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　　牛血清实验中常见的问题解析!

　　胎牛血清通常在细胞培养中作为基础生长培养基的添加剂，在细胞培养中，血清供应了丰富的高分子蛋白，低分子量营养物，疏水载体蛋白和其他体外细胞生长必要的成分如激素和粘附因子。同时，胎牛血清可以增加培养基的缓冲能力或中和有毒成分，起到保护细胞的作用。在细胞培养过程中是否选择添加血清，主要根据基础培养基化学成分，培养细胞的类型和培养体系而定。今天天津本生小编给大家分享的是牛血清实验中常见的问题解析!搬起小板凳快来围观吧!

　　血清实验中常见的问题解析：

　　一、 如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?

　　将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。

　　长时间储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此，推荐在-20℃以下储存血清，并避免反复冻融。

　　建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时，请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

　　二、血清中包含絮状沉淀，它们是什么，怎么处理?

　　沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性，不会影响产品性质。要除去沉淀，离心血清(400g，1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部，将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以，使用产品时要摇动并加热血清至37℃，沉淀会自然消失。

　　三、 培养基中添加了血清和抗生素后，可长期保存吗?

　　一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

　　四、 为什么要热灭活血清?

　　加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学 研究，培养ES细胞、平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。

　　五、 有必要做热灭活吗?

　　实验显示，经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。

　　而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显着的增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点"，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物 的分裂扩增。

　　非必须，可以不需要做热处理这一步。不但节省时间，更确保血清的质量!

　　六、细胞培养 中出现黑点是污染吗?如何处理?

　　一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。

　　七、小牛血清和胎牛血清有何区别与注意事项?

　　来源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。

　　组份与比例不同：两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同，用途与用法不同：某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可，使用浓度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。

　　血清保存和使用须注意：血清应保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超过一个月。

　　解冻血清时 ，应先将血清至于2-8℃冰箱，并经常摇匀使之溶解，然后至室温放置使之升温，绝对不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中，如放在37℃解冻，颜色加深，粘稠度也会增加，血清在解冻和热灭活后，应按用量分装并于-20℃保存，避免反复冻融。

　　牛血清实验中常见的问题解析!我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　关键词：血清 胎牛血清 牛血清 本生生物

　　1. 保存血清的方法?

　　建议血清应保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

　　2. 如何解冻血清才不会使产品质量受损?

　　建议您将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。

　　3. 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理?

　　血清中沉淀物的出现有许多种原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。

　　4. 为什么要热灭活血清?

　　加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究，培养ES细胞，昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。

　　5. 有必要做热灭活吗?

　　实验显示，经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。

　　6. 为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?

　　胎牛血清没有预老化，储存在2–8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在–20℃储存胎牛血清，避免反复冻融。

　　7. 如何避免沉淀物的产生?

　　解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

　　注：仅供参考，转载请注明!

　　胎牛血清的保存注意事项!

　　胎牛血清(南美血源)的保存应该注意以下几点：

　　(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃  低温冰箱中，4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月，由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱,必须预留定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

　　(2)热灭活是指56℃,   30分钟加热已完全解冻的血清，加热过程中须规则摇晃均匀，此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活，除非必须,般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量，补体参与反应有:细胞毒作用,  平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

　　(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃   低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天，然后移入室温,待全部溶解后再分装，在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均,减少沉淀的发生，切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

　　(4)般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤，如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内起过滤,切勿直接过滤血清。

　　(5)血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量，可用离心3000rpm,   5分钟去除,也可不用处理，   显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多，有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染，般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,geng换另批号的血清。

　　(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。

　　胎牛血清的保存注意事项!先和大家介绍到这，如果想要了解更多血清的信息，可以关注天津本生生物，业给生物医药客户提供生物实验室检测耗材及试剂，欢迎广大客户来询。

　　本生简述：马血清与牛血清有什么区别

　　血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。

　　胎牛血清、透析型胎牛血清 、天然低IGG胎牛血清 、干细胞培养胎牛血清 、特殊用途胎牛血清 、活性炭/葡萄糖处理胎牛血清 、胎牛血清替代物 、小牛血清  、新生牛血清 、加强型小牛血清 、补铁小牛血清 、成牛血清 、供体马血清 、兔血清 、鸡血清 、猪血清 、马血清 、其他动物血清 、合成血清替代品。   那么,马血清与牛血清在细胞培养方面有什么区别呢?

