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抑郁动物模型的造模方法找不对？

实验动物不会选择？

不知道有哪些常用的行为学检测方法？

「全线赋能“沃”的实验」之实验方法实战教程

直播第二期将为大家带来

《抑郁动物模型研究方法》

两位老师为大家详细讲解

造模方法、实验动物选择、行为学检测方法

涵盖常用模型和高频技巧，更有互动答疑

快速帮你摸清抑郁动物模型的构建

直播时间

4月26日（周二）19：00

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直播全程免费，群内专业答疑

上期不少小伙伴在直播间

提出互动问题，这次我们全部讲解

一、实验操作类

1.注射针进入目标脑区后，可以直接进行注射吗？

“确定针头到达目标脑区后，建议停针1min，平衡气压，然后就可以开启注射程序了。”

2.颅钉植入的位置如何选择？

“颅钉的植入位置应该尽量避免血管集中的区域及注射位点。”

3.颅骨调平的标准要求是？

“前囟和后囟高度差，Bregma左右高度差均在±0.03mm以内，即可认为与颅骨水平。”

4.小鼠脑部病毒注射实验需要挑开硬脑膜吗？

“使用较细的玻璃电极注射的时候需要挑开硬脑膜，因为电极尖端较为脆弱，而硬脑膜具有弹性阻力，可能会把尖端弄断。同样道理，在植入多通道电极的时，也需要挑开硬脑膜，防止电极尖端受损。”

5.脑部病毒注射实验中，进针速度需要控制在？

“进针应保持匀速缓慢，推荐将全自动脑立体定位仪的速度设置在0.2-0.5mm/s。”

6.使用脑立体定位仪固定小鼠，耳杆固定位置是？

“一侧耳杆移至适当位置旋紧固定，用手轻柔拖住老鼠头部，将头部同侧枕骨大孔位置对准耳杆尖端，缓慢推动另一侧耳杆至枕骨大孔处。”

7.如何判断病毒正常注射，没有产生针头堵塞等现象？

“在使用注射针连接玻璃电极进行病毒注射时，可以先用空针吸取足够的矿物油起到密封作用，再吸取一定体积的病毒，矿物油的重力作用可以保证病毒注射更为流畅。另外矿物油与病毒之间因为密度不同会出现明显的液面分界线，我们可以用记号笔标记分界线的位置，就可以很直观观察到注射过程中是否存在针头阻塞现象了。”

二、实验耗材类

1.脑立体定位手术中，如何保护小鼠眼睛不受光源伤害？

“固定小鼠之后，可以在小鼠眼周涂抹红霉素眼膏，起到一定的闭光和防感染作用。”

2.光遗传与光纤记录使用的陶瓷插针有区别吗？

“目前常见的陶瓷插针都是使用的石英材质，自发荧光较低，所以可用于光遗传和光纤记录实验。但是光纤记录实验更推荐使用黑色陶瓷插针，可以更好的避免环境光对于信号的干扰。”

3.固定的颅钉需要使用多大尺寸？什么材质？

“小鼠用M1.0，大鼠用M1.4，M1.2介于两者之间，成年小鼠与幼大鼠可用，一般是不锈钢材质。”

4.颅钉的作用是？

“如同盖房子使用的钢筋一样，和牙科水泥一起可以让植入的陶瓷插针等更加牢固。”

三、实验技巧类

1.左右颅骨调平需要旁开多少距离？

“依据个人习惯而定，一般推荐旁开2mm左右（2-2.5mm均可）。”

2.使用牙科水泥固定，是否还需要缝合头皮组织？

“如果备皮环节直接将注射位点上方的头皮直接剪掉，那么直接通过牙科水泥就可以覆盖头部整体创面，不需要在缝合头皮。如果是剪开头皮进行的注射，或者牙科水泥固定的范围较小，可以将周边的头皮进行缝合。”

3．病毒注射完成后，植入陶瓷插针需要重新进行颅骨调平吗？

“在实验中一般不需要二次调平，使用前囟点作为参考0点，那么整体操作过程中就始终保持同一个参考点即可。如果发现更换夹持器或者更换实验器材，导致坐标有较大差别，可能是动物固定不够牢固，需要重新检查固定。”

