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- R_Azarias 2016-06-01 00:00:00
- 依据与硅胶膜离心柱相同的原理 ，运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和GX结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性，在Chaotropic盐（盐酸胍、异硫氰酸胍等）和外加磁场的作用下，能从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中的DNA和RNA分离出来，可应用在临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等多种领域。
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- a520131400701 2016-06-18 00:00:00
- 磁珠法核酸提取原理;依据与硅胶膜离心柱相同的原理，运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和GX结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性，在Chaotropic盐（盐酸胍、异硫氰酸胍等）和外加磁场的作用下，能从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中的DNA和RNA分离出来，可应用在临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等多种领域。 磁珠法核酸提取过程磁珠法核酸提取一般可以分为四步：裂解——结合——洗涤——洗脱。
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前言
MIQE是描述评估qPCR实验所需的最小信息，该指南是稿件投稿时需要同时提交的一个清单。通过作者提供相关的实验条件和实验特点，审稿人可以评价实验所用方法的可靠性。另外提供详细的实验所用试剂、序列和分析方法，其他研究人员可以利用这些信息进行重复实验。
对于核酸提取MIQE有明确要求两点——实验组与对照组的定义及每一组的样本数量。
无论采用手工法还是试剂盒，只要符合MIQE的要求并实现良好的可操作性和重现性，就是合理客观的技术方法。MIQE在该部分操作中的要求又分为两大块——样本描述和核酸提取方法。
样本描述
▶ 样本采集和处理的方法描述
▶ 样本的来源描述（宏观解剖还是激光显微切割）
▶ 样本是如何即时处理（保存条件及时间）
▶ 冷冻样本的冷冻方法和时间
核酸提取
采取的提取方法：
1）手工法：小批量经济型
2）自动化仪器：大批量高效型
按获取的物质可分为DNA和RNA：
◆ DNA：适合拷贝数变异、SNP分析等实验
◆ RNA：适合基因表达、长非编码RNA等实验
图源：网络，侵删
按提取方法分为化学法和机械破碎法：
◆ 化学法：适合采用碱裂解法的样本，质粒提取、菌类的提取
◆ 机械破碎法：比较坚硬有一定韧性的物质，动植物组织
更推荐使用合适的商品化的核酸提取试剂盒，流程标准化程度更高，质量更容易得到保证，这样在方法描述时可以更简单一些，直接引用试剂盒的生产厂家、货号和名称即可。
DNA酶或RNA酶的处理细节：
基因表达实验中，RNA模板如果存在DNA污染，会严重干扰最后的结果。因此提取RNA时要加入DNA酶将DNA消化掉，工作浓度、处理温度和时间要加以说明，同时也要加入RNase抑制剂提供保护。使用柱纯化试剂盒提取RNA时也可以在柱上进行DNA消化。同样的，提取DNA时也要将RNA消化掉，尽管残留RNA对DNA为模板的qPCR实验影响小得多。
Cielo™实时荧光定量PCR系统
☑ 数据可靠性：连续1000次实验后，结果高度一致。
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☑ 在线便捷性：主机可独立运行qPCR程序，数据可USB、Wi-Fi等网络传输。
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沪公网安备 31011502008050号
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