，每个平面均与另两个垂直，并且所有的平面可相交于一个公共点（图2）。

图片来源于《Textbook of Stereotactic and Functional Neurosurgery》

人类头骨和脑之间的空间关系高度可变，因此很难将Horsley-Clarke仪器用于人脑上，然而，通过脑部X射线照相术，可以使用大脑内部的参考点，而不是颅骨表面标志。人类的DY台立体定向设备使用松果体和门罗孔作为参考点。后来，其他结构，如前连合和后连合，成为最常用的脑内参考点。

在1947年至1949年之间，两名美国神经外科医生Ernest A. Spiegel和Henry T. Wycis，以及瑞典神经外科医生Lars Leksell使用这种方法开发了DY台用于人体脑部手术的立体定位设备。1976年，多伦多大学和多伦多综合医院共同开发了一种使用计算机辅助成像的系统，以帮助使目标的位置更加精确。随着定位方法的不断发展，目前采用计算机断层扫描、磁共振成像和立体定向定位等方式结合来引导手术，定位手术也越来越JZ。

//瑞沃德推出首台脑立体定位仪获科研专家大力支持

瑞沃德成立之初，就致力于动物脑立体定位仪的研发，2004年便推出了DY台标准型脑立体定位仪（图3），其精度达到100μm，后经过不断的改良，精度达到10μm（图4）同时用户在数显屏上可直接读取坐标，使用更加方便GX。

作为公司早期开发的产品之一，瑞沃德脑立体定位仪的质量已经达到国外同类产品水平，并获得ZG科学院昆明动物研究所徐林老师的大力支持。在购买和使用瑞沃德首台脑立体定位仪的过程中，徐林老师为公司产品的优化提供了很多宝贵的建议。

在推出首台脑立体定位仪之后，瑞沃德陆续推出了一系列不同款式的定位仪，如轻便型、滑轨型、电磁兼容型及大动物型，满足各类动物脑立体定位手术的需求（图5），受到更多用户的高度肯定。2007年，轻便型脑立体定位仪上市，适配器直接固定至底座上，不受经典的“U”型支架的束缚，动物头部操作空间更大；2008年，推出滑轨型脑立体定位仪，AP方向（Y轴）设计为滑轨，前后位移距离200mm，满足了啮齿类动物脊髓手术操作的需求；2009年相继推出了MRI型和大动物型脑立体定位仪，MRI型满足了电磁环境下动物脑立体定位需求，大动物型定位仪可实现大动物如猪、狗、猴等大动物脑部的定位。

//坚守匠心精神 打造极 致产品

在行业内，脑立体定位仪普遍存在着操作臂旋转手感偏重、操作臂松紧不一致、长时间使用后产生回旋（gap）的问题。而我们没有止步不前，秉持工匠精神，彻底解决了产品操作臂回旋的问题，也改善了丝杆手感偏重问题，同时，修复产品操作臂松紧不一致的情况，进一步提升了产品的精度。

2020年，又经过不断的技术突破，瑞沃德全新推出了两款脑立体定位仪，全自动脑立体定位仪（图6）和旋转型数显脑立体定位仪（图7）。全自动脑立体定位仪通过电机驱动三维操作臂的运行，精度可高达1μm，对于较小核团的定位更加JZ；软件内置脑图谱，可实时观察探针相对于脑图谱的位置，可更加JZ直观地进行脑立体定位手术；三大自动化程序（自动开颅、组织移除及多位点注射程序）大大减少了人为操作的误差及损伤。

旋转型数显脑立体定位仪专为GXJZ调节颅骨水平而设计，旋转适配器可以将颅骨左右摆动±30°，上下摆动±10°，通过旋转即可调节颅骨水平，其配件水平校准器用来指示颅骨两点的高度差（精度0.01mm），ZX放大镜帮助将动物的Bregma点定位至旋转适配器旋转轴的交点，该点在调节颅骨水平时坐标不变，因此无需重复定Bregma点，节省大量调平的时间。

