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源表测试过程中，除了选择一台可靠的仪器，使用操作方法也会影响测试的准确可靠性，今天安泰测试带大家来围观一下工程师的测试小妙招吧。

I-V测试是二级管测试必不可少的项目。二极管I-V特性分析通常需要高灵敏电流表、电压表、电压源和电流源。

吉时利源表2450是二极管特性分析的理想选择，提供四象限精密电压和电流源/负载，可精确地发起电压或电流以及同时测量电压和/或电流，其电压和电流测量分辨率分别达到10nV和10fA。

消除引线电阻引起的误差

I-V测试时，使用4线连接法，可以消除引线电阻的影响。当引线与二极管连接时，注意Force HI和Sense HI引线与二极管阳极端相连，Force LO和Sense LO引线与二极管阴极端相连。尽可能使连接靠近二极管，以消除引线电阻对测量准确度的影响。特别是在源或测量大电流或低电压时，这一点很重要。

减少电磁干扰的小技巧

如果测量低电平电流(<1μa)，推荐使用后面板的三轴同轴连接器和三轴同轴电缆，不建议使用前面板的香蕉插孔。三轴同轴电缆具有屏蔽功能，能减少电磁干扰效应（电磁干扰效应可能会干扰读数）。

另外，为减少电磁干扰还需要把二极管放置在避光的金属屏蔽箱内。

生成、执行和浏览I-V曲线的步骤

吉时利2450具有直观、多点触控用户界面。通过吉时利2450，只需几个简单的按键步骤，便可生成和浏览I-V曲线，快速完成二极管I-V测试。操作如下：

本文素材由西安安泰整理发布，以上就是吉时利源表的测试使用方法，如果您在使用过程中有什么疑问，我们有专门的技术工程师协助选型。如果您想了解更多吉时利的产品，欢迎咨询安泰测试官网www.agitek.com.cn。

I-V测试是二级管测试必不可少的项目。二极管I-V特性分析通常需要高灵敏电流表、电压表、电压源和电流源。吉时利源表2450是二极管特性分析的理想选择，提供四象限精密电压和电流源/负载，可精确地发起电压或电流以及同时测量电压和/或电流，其电压和电流测量分辨率分别达到10 nV和10 fA。

选择一台可靠的仪器是测试的基础，正确的操作方法也会让测试更加可靠，安泰测试就给大家分享一下使用吉时利源表进行测试的小妙招。

Q1 消除引线电阻引起的误差

I-V测试时，使用4线连接法，可以消除引线电阻的影响。当引线与二极管连接时，注意Force HI和Sense HI引线与二极管阳极端相连，Force LO和Sense LO引线与二极管阴极端相连。尽可能使连接靠近二极管，以消除引线电阻对测量准确度的影响。特别是在源或测量大电流或低电压时，这一点很重要。

Q2 减少电磁干扰的小技巧

如果测量低电平电流(<1μa)，推荐使用后面板的三轴同轴连接器和三轴同轴电缆，不建议使用前面板的香蕉插孔。三轴同轴电缆具有屏蔽功能，能减少电磁干扰效应（电磁干扰效应可能会干扰读数）。

另外，为减少电磁干扰还需要把二极管放置在避光的金属屏蔽箱内。

Q3 生成、执行和浏览I-V曲线的步骤

吉时利源表2450具有直观、多点触控用户界面。通过吉时利源表2450，只需几个简单的按键步骤，便可生成和浏览I-V曲线，快速完成二极管I-V测试。操作如下：

以上就是安泰测试给大家分享的如何利用吉时利源表进行二级管测试，如果大家在使用吉时利源表过程中有什么问题，欢迎咨询安泰测试，我们有专业的技术团队提供免费技术支持服务。

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既然仪器已经备好了，那么该怎样选择检测方法呢？

众所周知，qPCR依托于荧光检测技术，通过使用DNA结合染料、荧光PCR引物或探针等实时监测目的基因的扩增，从而对目的基因进行定量分析。为了避免在实验时出差错，下面就跟着小编一起来看一下常用的经典方法吧~

