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DNA实验室有哪些常用的DNA提取方法?

北京乐康世纪医疗科技有限公司 2019-08-14 16:05:21 674  浏览
  • DNA实验室有哪些常用的DNA提取方法?

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  • 苏州优赫普科技有限公司 2019-08-14 16:09:34
    <p><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_7">答:一)CTAB法</span><br style="content: &quot;&quot;; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 20px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: &quot;PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="color: rgb(51, 51, 51);">CTAB是一种去污剂,可溶解细胞膜,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中(0.7 mol/L NaCl)是可溶的,当降低溶液盐浓度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)时,从溶液中沉淀,通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白质、多糖类物质分开,然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液,再加入乙醇使核酸沉淀,CTAB能溶解于乙醇。</span><br/><br style="content: &quot;&quot;; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 20px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: &quot;PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_7">(二)SDS法</span><br style="content: &quot;&quot;; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 20px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: &quot;PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="position:relative;line-height:2em;font-size:16px;font-family:Microsoft YaHei;color: rgb(51, 51, 51);PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; background-color: rgb(255, 255, 255);" data-x-flag="16_7">利用高浓度的SDS,在较高温度(55—65℃)条件下裂解细胞,使染色体离析,蛋白质变性,释放出核酸,然后采用提高盐浓度及降低温度的做法使蛋白质及多糖杂质沉淀(Z常用的是加入5M的KAc于冰上保温,在低温条件下KAc与蛋白质及多糖结合成不溶物),离心除去沉淀后,上清液中的DNA用酚/氯仿抽提,反复抽提后用乙醇沉淀水相中的DNA。</span><br style="content: &quot;&quot;; display: block; width: 705px; height: 0px; margin: 20px 0px; color: rgb(51, 51, 51); font-family: &quot;PingFang SC&quot;, &quot;Lantinghei SC&quot;, &quot;Microsoft YaHei&quot;, arial, 宋体, sans-serif, tahoma; white-space: normal; background-color: rgb(255, 255, 255);"/><span style="color: rgb(51, 51, 51);">以下是在提取热带水果DNA时设计的两种不同方法步骤,对比起来CTAB法好,在禾本科植物效果差不多!</span></p>

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实验室冻存管常用材质有哪些?

  实验室冻存管常用材质有哪些?

  冻存管又叫离心管,也叫螺帽管,是实验室里常见的一种实验室耗材,已经成为所有实验室、工业和研究领域及日常工作的一个不可缺少的部分。

  冻存管主要是配合离心机使用,在实验室常用的材质有塑料和玻璃。玻璃材质的BUNSEN本生冻存管不能用在高速或者超速离心机上,因此塑料材质的冻存管用的比较多,下面向大家简单介绍冻存管的各种材质。

  PP(聚丙烯):半透明,化学及温度稳定性较好,但是在低温下会变脆,所以在离心时不要在4℃以下。

  PA (聚丙烯和聚乙烯的聚合物):半透明,化学性质最稳定,但高温易变软。

  PC (聚碳酸酯):透明度较好,硬度大,可以高温消毒,但不耐强酸强碱以及一些有机溶剂如酒精之类。主要用于5万转以上的超高速离心。

  PCR:超透明,与PC相似,但比PC更硬。

  PE(聚乙烯):不透明,和丙酮、醋酸、盐酸等不反应,较为稳定,高温下容易变软。

  PS(聚苯乙烯):透明,硬度大,对大多数的水溶液稳定,但是会被多种有机物腐蚀,多用于低速离心,而且一般是使用。

  PF(聚氟):半透明,可以低温使用,如果是-100℃-140℃下的实验环境,就可以用这种材质的离心管。

  CAB(醋酸丁酯纤维素):透明,可用于较稀的酸、碱、盐以及酒精、蔗糖的梯度测定。

  实验室冻存管常用材质有哪些?BUNSEN本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。

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实验室常用的气源装置有哪些?

实验室常用的气源装置包括两类:钢瓶气和气体发生器。

1 钢瓶气

一般而言,如果钢瓶气供货商资质完备的话,钢瓶气的质量稳定性可以得到有效的保证;同时维护更换等方面相对来说比较省事;同时如果用量不大的话,使用钢瓶气可以节省投入。但是出于安全考虑,很多单位会建设专门的气瓶室和布置专门的气路管道,这在初期或许是一笔不小的开销。

需要注意的是,钢瓶气并不意味者纯度高——如果需要高纯度的气体,以氮气/氢气为例,需要购买高纯氮气/氢气,并指明纯度为99.999%。

另外,使用钢瓶气时,需要配备合乎使用规范的减压器。

2 气体发生器

出于安全考虑,不少的实验室目前使用气体发生器进行供气。使用气体发生器的优点——安全——显而易见,同时,气体发生器可以放在仪器旁边,避免了布置气路管道等问题。

但是使用气体发生器也有不少的问题需要克服:比如使用高纯氮气发生器,并不能如钢瓶气那样随时使用,从打开到合格供气需要一定的时间;需要定期的保养,更换水分和烃类的捕集装置;如果仪器较多,单台的发生器可能不能满足所有的需求,需要增加投入。

目前市面上具有氮气发生器、氢气发生器和空气源,以及可以同时提供氮氢空三种气体的一体机。

氮气发生器根据原理可分为有电化学、变压吸附和膜分离三种,其中变压吸附原理可以达到(可以达到而非一定是)99.995%以上的纯度。

氢气发生器根据原理可分为碱性电解制氢和固体聚合物电解质水电解制氢(SPE或者PEM),两者的简单区别是前者需要碱性电解液,后者只需要去离子水。纯度上来讲,两者均可达到99.99%以上。

空气源根本上来说就是空气压缩机,具有多种类型。在实验室内使用的一般来说是往复式和涡旋式,需要注意的是,气相色谱使用的空气源应当是无油的——气相色谱对使用的空气的要求shi:不得含有影响仪器正常工作的灰尘、烃类、水分及腐蚀性物质。

实验室如果需要更高纯度的空气,可以在空气源后面加装除烃装置,或者直接采购一体式的零级空气发生器——可以有效除去空气中的碳氢化合物,使之达到更低的浓度。


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