目前，瑞沃德定位仪已经助力海内外80多个国家和地区的科研人员发表文献2000+篇，其中包含Nature、Cell、Science等多篇高分文献。

一直以来，瑞沃德始终坚持以客户需求为导向，秉承为“生命品质的提升贡献智慧和力量”的发展理念，以脑立体定位仪为起点，同ZG神经科学事业一起成长，紧随前沿科学技术，不断加强研发投入，实现产品创新、技术创新、服务创新，至今已构成完整的神经科学解决方案，涵盖动物手术造模，行为学检测与评估，动物活体成像，神经信号检测与调控，细胞分子检测等多个方向，全面助力ZG神经科学的发展。未来，瑞沃德也将持续用匠心精神为客户提供更加优质的解决方案和服务。

答题有奖

前十位提交并答对者赠送一套价值1500元手术器械

价值1500元一套的奖品

奖品以实际型号为准

复制链接，开始答题：https://www.wenjuan.in/s/ueUzYb/

　　国家食品药品监督管理总局 (CFDA) 发布的2010版GMP法规的新附录《计算机化系统》和《确认与验证》于 2015 年 12 月 1 日生效，法规明确了对数据输入准确性和数据处理过程正确的要求，以保证数据的可靠性和完整性。

普析公司针对本次法规新附录要求为客户提供所需一揽子解决方案。涉及到药品生产所需的多款主要分析仪器，包括紫外系列、原子吸收、液相色谱、气相色谱产品软件，以及针对各类仪器分析数据备份系统。在验证与确认部分，提供一系列专用支持软件和试剂包及验证服务，节省您的人力和物力成本，帮助您轻松的完成软、硬件IQ、OQ、PQ的各个项目的验证，通过GMP飞行检查。

解决方案特点概述：

符合法规

完全符合GMP新增附录《计算机化系统》与《确认与验证》的要求。系统含有：访问控制、权限分配、审计追踪、电子签名和备份恢复五方面功能。

专业规范

通过权威专家指导及对50家客户实际调研，整合公司紫外、原吸、气相、液相四个系列产品，提供针对ZG、美国、欧洲3套GMP标准下统一的规范化解决方案。

经济适用

利用本地化团队服务优势，针对每个用户实际需求，定制高性价比的数据完整性解决方案。数据备份兼容所有厂家的数据。一次投入，所有设备可用。

方便快捷

系统设计考虑用户的安装和使用便捷性。将复杂的数据完整性要求，转变为几步简单软件操作，项目管理、数据备份一键化的操作，无需专业IT人员。

安全可靠

数据备份系统保障数据实时同步到服务器；支持同时备份到多个地址；定期校验备份文件正确性；周期性进行数据整体打包备份，确保数据安全可靠。

服务全面

分布在全国100名以上具有验证资质的服务工程师团队，配备专业验证工具和试剂。快速帮助用户完成数据完整性培训、方案、安装、验证、维护等各项服务。

解决方案技术交流会

解决方案从3月中旬开始推广实施，到目前为止已经在全国各地开展技术交流会15场，参会人员累计达到3000余人，厂家超过1000家，通过和各个专家、厂家人员的交流探讨，不断改进项目中的不足，目前，普析公司产品已经逐步得到厂家的认可，月销量不断上升。

自今年年初开始，国家药监局飞行检查频繁，吊销了一大批不符合GMP规范、且不积极整改的厂家的GMP执照，自普析公司产品上市以来，帮助了一大批厂家顺利通过飞行检查，得到了专家、厂家、飞检人员的认可。

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以下是普析公司到目前为止开展的技术交流会列表，陆续还会在全国各地展开几十场对GMP的宣讲工作：