　　细胞在单纯的培养基中不能存活，在特殊类型的细胞培养中必须提供某些营养物质和生长因子才能是细胞得以生长并维持生长状态。基础培养基常常要添加血清，血清终浓度多为5-20%。特殊用途的血清来源需用经验确定。

　　广泛应用的血清种类有马血清与牛血清，胎牛血清中富含有丝分裂因子，常选其做增殖细胞用的血清，也用于细胞系和原代培养。而马血清常常用来做有丝分裂后的神经元培养。然而，很多人也将胎牛血清用于神经元培养，也有人用马血清来培养胶质细胞。

　　细胞培养中血清的作用

　　提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物.

　　2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力.

　　3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到jiedu作用.

　　4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源.

　　5.起酸碱度缓冲液作用.

　　6.提供蛋白酶yizhi剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害.

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　　本生简述：马血清与牛血清有什么区别

　　血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。

　　胎牛血清、透析型胎牛血清 、天然低IGG胎牛血清 、干细胞培养胎牛血清 、特殊用途胎牛血清 、活性炭/葡萄糖处理胎牛血清 、胎牛血清替代物 、小牛血清  、新生牛血清 、加强型小牛血清 、补铁小牛血清 、成牛血清 、供体马血清 、兔血清 、鸡血清 、猪血清 、马血清 、其他动物血清 、合成血清替代品。   那么,马血清与牛血清在细胞培养方面有什么区别呢?

　　细胞在单纯的培养基中不能存活，在特殊类型的细胞培养中必须提供某些营养物质和生长因子才能是细胞得以生长并维持生长状态。基础培养基常常要添加血清，血清终浓度多为5-20%。特殊用途的血清来源需用经验确定。

　　广泛应用的血清种类有马血清与牛血清，胎牛血清中富含有丝分裂因子，常选其做增殖细胞用的血清，也用于细胞系和原代培养。而马血清常常用来做有丝分裂后的神经元培养。然而，很多人也将胎牛血清用于神经元培养，也有人用马血清来培养胶质细胞。

　　细胞培养中血清的作用

　　提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物.

　　2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力.

　　3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到作用.

　　4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源.

　　5.起酸碱度缓冲液作用.

　　6.提供蛋白酶yiz剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害.

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　　本生阐述：牛血清白蛋白的应用

　　牛血清白蛋白(BSA)在生化实验中有广泛的应用, 例如在WB实验中加入BSA, 通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，减轻不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性的。具体的WB实验操作和BSA在实验中的应用分享如下

　　方法/步骤

　　测定蛋白浓度

　　按50：1配置BCA工作液。10ulC液(蛋白标准)+90ulPBS液稀释成0.5mg/ml的蛋白标准液。再分别以0、1、2、4、8、12、16、20ul将蛋白标准液加入96孔板的第1~8标准孔中，在其他样品孔中加入10ul待测样品。分别加PBS定容至20ul。各孔中加入200ulBCA工作液，室温放置2小时。用酶标仪测定蛋白浓度：测定A562，依标准曲线算出蛋白浓度。

　　SDS-PAGE电泳

　　1 制 胶: 按比例配制分离胶，缓缓地摇动溶液，使激活剂混合均匀，将凝胶溶液平缓地注入两层玻璃极中，再在液面上小心注入一层水，以阻止氧气进入凝胶溶液中，静置40min。同前按比例配制浓缩胶，但混匀溶液时不要过于剧烈以免引入过多地氧气。吸去不连续系统中下层分离胶上的水分，连续平稳的注入凝胶溶液，然后小心插入梳子并注意不得在齿尖留有气泡，静制60min以上以保证完全聚合。

　　2 预电泳： 将聚合好的凝胶安置于电泳槽中，小心拔去梳子，加入电泳缓冲液后低电压10-20V的预电泳20-30min。(目的是清除凝胶内的杂质， 疏通凝胶孔径以保证电泳过程中电泳的畅通)。

　　3 样品准备：首先计算上样体积，然后按样品：上样buffer=4：1的比例加入上样bufer混匀，沸水煮10分钟，冰上5分钟。

　　4 加 样： 预电泳后依次加入标准品(Marker)和待分析样品。(加样时间要尽量短，以免样品扩散，可在未加样的孔中加入等量的样品缓冲液避免边缘效应。每个泳道加5ul 。