1、 DNA结合染料—SYBR Green I 法

•  原理：SYBR Green I 是一种DNA结合染料，其与双链DNA结合后，荧光大大增强，DNA与染料结合所释放的荧光量与dsDNA的数量成正比。因此，检测到的荧光信号可反映出PCR体系存在的双链DNA数量。

•  特征：可逆荧光，Z大吸收波长497nm，Z大发射波长520nm。

•  适用情况：非特异性的荧光染料，不能识别特定的双链，只要是双链（包括非特异性扩增产物、引物二聚体等）就会结合发光，在临床上使用可能会有假阳性发生。但该方法容易建立实验体系，可进行熔点分析，通用性好，价格相对较低，在科研中使用比较普遍。

2 、TaqMan 探针法

•  原理：检测时除了需要一对特异性引物外，还需要一条与靶序列互补配对的寡核苷酸链—TaqMan探针，其5’末端包含荧光报告基团R，3’末端为淬灭基团Q。当探针与靶序列互补配对时，荧光基团发射的荧光因与3’端的淬灭基团接近而淬灭。在进行延伸反应时，聚合酶的5’核酸外切酶活性将探针切断，使得荧光基团与淬灭剂分离，发射荧光。荧光信号和产物的量相匹配。

•  特征：检测到的是积累荧光，随着循环数的增加，释放出来的荧光基团不断积累。

•  适用情况：特异性较强，可进行多重qPCR分析，但成本较染料法要高一些，实验构建相对复杂。常用的荧光基团推荐：FAM、VIC、HEX、CY5等。

3 、分子信标(molecular beacon)

•  原理：分子信标方法在检测时除了需要一对引物以外，还需要一条呈发夹结构的寡核苷酸探针（25-40nt），分子信标的 5'端附有荧光报告基团，3'端附有淬灭基团，环被设计成与靶序列互补的15–30核苷酸，其两端各有5-7个核苷酸互补形成茎结构，将报告基团与淬灭基团连接到一起。发夹结构中，由于报告基团接近淬灭基团，监测不到荧光信号，当环的部分与核酸序列互补配对，分子信标打开成链状，使得荧光基团与淬灭剂分开，发射荧光。

•  特征：茎环结构，也是积累荧光。

•  适用情况：高特异性、可以用于多重反应，适合区分等位基因。但不能做熔点分析；发夹的茎结合过强过弱都不合适，过强的话，信标不能与靶标正确杂交，过弱的话，会随机折叠成非发夹结构，导致产生杂信号。常用的荧光基团有FAM 、Texas Red等。

4  、荧光共振能量传递(FRET)

•  原理：FRET探针又称双杂交探针，由两条相邻探针组成。一个探针3'端带有供体基团，第二个探针的5'端带有受体基团，在PCR反应的退火步骤，两条探针头尾相连地分别杂交在靶标序列上，荧光分子接近，从供体到受体产生荧光共振能量传递，受体荧光信号的增加与扩增子出现的量成比例。

•  特征：由于FRET探针是靠近发光，所以检测信号是实时信号，而非积累荧光。

•  适用情况：除引物外需要设计两条探针，通用性不高；需挑选合适的供体及受体基团，供体基团发射波长与受体基团的激发波长需显著重叠，而供体基团发射波长与受体基团的发射波长要明显分离。可做熔点分析，特异性较强。

5 、 LUX Primers

•  原理：LUX (light upon extention) 引物是通过荧光标记的引物，使引物可以实现探针的功能。其原理和分子信标类似，LUX引物也是发夹结构，其中一条引物3’端用荧光报告基团标记。在没有单链模板的情况下，该引物自身配对，形成发夹结构，使荧光淬灭。在模板存在的情况下，引物与模板配对，发夹结构打开，产生荧光信号。