以下是普析公司部分交流会现场实录：

      恶臭是各种气味（异味）的总称，大气、水、废弃物中的异味通过空气介质，作用于人的嗅觉思维而被感知；表征它不仅要靠分析数据，还要通过人们的感知思维进行分析和判断。根据国内外有关论述，可将恶臭定义为：凡是能损害人类生活环境、产生令人难以忍受的气味或使人产生不愉快感觉的气体通称恶臭。 

  恶臭物质的来源和种类

恶臭造成的影响

对社会的影响：恶化环境引发投诉、浪费土地资源、破坏生态环境
对经济的影响：降低工作效率、减少区域投资、减少人流量和购买力、影响旅游区经济效益
对居民的影响：心情不悦，情绪失控，健康伤害

恶臭监测面对的困难

 恶臭监测得力助手

♦ 便携/车载式PEN型恶臭监测仪

 在线/便携OLFOSENSE型恶臭监测系统

 ♦在线/便携多组分气体监测仪

监测过程

       凡在细胞培养环境中混入对细胞生长以及生存有害的成分以及造成细胞不纯的异物都应视为污染。

       一般情况下，细胞污染根据污染源的不同，可分为物理污染、化学污染和生物污染。

物理污染

       物理污染是细胞培养过程中Z容易被实验人员忽视的一种污染，往往是由一些放射性物质、辐射、或者是温度和其他物理环境的变化引发的。

       这些物理性的变化会改变细胞培养体系中的一些生化成分，进而影响细胞的生长，导致细胞生长受YZ甚至死亡，或者细胞的代谢发生变化。

       通过合理设计细胞房布局和规范实验操作可以大大降低物理污染的概率。

       一些会引发机械震动的设备如涡旋振动仪、离心机等，建议不要放在二氧化碳培养箱附近。常用试剂按照存放要求（4℃或者-20℃的温度条件下，某些特殊试剂有避光的要求）置于固定的位置，并且避免周围有同位素或者其他放射性物质的存在。

       操作上，培养箱在使用过程中，尽量避免频繁开关门以免造成二氧化碳浓度和温度的长时间或者大幅度的波动。处理细胞（如进行传代操作）时，也不宜长时间让细胞处于室温状态，影响其生长。同时，用于细胞培养的培养基、缓冲液、胎牛血清等，一般情况下需保证温度在37℃左右时再用于细胞，以免温度过低损伤细胞。

化学污染

       化学污染往往存在于培养环境的各种介质中，造成细胞培养过程中常见的污染之一。

       培养介质中的杂质、水、试剂、耗材、以及常用的玻璃器皿等都可能造成化学污染。

       在细胞培养过程Z常使用到的水（包括蒸馏水、双蒸水、超纯水等），或多或少都会存在一些杂质。即使是去除了金属离子、内毒素等的超纯水，也会随着放置时间纯净度会下降，在实验室中尽量需要现配现用。另外，大部分自行配制的试剂溶液，依据性质不同需要通过过滤或者高温灭菌的方式除去其中的杂质。

       在细胞培养过程中，牛血清是必不可少的一个天然添加物。但由于血液物质的成分复杂性，导致每一批次的血清制品都会有略微的差别。尽可能的使用同一批次的血清产品，是保证减小化学化境变化的前提。

       一些常用的玻璃器皿，清洗不到位（建议多层级清洗后再用蒸馏水润洗）也会导致一些清洗剂的残留，进而影响其盛放试剂的纯度。

生物污染

       生物污染是细胞培养新手Z容易遇到的一种污染情况。通常情况下科研人员普遍认知的污染是细菌污染，其实生物污染还包含真菌、病毒、支原体、酵母等其他微生物以及不同细胞之间的交叉污染。

酵母污染

（图源：UNC Lineberger Comprehensive Cancer Center）

       实验室常见的细菌通常是大肠杆菌、葡萄球菌等。细菌污染比较容易察觉，细菌的快速增殖会产生大量的酸性代谢物质，导致培养基迅速变黄，并有肉眼可见的浑浊现象。在细胞培养过程中，如无特殊要求，在培养液中加入一定浓度的抗生素是有助于抵御细菌污染的。

