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血清总蛋白测定 双缩脲比色法的原理 有谁知道?

a404098030 2012-05-12 18:20:26 733  浏览
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参与评论

全部评论(2条)

  • 爵栗 2012-05-13 00:00:00
    蛋白质在碱性溶液中与硫酸铜作用形成紫蓝色络合物的呈色反应。在540nm 波长处有Z大吸收。可用于蛋白质的定性和定量检测。

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  • hdbdmxJicnsnZn 2016-12-02 04:20:11
    大鼠血清总蛋白含量测定(双缩脲比色法) 一.原理 蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成。肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物。测定紫红色络合物的吸光度,能计算总蛋白的含量。 二.目的 1.掌握血清总蛋白含量的测定方法。 2.观察阴虚大鼠模型血清总蛋白含量的变化。 3.观察中药对阴虚大鼠模型血清总蛋白含量的变化。 三.试剂 1.总蛋白试剂 硫酸铜0.12 mmol/L 酒石酸钾钠21.1 mmol/L 氢氧化钠0.75 mmol/L 2.蛋白标准液:血清白蛋白50g/L 四.材料 1.试管(100*16mm)3支 2.移液器(P20ul、P200ul、P1000ul)各1把 3.石英比色皿(1ml)4只 五.测定方法 单位: ul 空白管(b) 标准管(std) 测定管(s) H2O 蛋白标准液(50.0g/L) 样品 总蛋白试剂 10.5 - - 1050 - 10.5 - 1050 - - 10.5 1050 混匀,室温放置30分钟,以空白管校零,测定550nm处的吸光度。 六.计算 总蛋白含量(g/L)=(测定管吸光度/标准管吸光度)×标准液浓度 七.注意事项 1.室温放置30分钟后必须立即测定吸光度,否则吸光度会增加。 2.实验试剂用量较少,所以加量一定要仔细、准确。

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