4.光纤记录实验过程中需要全程避光吗？

“当然不建议强光下进行实验，使用黑色陶瓷插针及黑色陶瓷套管，将动物头部的牙科水泥涂黑即可很好的避免环境光对于实验信号的干扰。同时实验环境前后需要保持一致，避免环境变化导致的数据对比问题。”

5.怎样才能让数据结果更加平滑？

“数据处理过程中可以选择平滑处理功能，同时在数据采集过程中，可以改变相应的参数（如帧率，曝光等）可以让数据呈现的更加好看。”

6.光纤记录中进行光纤漂白的目的是？

“光纤具有一定的自发荧光，这种内部的自发荧光会掩盖一部分微弱的信号。常用光纤根据材质分为普通光纤和低自发荧光光纤，普通光纤进行光纤记录实验前必须进行漂白。”

7.本底信号波动的产生原因？

“实验环境的不稳定（温度，光线等），动物状态都有可能导致本底信号波动。使用黑色陶瓷插针及黑色陶瓷套管，将动物头部的牙科水泥涂黑可以很好的避免环境光对于实验信号的干扰。”

8.神经递质探针信号与钙信号有什么差别？

“常见钙信号会呈现出快速上升和缓慢下降的特征峰形，而递质类信号因为信号周期较长，上升或下降都可能需要较长的时间，所以信号较为平缓。但是不同脑区及种类细胞的钙信号差别较大，具体实验会有不同。（参考下面图片——经典钙信号状态）。”

四、实验仪器类

1.光纤记录数据分析软件需要单独安装吗？

“不需要，R820光纤记录软件包含数据采集功能和数据分析功能，通过一个软件即可实现采集和分析，简化实验步骤，提高实验效率。”

2.夹持玻璃电极的注射仪器是？

“R480玻璃微电极注射泵，可用于细胞、胚胎、颅脑等纳升级显微注射。”

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作为产品售后服务工作的一部分，润扬仪器坚持对新老客户进行定期的实时上门拜访，面对面的直接听取客户对于气相色谱仪、棒状薄层色谱仪、热裂解气相色谱仪、液相色谱仪、VOCs挥发性有机物监测系统及气体检测仪等相关产品使用的感受和建议，并提出改进方案，交流使用心得，已经成为我们润扬仪器公司每年的一项例行工作任务。

另外，本次活动的内容主要是对客户的气相色谱仪、棒状薄层色谱仪、热裂解气相色谱仪、液相色谱仪等产品提供维修、保养、使用、技术升级等方面的常规性的服务；走访中做好走访时间、整机编号、购买日期、用户姓名、单位及联系方式、用户对公司服务和产品质量的评价等内容；搜集用户反馈包括技术改进建议、产品质量、服务改进的问题，为技术改进、生产制造、市场销售、服务改进等方面提供一揽子的前手资料；更主要的是增加了技术服务，使客户充分了解企业在技术、产品方面的优势，提前培育了市场，以老客户口口相传赢得新客户信任和支持。

今后，润扬仪器公司每个季度还会开展一至两次这样的售后回访活动，同时，公司还将不定期开展气相色谱仪及相关仪器设备的ZT培训，覆盖范围涉及主要的石油炼化企业、环境监测、精细化工企业、第三方检测机构、食品安检、电力输变电站及煤炭开采集中片区。

另外，针对近期非洲猪瘟检测，润扬仪器制定一揽子整体优选分析方案，ZD进驻各级畜牧兽医服务ZX或农业农村发展服务ZX，以精诚贴心的售前咨询、售中论证、售后服务，保障饮食食品安全，让国民吃上放心肉。

如欲了解本次回访活动的详细信息或有其他相关要求，请直接联系山东润扬仪器有限公司，我们将根据具体事项为你针对性提供产品的技术支持与周到服务。

饮食正是影响肠道微生物群组成的主要因素之一，因此饮食如何通过微生物群来影响大脑健康和精神疾病，也受到了很多研究的关注。

日前，西班牙赫罗纳生物医学研究所（IDIBGI）的一支研究团队，在人类以及果蝇、小鼠等多个物种中证明，抑郁的严重程度与血液中一种常见氨基酸——脯氨酸（proline）含量升高显著相关，而血液中的脯氨酸水平则取决于饮食以及肠道微生物的组成与代谢活性。