细菌污染

（图源：UNC Lineberger Comprehensive Cancer Center）

       相较而下，真菌的生长就会缓慢许多，其对细胞培养体系的影响也相对较慢。一般情况下，实验室常见的产生污染的真菌多为白色念珠菌、酵母菌、黑霉菌等。这些菌株在污染后期往往会形成白色或者是黄色的肉眼可见的漂浮物，在高倍显微镜下也可以看到明显的菌丝。

真菌污染

（图源：UNC Lineberger Comprehensive Cancer Center）

       而对于病毒和支原体这种污染情况，则更难在污染初期被研究人员察觉，并且会在潜移默化中对细胞的生长增殖产生一定的危害与影响。

支原体污染

（图源：Contamination of Tissue Cultures by Mycoplasmas）

       另外，细胞污染也是一种生物污染，如在多个细胞系培养的过程中，某细胞混入了另一种细胞的培养体系，导致不纯。这种情况通常是实验操作人员进行同时对多种细胞传代或者处理时未更换移液枪枪头或是共用移液管等造成的。严格标准化的操作流程可以避免这种情况的发生。

       总之，生物污染的发生和化学污染类似，通常是多因素的。通常情况下，保持实验人员个人的卫生与正确的操作方式、管理好细胞房的布局与良好的通风体系、严格控制所用关键试剂与耗材的来源与品质，是降低生物污染的先要。如在某些疯牛病疫区产出的胎牛血清，其血源有很大风险携带疯牛病毒、口蹄疫病毒等影响细胞生长的病毒。同时，某些品质不好的血清还会带来黑胶虫污染的困扰。选择海关允许合法进口的并且有严格质检的牛血清产品，就能从根源上杜绝胎牛血清带来污染的可能性。

       瑞沃德AlphaCell特级胎牛血清，其血源来自新西兰和澳大利亚的天然纯净牧场内严格编码的牧牛。采用世界ling先的心脏穿刺技术采集原料血，通过低温离心、多次过滤，并于超洁净车间进行无菌灌装后，再冷链运输至国内，全程严格监管，有效杜绝污染。

近年来组织透明化方法发展得如火如荼，目前组织透明化方法有油性，基于水凝胶和水性的组织透明化方法。其中油性组织透明化方法主要有BABB, 3DISCO, uDISCO，FDISCO和 PEGASOS等，基于水凝胶的透明化方法有CLARITY和SHIELD，水性组织透明化方法有CLearT/CLearT2,SeeDB, FRUIT, Scale和CUBIC等方法。乱花渐欲迷人眼，面对种类如此繁多的透明化方法，我们又该如何选择呢？那么就让我们一起来看看每种透明化方法有什么优缺点吧！