　　5 电 泳： 加样完毕，选择80V恒压进行电泳，电泳直至溴酚蓝染料前沿到达两胶交界处(一般约20分钟)，更换至100V恒压电泳，电泳直至溴酚蓝染料前沿下至凝胶末端处，即停止电泳(一般约为1小时20分钟)。

　　膜的封闭

　　用TBST液洗涤印迹膜10分钟x2次。放入5%BSA(abs49001012)封闭液内，摇床震动，70转/分钟，室温封闭1小时30分钟。

　　蛋白质的样品制备

　　取心肌组织50mg，待组织块自行溶解，用滤纸吸去其表面水分，将组织块放入玻璃匀浆器球状部位，用组织剪尽量将其剪碎，将剪碎的心肌组织放入玻璃匀浆器的杆状部，按1mlRIPA+10ulPMSF/100mg心肌组织的比例加入RIPA和PMSF(先加RIPA再加PMSF)，将玻璃匀浆器插入冰中，匀浆约30分钟。

　　将心肌组织匀浆转移到离心管中，4℃12000g离心5分钟，收集上清(如有粘稠物进一步用超声处理)，样品分装冻存于-20℃备用。

　　本生阐述：牛血清白蛋白的应用，先和大家介绍到这，如果想要了解更多血清白蛋白的信息，可以关注天津本生生物，专业给生物医药客户提供生物实验室检测试剂及耗材，欢迎广大客户来询。

　　本生简述：胎牛血清注意事项

　　1、提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

　　2、提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

　　3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到jiedu作用。

　　4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

　　5、起酸碱度缓冲液作用。

　　6、提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

　　胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少;牛血清是细胞培养中用量的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。

　　本生简述：胎牛血清注意事项?我司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成，于为生命科学研究域提供产品，为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求，也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

在生命科学领域中，包涵体复体的研究占据了重要的地位。但随着研究的深入，一些问题逐渐浮现。本文将对包涵体复体研究中常见的挑战进行解析，以及为研究者提供一些解决思路。

①包涵体复性原则：

低浓度，平缓梯度，低温。

②怎样洗涤包涵体？

通常的洗涤方法一般是洗不干净的，可以先把包涵体用6M盐酸胍溶解充分，过滤除去未溶解的物质，注意留样跑电泳，然后用水稀释到4M,离心把沉淀和上清分别跑电泳，如此类推可以一直稀释到合适的浓度，可以找到一个合适去除杂质的办法，其实这就是梯度沉淀的方法，比通常的直接洗脱效果好。

③对于尿素和盐酸胍该怎么选择

尿素和盐酸胍属中强度变性剂，易经透析和超滤除去。它们对包涵体氢键有较强的可逆性变性作用，所需浓度尿素8-10M，盐酸胍6-8M。尿素溶解包涵体较盐酸胍慢而弱，溶解度为70-90%，尿素在作用时间较长或温度较高时会裂解形成氰酸盐，对重组蛋白质的氨基进行共价修饰，但用尿素溶解具有不电离，呈中性，成本低，蛋白质复性后除去不会造成大量蛋白质沉淀以及溶解的包涵体可选用多种色谱法纯化等优点，故目前已被广泛采用。

盐酸胍溶解能力达95%以上，且溶解作用快而不造成重组蛋白质的共价修饰。但它也有成本高、在酸性条件下易产生沉淀、复性后除去可能造成大量蛋白质沉淀和对蛋白质离子交换色谱有干扰等缺点。

④8M尿素溶解的包涵体溶液应如何保存?

在4度放置半个月，都没什么问题 。在室温放置超过48小时，可能会对目的蛋白有影响，因为尿素在碱性条件下可使一些氨基酸酰基化，所以早些处理BI溶液比较好。

⑤复性时的蛋白浓度

一般使用浓度为0.1-1.0mg/ml，太高的浓度容易形成聚体沉淀，太低的浓度不经济，而且很多蛋白在低浓度时不稳定，很容易变性。

⑥蛋白复性后浓度低

蛋白可能是在复性的过程中发生降解了。

可以将复性好的蛋白浓缩一下泡胶看看。复性过程一般都是低浓度蛋白，需要保证分子间有足够的折叠空间。一些未正确折叠的蛋白就存在于沉淀中，可能沉淀看不出来，复性后的蛋白高速离心看看。

⑦复性中蛋白析出是怎么回事？该怎么处理？

出现蛋白析出，肯定是条件变化太剧烈了。

复性应该采取复性液浓度和PH值逐渐变化的方法，例如根据包涵体的溶液成分，每隔1个PH或浓度值配置一种溶液，逐步透析到正常。此外透析时必须浓度极低，条件温和，使蛋白质能够正确折叠。但是复性的比率应该很低。