研究结果发表在《细胞》旗下子刊Cell Metabolism上。伦敦国王学院（King’s College London）的代谢专家Sandrine Claus教授评论说：“据我所知，这是***次有研究团队真正证明，脯氨酸摄入量与抑郁行为之间存在因果关系。”

研究人员从一份调查食物摄入频率的问卷中注意到了脯氨酸。这份问卷调查包含人们日常摄入的80项食物，涉及各种膳食营养素。研究人员将数十名参与者的问卷调查结果与他们的抑郁症评估得分进行了比较。结果显示，各项膳食营养素中，脯氨酸与抑郁特征的关联***为明显。

在对参与者进行血液检测后，结果同样显示，血液循环中的脯氨酸含量与抑郁严重程度显著相关。那些膳食脯氨酸摄入量高且血液脯氨酸高于中位数的受试者，抑郁评分***高。

“我们发现，不仅是在重性抑郁中，在中性抑郁患者中也可以看到脯氨酸循环含量升高的现象。”研究人员强调。

然而，研究人员敏锐地注意到数据中有些不一致的地方。简单来说，通过饮食摄入脯氨酸同样多的人，血浆的脯氨酸水平并没有全都升高。

在对这些参与者的血液和粪便样本进行多组学分析后，研究人员找到了解释：血浆脯氨酸水平与特定几种肠道细菌（例如某些乳酸杆菌属的细菌）的存在及其活性有关。摄入的脯氨酸量相同，但血液循环中的脯氨酸含量有差异的个体，肠道菌群的组成不同，而其中脯氨酸较高的人，肠道菌群的组成特征与较严重的抑郁症密切相关。

▲该研究示意图

脯氨酸与抑郁症之间的联系在后续的动物实验中得到了进一步验证。研究人员给一些小鼠的饮食中额外添加了脯氨酸补充剂，一段时间后，这些小鼠的脯氨酸循环含量高于普通饮食的小鼠，而它们在承受压力时，也会比对照组小鼠表现出更多的类似抑郁的行为，例如不再对好喝的糖水感兴趣。

小鼠实验还显示了肠道菌群在其中起到的重要作用。研究人员从20名人类志愿者中获取了粪便样本，通过粪便移植将其中的肠道菌群植入无菌小鼠体内。这些志愿者中，有一部分人的血浆脯氨酸水平很高，抑郁程度也相对严重。结果他们的肠道菌群进入小鼠肠道后，小鼠的行为也跟着有了变化。研究人员发现，来自抑郁评分***高的受试者的肠道菌群，诱导小鼠出现了更明显的抑郁情绪特征。

不仅如此，研究人员还通过RNA测序发现，粪便移植后的小鼠，大脑中一些基因表达发生了变化。这些小鼠的前额叶皮层（这个脑区与认知有关）中，与抑郁行为相关的基因表达增加，以及一个关键基因——编码脯氨酸转运蛋白的基因slc6a20a表达增加。而这个脯氨酸转运蛋白的表达量高低，在果蝇实验中得到证明，会影响动物是否更容易出现抑郁行为。

尽管无法在人类身上进行类似的实验，但综合这些动物实验的结果来看，特殊的肠道菌群通过脯氨酸代谢影响了大脑在发展抑郁症状方面的功能。

研究人员指出，后续他们将进一步在人群中验证脯氨酸含量不同的饮食对抑郁症状与表现的影响，研究结果有望通过针对肠道菌群和膳食脯氨酸为有效抑郁症打开新的窗口。

生物磁珠对细胞筛选的方法已日渐成熟，原理是将包被一抗的磁珠与细胞表面对应的分子特异性结合，或者将包被二抗的磁珠与已经与细胞表面分子特异性结合的一抗结合。磁珠携带与之结合的细胞吸附与分离柱或试管上，实现阳性细胞或阴性细胞的分离。洛阳吉恩特生物自主研发生产了各类生物磁珠，可以实现稳定的实验结果。