1. 油性组织透明化方法

油性组织透明化技术主要是应用含有高折射率介质的光学透明剂取代组织中水分和脂质来平衡组织折射率，使组织达到光学透明。油性组织透明化方法具有较强的透明化效果，但是组织中的荧光蛋白容易被破坏，信号保存度低。
BABB透明化方法采用梯度浓度的乙醇对生物样本进行脱水，随后用BABB试剂匹配组织的折射率。该方法是一种快速且透明性好的生物组织透明化方法，能够充分的透明胚胎和幼鼠的脑，但是乙醇脱水会导致内源性荧光蛋白淬灭，因而限制了该方法在含转基因荧光蛋白的组织样品中使用。为了解决这一问题，采用四氢呋喃代替乙醇脱水，同时应用二苄醚（DBE）替代BABB提高透明效率，开发出了基于四氢呋喃和DBE的新型透明化方法3DISCO。3DISCO能够快速透明多种器官组织，包括小鼠大脑，肺脏，肿瘤及人类胚胎等，并有效延长了荧光蛋白的表达时间。虽然3DISCO能够保护内源性荧光蛋白，但是DBE的降解产物如过氧化物或醛类物质，会对荧光蛋白产生有害干扰，使荧光蛋白信号仅能维持几天。为了更有效的保存内源性荧光蛋白，一种基于二苯醚（DPE）的透明化技术uDISCO,可以GX透明啮齿类动物及临床人类标本，有效保存荧光蛋白信号长达数月，但是对于绿色荧光蛋白表达水平较低的样品，该方法保存荧光蛋白信号的能力并不理想。a-uDISCO是在uDISCO的基础上发展出来的，通过调整PH值从而提高了样本的信号强度和稳定性。但是uDISCO和a-uDISCO对色素含量较高及硬组织的透明效果欠佳。为了提高透明效果，一种基于聚乙二醇(PEG)的新型全组织透明技术PEGASOS被开发，该方法脱钙，脱色，脱水，脱脂等优化处理，首次实现了对动物软、硬组织的同时透明化。虽然PEGASOS具有较好的透明化效果，也适用于生物体不同类型的组织。然而此类方法也存在透明试剂毒性较大，易溶解物镜结构中的粘合剂、操作步骤繁琐，组织脱水收缩等不足之处。
油性组织透明化方法能够快速GX透明多种样本组织，但是油性试剂透明会导致样本皱缩，对组织结构和蛋白具有潜在的破坏性，且所使用试剂具有一定的毒性和腐蚀性，限制了油性透明化方法的广泛应用。

2. 水性组织透明化方法

由于油性透明化存在的诸多缺点和局限性导致水性透明化方法应运而生。水性透明化与油性透明化方法的较大的区别在于选择的生化试剂是否有强亲水性。由于组织中荧光蛋白分子上带有亲水基团，与油性溶剂相比亲水溶剂更有利于荧光蛋白信号的保存。更适用于自带荧光的组织样本的透明化。亲水性试剂透明主要包括：单纯浸泡透明和高水化脱脂透明。

浸泡型透明化技术是将样品浸泡在高折射率溶液中利用渗透压使组织逐渐透明化，该方法不去除脂质，利用高折射率溶液替换组织内外的液体，以平衡折射率，浸泡型透明化方法常适用于较小样本的透明化处理。ClearT是基于甲酰胺的浸泡型透明化方法，该方法透明速度快，成像效果好，但会使组织略微膨胀，且会使样本荧光信号淬灭。PEG可以稳定蛋白质构象，继而发展了可保留荧光蛋白的ClearT2的透明化技术，但该方法透明度比clearT低，透明化能力受限。SeeDB技术以果糖和硫代甘油为主要成分。能在几天内将样本透明化，且体积变化小，并可以与亲脂性染料兼容。但该方法因果糖黏度大导致在组织内的渗透性较低。由于SeeDB黏度极高，在SeeDB基础上衍生了FRUIT透明化方法，该方法选择尿素作为试剂中另一成分，降低了果糖黏度，大大提高试剂流动性和渗透性，加速了试剂在组织中的扩散速率。虽然浸泡型透明化操作比较简单方便，但浸泡型透明化方法不能去除脂质，因此通过该方法处理的样本透明度有限。

去除样本的脂质可以显著提高透明化的效率和质量，胺基醇类和去垢剂类物质如SDS、Triton X-100可以有效去除脂类物质。水化法通过在透明化过程中去除脂质后，利用水化作用降低样本折射率进而实现组织透明化。由于尿素具有很强的水化能力，Scale透明化技术就是基于尿素水化作用的一种透明化方法，该方法可保留荧光信号，但该方法操作时间较长，且易导致组织破碎。CUBIC在Scale技术之上添加了胺基醇，可以清除血红素使组织脱色，提高透明化水平。UbasM也是一种基于尿素，葡甲胺和糖类的透明化方法，透明速度快，荧光信号保护较好且膜脂完整的一种透明化方法，可对厘米尺度的样品进行透明和三维成像。