•  特征：积累荧光；不需要额外设计探针。

•  适用情况：不能进行熔点分析，通用性比不上SYBR Green I。但不需要专门设计探针，同时不会受非特异性扩增产物和引物二聚体的影响，特异性较SYBR Green I强。

【以上内容来源于网络整理，侵删】

看完了上面关于经典qPCR检测方法的介绍，您是不是有想去跑一轮qPCR的冲动呢？

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在小伙伴们的千呼万唤中，厦门海关技术中心的徐敦明博士3月31日给大家带来了化学检验方法验证的讲座； 因为这是正在修订中的食品安全国家强制性标准，所以大家的期待都非常高。  

化学检验方法验证

  感谢徐老师的精彩讲解，直播间的小伙伴们热情高涨，一个多小时的讲座很快结束了，但学员们仍回味无穷，纷纷在留言区问什么时候可以看回放；还没有参加直播的小伙伴们也赶快来学习啦，可以让您在方法验证上少走很多弯路。   

厦门海关技术中心研究员

APD雪崩光电二极管是一种高性能光电探测器，它是一种PN结型光电二极管，具有高增益、高灵敏度和快速响应等特点。广泛应用于光电检测、传感、安检等各个领域。

APD雪崩光电二极管的工作原理是基于光电效应和雪崩效应，当光子被吸收时，会产生电子空穴对，空穴向P区移动，电子向N区移动，由于电场的作用，电子与空穴相遇时会产生二次电子，形成雪崩效应，从而使电荷载流子数目增加，电流增大，实现光电转换。

在APD的光电特性中，暗电流是一个重要的参数。暗电流是指在没有光照射的情况下，APD中由于热激发等原因导致的电子漂移和电子-空穴对产生而产生的电流，暗电流测试的准确性对于评估APD的性能和稳定性非常重要。在进行APD暗电流测试时，通常面临如下挑战：

测试环境影响

在进行暗电流测试时，需要确保测试环境中没有光照射，光照会激发APD中的载流子，导致暗电流的增加，从而影响测试结果的准确性。

连接电路影响

暗电流的测试通常需要提供一个反向偏压，纵观目前的电流表和电流计，都不具备提供偏压的功能，因此必须在电流表的回路中加入电压源。但这样会使测试系统变得复杂，引入更多干扰条件，导致暗电流的测试精度无法保证。

目前暗电流测试的最佳工具之一是数字源表（SMU），数字源表可作为独立的恒压源或恒流源、伏特计、安培计和欧姆表，还可用作精密电子负载，其高性能架构还允许将其用作脉冲发生器、  波形发生器和自动电流-电压(I-V)特性分析系统，支持四象限工作。

采用数字源表进行暗电流测试时，需要注意以下事项：

三同轴线缆连接

APD暗电流测试连接线通常会选择使用低噪声、低电阻的导线，三同轴线缆具有良好的导电性能和抗干扰能力，适合用于传输微弱信号，可以减少测试过程中的干扰和误差。

如下图三同轴线缆的半剖图，多层绝缘屏蔽具有良好的抗干扰能力。

 (1导体;2绝缘;3内屏蔽层;4中间层;5外屏蔽层;6外护套)

屏蔽外部电磁信号干扰

测试系统架构图如下图所示，数字源表（SMU）连接到光电二极管上，该光电二极管安放在一个电屏蔽的暗箱中，为了对敏感的电流测量进行屏蔽使其不受外部干扰的影响，通过将屏蔽箱与数字源表（SMU）的低端相连，可以形成一个封闭的金属屏蔽环境，有效地阻止外部电磁干扰信号的进入，保护测试信号的准确性和稳定性。

预留充足的测量时间

在进行暗电流测试时，需要考虑测试时间的长短。通常情况下，这种现象可能是由于APD内部的一些因素导致的，例如载流子的生成和收集过程。随着测试时间的推移，由于暗电流源的累积或者其他因素的影响，暗电流会逐渐增加至一个稳定的数值。

