全部评论(1条)
-
- 美玲小姐wang 2017-09-20 16:34:49
- 蛋白质的存在影响酸碱滴定中所用某些指示剂的颜色变化，从而改变这些染料的光吸收。在些基础上发展了蛋白质染色测定方法。涉及的指示剂有甲基橙、考马斯亮蓝、溴甲酚绿和溴甲酚紫。目前广泛使用的染料是考马斯亮蓝。 考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中为棕红色，当它与蛋白质通过范德华键结合后，变为蓝色，且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律，可在595nm处比色测定。2—5分钟即呈Z大光吸收，至少稳定1小时。在0.01—1.0 mg蛋白质/ml范围内均可。该法操作简便迅速，消耗样品量少，但不同蛋白质之间差异大，且标准曲线线性差。高浓度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、硫酸铵和去污剂时测定有干扰。缓冲液浓度过高时，改变测定液pH值会影响显色。考马斯亮蓝染色能力强，比色杯不洗干净会影响光吸收值，不可用石英怀测定
-
赞(15)
回复(0)
热门问答
- 考马斯亮蓝g-250染色法测定蛋白质含量与其他方法相比有什么优缺点
- 考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白质含量的优缺点?
- 急需答案！先谢过了啊！ 环境生物学方面的实验！
- 考马斯亮蓝法测蛋白质含量 能用酶标仪吗
- 考马斯亮蓝法测蛋白质含量数据怎么处理啊?
- 老师还让提几个关于这个实验的问题..........急急急急急急...........
- 比色皿被考马斯亮蓝染色了怎么办
- 考马思亮蓝染色法测定蛋白质含量的实验中，磷酸盐缓冲
- 为什么用考马斯亮蓝测定蛋白质含量时要用玻璃比色杯
- 蛋白质-染料复合物在595nm吸收Z大。按理说用玻璃比色杯和石英比色杯都可以测吸光度。但是为什么用考马斯亮蓝测蛋白质含量时只能用玻璃杯，不能用石英杯啊？
- 电泳蛋白质 考马斯亮蓝没有脱色完全 能不能照相
- 测定可溶性蛋白用福林酚法还是考马斯亮蓝
- 紫外吸收法与Folin——酚比色法测定蛋白质含量相比，有何优缺点
- akta蛋白纯化280吸收很大，考马斯亮蓝没有
- 考马斯亮兰测定蛋白质的方法步骤
- 请帮忙找一下测定蛋白质的方法，用考马斯亮兰…… 试剂配制，操作步骤
- 考马斯亮蓝测定蛋白质浓度实验，为什么不能用试管刷清洗比色皿
- 紫外吸收法与Folin-酚比色法测定蛋白质含量相比，有何缺点及优点
- 双氧水使蛋白质变性后，加考马斯亮蓝测样品中蛋白含量会不会有影响
- bradford法测定蛋白质含量的优点有哪些
- 点位滴定法确定终点 与指示剂法相比 有什么优缺点？
- 用电位滴定法确定终点与指示剂法相比有什么优缺点
- 为什么凯氏定氮法测定蛋白质的含量称之为粗蛋白含量
- 凯氏定氮法测定豆乳中的蛋白质含量
1 前言
豆乳是黄豆加水、磨成汁后再煮熟的饮料。豆乳饮料营养非常丰富，且易于消化吸收，它是数百种天然植物中Z受营养学家推荐的食物。本文参照《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》标准，对某品牌浓香豆乳进行蛋白质含量的测定。
2 仪器与试剂
2.1 仪器
K1160 全自动凯氏定氮仪，SH420F 石墨消解仪，分析天平。
2.2 试剂
硫酸（分析纯），催化剂片（分析纯无水硫酸钾 3g 和分析纯无水硫酸铜 0.2g），20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠。
3 实验方法
3.1 取样
称取样品 3.0g（精确值 0.1mg）左右，加入消化管。加入混合催化剂 3gK2SO4、0.2gCuSO4，加入 10mL 浓硫酸。
3.3 消解
利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化过程采用曲线升温模式，设定消解参数如表 1：
表 1 消解参数设置
阶段 温度/℃ 保持/min 备注 1 200 20 不加排废罩，挥发水分 2 230 20 3 350 20 4 420 90 3.4测试
将消化管放置于凯氏定氮仪上，定氮仪参数设置如表 2：
表 2 定氮仪参数设置
硼酸 稀释水 碱液 蒸馏量 蛋白系数 蒸汽流量 滴定酸 25mL 30mL 40mL 5min 6.25 0.1169mol/L 4 测试结果
4.1 实验结果
名称 样品重量 g 氮含量% 蛋白质含量% 平均值% RSD% 豆乳
3.1171 0.4887 3.0541 3.0592
0.13
3.0504 0.4901 3.0632 3.1046 0.4899 3.0617 3.1745 0.4892 3.0578 4.2 结论
通过实验数据可以看出，测定该豆乳样品的粗蛋白平均值为 3.0592%。
豆乳样品包装袋上营养成分表中蛋白质标示值为 3.0g/100g，样品测定的蛋白质平均值符合《GB 28050-2011 食品安全国家标准 预包装食品营养标签通则》要求的食品中蛋白质的允许误差范围≧80%标示值。
参考文献
[1] GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定[S]. [2] GB 28050-2011 食品安全国家标准 预包装食品营养标签通则[S].
10月突出贡献榜
推荐主页
最新话题
沪公网安备 31011502008050号
参与评论
登录后参与评论