3. 水凝胶组织透明化方法

去垢剂可以GX的去除样本中的脂类物质，但是高浓度的去垢剂处理样本可能会使样本发生形变。通过将样本包埋在水凝胶中，使水凝胶与样本中的蛋白质和核酸分子形成共价连接便可固定和保护细胞结构，再将样本置于透明化试剂中即可避免样本发生这种形变。CLARITY透明化方法利用凝胶包埋样本，并利用电场力去除样本的脂质从而使样本快速透明。SHIELD透明化方法通过环氧化合物P3PE固定组织实现蛋白的保护，之后使用SDS进行被动或主动除脂。

油性透明化方法透明的样本透明度高，速度快，能适用于多种组织和器官。但是油性方法所使用的试剂大多毒性较强，并且容易淬灭内源性荧光蛋白的信号，不能和细胞膜上亲脂染料相兼容，样本会有明显收缩，组织或器官内部精确三维结构丢失。水性透明化方法虽然可以部分解决荧光蛋白易淬灭的问题，但是也存在透明时间长，透明能力低的缺点。水凝胶透明化方法操作过程复杂，且需要一定的设备。

面对种类如此繁多的透明化方法，我们该如何进行选择呢？

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烟气在线监测系统也就是固定污染源烟气连续排放的污染物浓度连续自动监测设备。其监测数据实时反应生产情况，为生产运行人员操作设备提供依据，也为环保部门提供排放监测信息。同时CEMS数据也是国家排污费税收取以及相关环保处罚的一个重要依据，因此CEMS的运行稳定性至关重要。

一、CEMS系统的运行原理

烟气在线监测系统（CEMS）是许多大型工厂正常运行和环保数据监测传输的重要在线监测系统，主要应用在火力发电、供热锅炉、水泥建材和金属冶炼等行业。CEMS主要由烟气成分分析单元，烟尘浓度监测单元，流量监测单元，数据采集、处理及控制单元组成。主要监测参数为SO2、NOx、O2以及烟气流速、温度、压力、湿度、粉尘浓度等。

其运行原理是通过加热抽取法（抽取冷凝法）将烟道中气体取出并输送到预处理单元，预处理单元将烟道中的气体经预处理后送入分析仪表。通过在线气体分析仪表（烟气分析仪）对烟气中多种污染物进行连续监测，将测量数据显示在仪表上，通过数采仪或VPN将监测数据实时传到环保监控网络。

二、CEMS维护过程中的注意事项

为保证CEMS测量数据准确可靠，每天检查CEMS各设备的工作情况，查看历史数据和数据报表，及时发现和排除设备存在的异常，提高系统的可靠性。需要做好以下日常维护保养工作：

1加热装置和制冷装置

加热装置和制冷装置是保护烟气分析仪的重要设备，是日常检查和维护的ZD关注对象。加热装置温度一般控制在130℃左右，在没有加热的情况下，烟气中水分进入分析仪，造成滤芯堵塞，分析仪损坏等，同时管路中形成酸雾，直接影响测量结果；制冷装置温度一般控制在4℃左右，如果冷凝器温度只能达到6℃及以上时需要进行维修或者更换。

2蠕动泵检查

蠕动泵用于排出制冷器冷凝筒内的水和密封取样气路。如果蠕动泵长时间不工作，冷凝水会进入采样泵和分析仪，造成设备损坏。

3反吹系统检查

反吹系统检查时，检查反吹气源压力是否在正常范围内。手动反吹时，将系统切至维护状态进行反吹。自动反吹是在PLC控制系统中设置好反吹时间并将测量数据进行保持，不会因反吹而发生控制系统调节异常或者设备损坏。

4烟气分析仪的定期标定

烟气分析仪需要定期进行零点和量程标定。CEMS监测站房都配有每种被测介质因子的高中低三种浓度的标准气体和高纯氮，标定完毕通入另一浓度的标准气进行比对。标定周期为每半年至少一次。自动零点校准根据现场设备实际情况设置为8-12个小时自动进行一次零点标定，避免出现零点漂移，保证分析测量的准确性。

