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高通量的96孔PCR板和8联管是在聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中,主要作为参与扩增反应的引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核酸、Mg、缓冲液等的承载物。医疗级聚丙烯(PP)材质因其极高的纯净度和稳定性,能更好适应PCR反应过程中反复高低温设定,并且能够实现高温高压灭菌操作,常常被用于PCR耗材的生随着荧光定量PCR技术的普及,该技术被广泛用于遗传、生化、免疫、医药等领域,不仅应用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的研究领域。
如何正确使用96孔PCR孔板
PCR板有透明和乳白色可选,其中乳白色更适合用于顶部采集荧光信号的新型荧光定量PCR仪(如伯乐CFX系列,ABI 7500fast 以上型号, Roche 480系列),但如果荧光定量PCR仪是底部光源的,则应选择透明的。
PCR板根据裙边设计又可分为无裙边、半裙边和全裙边三种设计模式,不同厂家的荧光定量PCR仪会设计不同的切角或边缘凸起,请选择适合该PCR仪的板子。
PCR板又分100ul体积(矮板)和200ul体积(高板),根据机型的不同选择,选择不同高度孔板,避免高度错误对机器造成破坏和加热不均导致数据失真。
当使用96孔板做荧光定量PCR实验的时候,推荐使用光学膜代来密封反应孔。
加样后会在管壁上飞溅一些小液滴,另外反应体系内也会有一些气泡,需要离心去掉挂壁液滴和气泡。请使用专用的微孔板离心机解决上述问题。
PCR板属于一次性消耗品,生产一次成型,不建议剪开使用容易造成实验误差增加,不能清洗或部分重复利用。不要为了节省一点小钱,而给实验带来后续分析上的困扰。
样本量少,用8联管做实验又该注意哪些呢?
8联管也分乳白和透明两种,选择方式和孔板一样,根据PCR仪的荧光信号采集方式决定。
8联管同样也有0.1ml(矮管)和0.2ml(高管),根据PCR仪的加热模块体积确定。
8联管的盖子一般有光学平盖和凸型圆盖之分,光学平盖适用于荧光定量PCR,圆盖适用于普通PCR。
使用单管或8联管做实验,并且样本数量不多的时候,建议在样品加热块(TRAY)上对称地安放样品,是纵向放置,并且优先放在第6列或第7列,然后逐渐向两边放置。这样做的好处是热盖压下来的时候不至于发生倾斜,各个反应管的受力和受热都比较均匀,提高孔与孔之间的数据精密性。也可以在加热模块四角的位置,放置4个单管平衡热盖压力,避免扩增少量样本时出现管子变形的情况。
管盖没有盖好造成PCR反应液热蒸发,影响反应温度的准确控制及反应也各成份的浓度,同时也成为一个污染源。不但会因压盖时由于粗心或者用力不均致使部分盖子变形,而且还会造成样品的交叉污染,所以我们推荐用独立管盖的8联管,每管盖一体,确保样本独立反应,避免交叉污染。
注:以上资料仅供参考!
- 荧光定量PCR试剂
荧光定量PCR试剂本生(天津)健康科技有限公司供应:移液器吸嘴,离心管,冻存管,培养皿全系荧光定量PCR耗材,产品包括:PCR单管、PCR八联管、96孔板、384孔板。
CG编号 产品描述 包装规格 DBI-2073 Bestar® SybrGreen qPCR Master Mix
DBI-2043 Bestar® SybrGreen qPCR Master Mix
DBI-2044 Bestar® SybrGreen qPCR Master Mix
DBI-2074 Bestar® qPCR Master Mix (Taqman Probe)
DBI-2041 Bestar® qPCR Master Mix (Taqman Probe)
DBI-2042 Bestar® qPCR Master Mix (Taqman Probe)
DBI-2141 Storm star qPCR Master Mix (Taqman Probe)
DBI-2142 Stormstar qPCR Master Mix (Taqman Probe)
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DBI-2241 Storm star qPCR Master Mix (Taqman Probe)(UNG)
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DBI-2243 Stormstar SybrGreen qPCR Master Mix (UNG)
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DBI-2220 Bestar® qPCR RT Kit ( gDNA Remover )
DBI-2222 Bestar® qPCR RT Mix ( gDNA Remover)
DBI-2223 Bestar® one step RT qPCR kit ( SybrGreen )
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DBI-2235 High-throughput qPCR Mix (Taqman probe)
DBI-2236 High-throughput qPCR Mix (Taqman probe)包装规格:
25 ml
5 ml
1 ml
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200 Reaction
100 Reaction (50uL)荧光定量PCR试剂
产品优势:本生生物代理实验室R耗材品种全,可替代仪器原厂耗材,性价比高,质量稳定,对用户可以节省实验成本。
适应客户:医院检验科PCR实验室,验室;第三方检测机构,科研院所,大专院校,制药厂,试剂生产厂家,疾控,检验检疫。
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荧光定量PCR管会是影响PCR反应的关键因素吗?
荧光定量PCR管是用于PCR实验的塑料离心管,PCR管的出现,极大地简化了定量检测的过程,而且真正实现了绝对定量。多种检测系统的出现,使实验的选择性更强。自动化操作提高了工作效率,反应快速、重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰。随着生物芯片技术和荧光探针定量技术的结合,荧光定量PCR在医学检测及其他各个领域中的应用前景将更加广阔,使用范围更大。实验证明,影响PCR反应的关键因素中,PCR仪,酶,镁离子,缓冲液,引物退火温度等等,其中PCR耗材的质量和PCR仪器温度准确性与实验结果密切相关,PCR管和PCR板要求具友极薄的管壁和高度均一性。PCR管壁的厚薄会影响传热及传热速度。管体的颜色,均一性,透光度等都会直接影响到PCR,尤其是aPCR(定量PCR)的结果。
荧光定量PCR管选材时优先考虑到产品的传热性,光学透性,耐受性,气密性等特点,用等级的医用级聚丙烯(MDPP)独特配方改良而成,使得产品达到比同类产品更好的导热率,快速的反应和均一的热导性。
荧光定量PCR管材料是用等级的医用级聚丙烯(MDPP)独特配方改良而成,使得产品达到比同类产品更好的导热率,快速的反应和均一的热导性。使用高精密小通量模具生产PCR耗材,确保塑料原料在模具中的散布均一性和同步性。从而使每一个PCR产品具有的相似性和均一度。
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