若加变性剂尿素可加到2M，盐酸胍可加到1-1.5M；

另外可将甘油浓度增加，范围可在≤30%，且在复性样品中也可加适量甘油。

⑧复性效果的检测

根据具体的蛋白性质和需要，可以从生化、免疫、物理性质等方面对蛋白质的复性效率进行检测。

凝胶电泳：一般可以用非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳可以检测变性和天然状态的蛋白质，或用非还原的聚丙烯酰胺电泳检测有二硫键的蛋白复性后二硫键的配对情况。

光谱学方法：可以用紫外差光谱、荧光光谱、圆二色性光谱（CD）等，利用两种状态下的光谱学特征进行复性情况的检测，但一般只用于复性研究中的过程检测。

色谱方法：如IEX、RP-HPLC、CE等，由于两种状态的蛋白色谱行为不同。

生物学活性及比活测定：一般用细胞方法或生化方法进行测定，较好的反映了复性蛋白的活性，值得注意的是，不同的测活方法测得的结果不同，而且常常不能完全反映体内活性。

黏度和浊度测定：复性后的蛋白溶解度增加，变性状态时由于疏水残基暴露，一般水溶性很差，大多形成可见的沉淀析出。

免疫学方法：如ELISA、WESTERN等，特别是对结构决定簇的抗体检验，比较真实的反映了蛋白质的折叠状态。

⑨变性的融合蛋白可以制备多抗或者单抗吗？

变性蛋白只是天然蛋白伸直的产物，用来免疫动物具有更强的抗原性。只是天然蛋白中被包在内部的抗原决定簇也会暴露出来，如果用该变性抗原制备的抗体来检测变性抗原是可以的，如果用来检测天然蛋白，可能会有假阳性。做单抗也可以，同样道理，筛选出的单抗可能对抗的抗原决定簇处于天然抗原的内部，是否能用还要看将来该单抗用来干什么。

⑩纯化后的可溶性融合蛋白可以直接用于制备多抗吗？

免疫动物要求抗原体种尽量小。在这种小体积的情况下，缓冲液里的小分子成分只要没毒影响就不大，可以不用考虑。

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　牛血清知识的普及，您知道多少!

　　牛血清是一种浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。内含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或生长活性起到生理平衡作用。

　　牛血清根据对不同年龄的牛采血得到的血清也不相同，大体分为4类：

　　1、胎牛血清(Foetal Bovine Serum，简称FBS)：采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血;

　　2、新生牛血清(Newborn Calf Serum，简称NBCS)：采自出生一天~一周内的新生牛;

　　3、小牛血清(Calf Serum)：采自出生10-30天的小牛;

　　4、成年牛血清(Adult Bovine Serum，简称ABS)：采自成年牛收全血后分离得到血清。

　　我国本土国产血清也因地域环境原因不能规模量产和技术差异等问题，目前在细胞培养领域胎牛血清我国以进口血清为主。

　　因携带疯牛病病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛细小病毒、狂犬病毒等传染性风险，在北美血清禁运后，目前国内市场上进口的血清主要来自于南美和澳洲。

　　特别是澳洲，因从来没有发生过疯牛病和口蹄疫，在畜牧业被认为是纯净的大陆，成为了优质牛血清的血源。　　

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TCB/Gibco/Hyclone胎牛血清 500ml本生(天津)健康科技有限公司供应：血清，光度计，检测仪，移液器吸嘴，离心管，冻存管，培养皿，全系荧光定量PCR耗材。

规格包装：100ml/500ml

胎牛血清：

胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。

显然，胎牛血清是质量高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。

血清的主要成分

血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或YZ生长活性是达到生理平衡的。

血清的保存方法：
(1)长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.
(2)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤CJ.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.
(3)血清解冻： 瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.
(4)热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多.