5参数量程的一致性

在分析仪和标准气体的选择方面要注意，分析仪量程要根据烟气中所测介质因子的设计浓度来选择，量程不应超过污染源排放允许限值的两到三倍，保证烟气分析仪所测量数据的准确度；标准气体的选择要根据分析仪的量程和所测介质因子通常浓度来选择，不宜过高或者过低（量程的百分之八十到一百以内）。上位机、PLC及数据采集仪的量程设置应保持一致。

在荧光定量PCR检测实验中可以采用多种方法来进行基因的定量。定量的方法也取决于实验的目标。当实验者对待测样品中的核酸的具体拷贝数比较感兴趣时，可以选择JD定量。如果实验者关注的是实验样本与对照样本之间的倍数变化，无需精确测定拷贝数，则选择相对定量。目前相对定量方法适用于大多数基因表达研究，可分析对照样本和一个或多个实验样本中目的基因表达水平的上调或下调。

在此我们将详细介绍目前使用广泛且适用于基因表达研究的相对定量方法：2^-ΔΔCq法。首先相对定量也需要仔细规划，实验生成的数据是相对丰度，而非确切的基因拷贝数。

相对定量方法--2^-ΔΔCq

2^-ΔΔCq法是一种非常普遍的技术，它比较了包括对照样本 (如未处理或野生型样本) 和内参基因 (如看家基因表达) 在内的实验样本的结果。采用该方法，可根据检测样本和对照样本中内参基因的Cq来调整相同样本中的目的基因的Cq。ZH得出的ΔΔCq值可用于测定目的基因表达量的倍数差异。具体计算方法如下：

该方法要求内参基因和目的基因具有相一致的扩增效率，并尽可能接近100% 。确定扩增效率的方法是采用同样的样本进行梯度稀释，生成内参基因和目的基因的标准曲线（下图）。确定内参基因和目的基因的扩增效率是否在90-110%的范围内，且相互间效率偏差在5%以内。

内参基因的必要性

内参即是内部参照，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物。其作用是校正上样量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样定量的结果才更为可信。一般要选择一个在处理因素作用的条件下不会发生表达改变的基因作内参。理想的内参基因应该满足以下条件：

① 不存在假基因(Pseudogene)，以避免基因DNA的扩增；

② 高度或中度表达，排除低表达；

③ 稳定表达于不同类型的细胞和组织(如正常细胞和癌细胞)，而且其表达量是近似的，无显著性差别；

④ 表达水平与细胞周期及是否活化无关；

⑤ 其稳定的表达水平与目标基因相似；

⑥ 不受任何内源性或外源性因素的影响，如不受任何实验处理措施的影响。

内参基因的评估，可通过geNorm、BestKeeper、NormFinder、RefGenes 等工具来评估，这是保证结果可靠准确的前提。其次可对候选的内参基因进行qPCR 实验做进一步的筛选。在不同样本中均稳定表达的内参基因，即比较各样品中Cq平均值以及Cq值的标准偏差，选择SD最小的基因作为实验内参。

Azure CieloTM实时荧光定量PCR系统——相对定量示例

1、实验方法

方法:从组织中提取RNA，逆转录成cDNA，以SYBR Green法进行荧光定量检测。

试剂:PerfeCTa qPCR ToughMix UNG(QuantaBio)

实验步骤:提取RNA→cDNA合成→设计特异性引物→qPCR扩增→结果分析。

2、结果计算

Step1:ΔCq值=目的基因Cq–内参基因Cq

Step2:ΔΔCq值=处理样品ΔCq–对照样品ΔCq

Step3:ZH计算出倍数关系: 2^-ΔΔCq值

3、相对表达量结果：

Azure Cielo™实时荧光定量PCR

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