此外，对于测量得到的暗电流数据，需要进行适当的处理和分析，以确保测试结果的准确可靠。下图为普赛斯数字源表（SMU）测试完成后，上位机软件通过数据处理给出的测试结果以及测试曲线。

测试结果

测试曲线

导读

目前国内市场上销售的热启动Taq酶的品牌很多，但真正高质量的热启动Taq酶并不多，面对这么多的热启动Taq酶产品，我们应如何选择？

首先，选择扩增效率高的热启动Taq酶

耐受性好的Taq酶反应体系经优化后，扩增效率在95%以上，即使是在目标基因含量较低时也能够获得满意的扩增，在模板量较高时，也不易中毒，指数扩增期较长。耐受性能较差的Taq酶，即使反应体系经多次优化，扩增效率仍达不到90%，扩增曲线“S”型不明显，斜率较小，曲线低平。模板量较低时扩增不出来，较高时扩增效果也不理想。所以PCR扩增效率与Taq酶的性能密切相关，选择高扩增效率的DNA聚合酶对PCR、qPCR能否成功至关重要。

其次，选择酶动力强的热启动Taq酶

Taq酶的酶动力与扩增效率有关。一般热启动Taq酶的酶动力越强，PCR扩增的指数增长期越长，‘S型’曲线更加典型，荧光信号值更高，而且更适合做多重PCR检测。酶动力弱的品牌DNA聚合酶一般只能支持2重反应，在做3重反应时，扩增曲线低矮，荧光信号值较低，无典型扩增曲线，结果很难判定。

zuihou，选择灵敏度高的热启动Taq酶

一般说，DNA聚合酶的扩增效率高，灵敏度就高，但也有不一致的情况。如果要扩增的样本目标基因丰度较低，建议对Taq酶的扩增灵敏度进行检测。

Taq酶的扩增灵敏度进行检测，常见的检测方法是将目标基因质粒片段进行10倍或5倍梯度稀释，在较低的几个稀释度进行PCR检测，选择检测灵敏度较高的热启动Taq酶。

由此可见，研究者需根据自己的实验要求和经费情况进行选择，做一个梯度稀释扩增实验，以检测热启动Taq酶的扩增效率和灵敏度。

Cielo™实时荧光定量PCR系统

Harness of the power of qPCR

▌12列温度梯度设置：多温度梯度设置，快速优化条件，确定合适退火温度。

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除此之外， Cielo™实时荧光定量PCR系统融合了高品质Peltier温度模块和基于光纤传输的光学检测系统，可为您的科学研究就提供高精准、高灵敏可靠结果。

       作为实验室常用仪器，各种隔膜真空泵大同小异，要选一款符合实际所需的隔膜真空泵，购买前应多做功课。您需要了解这些情况：

     1.隔膜真空泵的性能指标

　　隔膜真空泵的主要指标有两个:极限抽气速率和极限压力(也称Jue对真空度),极限抽气速率的大小可以判定,其所能应用的被抽气装置的容量大小,极限压力决定了隔膜真空泵所能达到的极限Jue对真空度. ( 注:Jue对真空度与表压真空度有对应关系,但Jue对真空度不会因为地理位置的改变,大气压力的改变而发生变化,而表压真空度则充满不确定性.建议使用Jue对真空度压力显示.)　

　　2.耐腐蚀性能

      优秀的隔膜真空泵可应用在大多数实验场景,拥有优秀的耐腐蚀性能.不管是隔膜/阀片/管路等与气体接触部分,都做了特殊处理。

　　3.连续运行性能稳定

       多数的隔膜真空泵在连续运行后,发热严重,没有配置散热装置,同时真空度波动较大。

       郑州博汇精密科技有限公司生产的DP系列隔膜真空泵可长时间运行,性能稳定,具有高度的耐腐蚀性能。

推出的隔膜真空泵DP-630G,压力显示采用数显表,显示隔膜真空泵的jue对真空度和当前大气压值,方便用户做数据记录。

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