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       胎牛血清是许多做细胞培养相关的实验的科研机构与院校必不可缺的一项试剂。作为天然来源的血液制品，其成分是复杂的，质量是可变的。

       所以，胎牛血清在生产时，应当进行严格的检测并出具检测报告书以确保验证其质量的相对稳定性。

       作为使用者，你真的读懂胎牛血清的检测报告了吗？

外观观测

       采血过程中的粗暴操作往往会导致血清中的血红蛋白含量过高，产生溶血现象，血清的颜色便会偏棕红。

       因此，人眼目测品质优良的血清通常会偏棕黄色或是琥珀黄，澄清透明，轻摇无沉淀（沉淀通常是污染或者是血清中的变性蛋白）。

微生物检测

       细胞培养过程中，对环境的要求十分严格。对于培养所使用的试剂的要求也很高。一般要求无细菌、病毒、支原体等微生物的污染。因为微生物不仅会消耗细胞培养液中的营养成分，大量繁殖时其代谢产物也会改变细胞培养环境的酸碱度、成分和渗透压等，严重时甚至会引起细胞染色体畸变，改变细胞形态等。

       血清在生产的过程中会要求多次精过滤以除去其中可能存在的微生物污染，也需进行严格的检测以确认血清成品中无细菌、真菌、支原体、病毒等的污染。

       据行业标准，细菌和真菌采用的是薄膜过滤法进行验证其存在与否。支原体可用PCR法或是培养法进行检测。依据9CFR的通则要求，病毒检测（牛病毒性腹泻病毒、牛腺病毒、牛细小病毒等）采用的是荧光抗体法进行检测。 

物种鉴定测试（蛋白电泳测试）

       为了确保血清中没有非牛物质的存在，保证产品的完整性，应对牛血清进行种间和种内鉴定实验。

       通常情况下，可使用蛋白凝胶电泳来进行验证。通过电泳，血清蛋白通常分成多达六个部分，即白蛋白、α1、α2、β1、β2 和γ 球蛋白，每一种都有特定的电泳图谱可以进行对照比对。

       其它方法包括辐射状免疫扩散法（Radial Immunodiffusion, RID）与欧氏（Ouchterlony）双扩散法等，可以定性或者定量检测血清中免疫球蛋白G的含量。

血红蛋白（Hemoglobin）含量测试

       血红蛋白是红细胞内运输氧的特殊蛋白质，是使血液呈红色的蛋白，由珠蛋白和血红素组成，其珠蛋白部分是由两对不同的珠蛋白链（α链和β链）组成的四聚体。

       红血球脆弱并容易破裂，会将血红蛋白释放到血清中。粗暴处理所获得的血液，不良的温度控制或延迟处理将提高血清中的血红蛋白含量。快速、小心处理得到的血液，通常血红蛋白的含量较低，其产出的血清品质也更佳。

       一般情况下，先进的心脏穿刺取血技术可降低破碎红细胞的风险，降低血清中血红蛋白的含量。通常，血红蛋白含量使用分光光度法进行测量。

免疫球蛋白检测

       对于胎牛血清而言，由于采血时牛尚未接触外界，其血液中通常不含IgM，IgG的含量也较低。对细胞培养的干扰和损害小。

       免疫球蛋白通常采用单向免疫扩散（Single Radial Immunodiffusion, SRID）法进行检测。

内毒素含量检测

       血清中的内毒素会影响超过三十种以上之生物活性，如：巨噬细胞的活化、促进有丝分裂、诱导干扰素和群落刺激因子等。同时，内毒素也可能会因为启动补体活性而产生细胞毒性。

       因而，内毒素的含量较低的血清通常品质更佳。

       检测内毒素Z常使用的方法为鲎的变形血球萃取物凝集的半定量凝胶法和定量动力显色法。

渗透压检测

       渗透压测试是用来评估血清中所含电解质的浓度。一些化学物质如钠、氯、碳酸氢根、钾、蛋白质和葡萄糖等均会影响血清渗透压。

       血清的渗透压一般使用冰点法测试，每个样品的渗透压以血清中水含量为基准计算，单位以mOsmol/kg水表示。

蛋白质总含量检测

       测量血清中蛋白质总含量可确认动物的年龄及符合产品的规格。不同的细胞培养对蛋白质含量的要求也不同，可接受的含量应该根据Z终使用者的用途来评估。

       一般使用双缩脲法（Biuret）及考马氏亮蓝法（Bradford）对蛋白质的含量进行测定。

细胞生长测试

       血液的成分含量复杂，不同批次之间的差异性也很大，为了检测不同批次血清对特定体外细胞株生长的效力，所以要对每一批次的血清进行细胞培养测试。

       进行细胞培养测试可通过数次的传代培养去监测血清对细胞生长的促进作用，同时也可监测血清对细胞的毒性作用或是对细胞的形态影响。