如何提取和研究血液DNA，RNA与蛋白

屁股桃小仙女 2017-06-16 03:37:14 478 浏览

参与评论

登录后参与评论

全部评论(1条)

a520131400701 2017-06-17 00:00:00

如何选择Z佳的全血DNA、RNA提取方法？从全血中提取DNA和RNA应该说是Z基本的工作了，提取的DNA和RNA质量的好坏直接影响了下游的实验和分析，可供选择的方法非常多，乱花渐欲迷人眼，如何选择Z适合的方法，成了很多人实验开始前Z难以抉择的事情。我们从两个方面，层层剥茧，分析Z佳的实验方法。 1、全血的采集保存和DNA的提取 I. 用含抗凝剂的采血管进行采血，抗凝剂一般有EDTA和肝素，EDTA更好一些，不会影响下游的反应，如果没有采血管，也可以自己添加抗凝剂EDTA，提前准备0.04M的EDTA溶液，每5ml的血液中加入0.4ml配好的EDTA溶液，颠倒混匀即可。保存于-20℃至-80℃，一般2-3年内均可以提取，保存时间越短，提取的质量越高，Z好在2个月内提取。 II. DNA提取方法的选择：全血提取试剂盒一般有离心柱和溶液型两种（比如Qiagen、Promega、Bioteke；摒弃酚氯仿手提的方法，时间长毒性大），原理及步骤基本相同。虽然各公司推出了N多型号，让人不知如何去选择，但从原理和操作步骤看，基本就是离心柱和溶液型两种。一般来说，离心柱（DP1801）的提取纯度高一些，但是处理量小（0.1-1ml）、得率略低；溶液型(DP2101或DP2201)的提取量大（1-10ml）得率也高于离心柱。医院的血液标本一般在2ml以上，一般选择溶液型的方法提取.在说到国产和进口差别的时候，很多人以为进口一定比国产的好，我们觉得没有Z好，只有更好！在不断的进行试验优化之后，全血基因组DNA提取试剂盒DP2101或DP2201开创了第三代技术，不需要蛋白酶K消化，进口的都是要借助蛋白酶K的啊！DP2101或DP2201减少了蛋白酶K现配现用的麻烦和消化的时间，而且提取量和稳定性更好。 III. 非抗凝血（凝固血）能否提取？答案是肯定的，而且一点都不麻烦，提取效果和抗凝血没有差别！在你找遍了进口的所有品牌都找不到后，回过头来您才发现原来他就在身边，百泰克的凝固血基因组DNA提取试剂盒已经有很多忠实的用户。 2、全血RNA如何提取 I. 全血RNA提取过程哪些是RNA降解的因素？全血中RNA酶是非常丰富的，RNA在没有保护的状态下很容易降解！哪些是状态RNA不受保护呢，比如红细胞裂解液裂解红细胞的过程，红细胞裂解液是低浓度的平衡盐溶液，没有YZRNase的成份，这时候RNA不受保护；DNA酶消化的时候RNA也不受保护，这个时候也没有YZRNase的成份。 II. 什么样的提取方法更好？我们在选择方法的时候要倾向于对RNA全程有保护的方法！一般的方法都是先用红细胞裂解液裂解红细胞，然后从白细胞提取核酸，还要经过DNA酶的消化去除DNA，这种并不是Z好的方法，过程中有很多RNA降解的因素。所以直接裂解法是Z好的方法，将采集的血液迅速加入3倍体积的裂解液RLS——RP4001血液(液体样本)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)的裂解液，迅速颠倒混匀。裂解液RLS含有强烈的蛋白变性剂，能迅速变性蛋白，是RNase变性，不能对RNA降解。裂解后的混合液还可以用来运输，以避免RNA降解，这个方法成为博奥生物制作表达谱芯片RNA运输和提取

赞(3)

回复(0)

评论

评论
登录后参与评论

热门问答

如何提取和研究血液DNA，RNA与蛋白:

如何提取和研究血液DNA，RNA与蛋白:

高氯酸提取DNA和RNA: 有一篇文献中使用高氯酸同时提取DNA和RNA，具体步骤如下：取2mL0.5% 组织匀浆液，加入 1mL0.6mol/L冷高氯酸，冰上放置10min后500g离心10min，弃上清，沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸洗涤两次，两次洗涤后都以500g离心l0min，弃上清，将沉淀物溶解于2mL0.3mol/L... 有一篇文献中使用高氯酸同时提取DNA和RNA，具体步骤如下：取2mL0.5% 组织匀浆液，加入 1mL0.6mol/L冷高氯酸，冰上放置10min后500g离心10min，弃上清，沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸洗涤两次，两次洗涤后都以500g离心l0min，弃上清，将沉淀物溶解于2mL0.3mol/L的KOH，37℃条件下培养60min，然后加入1mL1.2mol/L高氯酸，冰上放置10min，500g离心15min，收集上清液(I)，沉淀物用2mL0.2mol/L高氯酸溶解后再离心，再收集上清液(II)，集中上清液(I和II)用于RNA浓度的测定，沉淀物用于测定DNA的浓度。不知各位有没有用过这种方法，高氯酸的作用是什么？请赐教！展开

如何从组织中提取RNA和DNA:

提取血液的RNA怎么提取:

提取RNA与提取DNA方法的区别与联系？:

trizol法提取rna 如何去除dna:

质粒DNA的提取与染色体DNA和RNA的提取有什么异同点:

提取dna和rna方法有什么区别:

如何从血液中提取游离DNA:

DNA、RNA和蛋白质提取和纯化，如何提供全面保护？

　　DNA、RNA和蛋白质分析是许多研究中的关键步骤，其中高质量的样品是实验里是很关键的一步。但是，以Z佳条件下提取DNA、RNA、蛋白质，并保证其原始状态的保存在日常实验中往往非常。
　　比如，蛋白提取过程中，样本在研磨之前、研磨中和研磨后均面临多种被降解的危险。蛋白酶活性和热量是显着的危险因素，需要特别注意。
　　众所周知，皮肤组织是很难处理的样本，大小鼠皮肤组织提取DNA、RNA是目前各高校实验室的一项难题。大鼠的后爪皮被认为比背部皮肤更厚，因此完全研磨这些组织是十分具有挑战性的。

　　别怕，净信有款冷冻研磨仪完全能解决以上所提到的问题。

　　它能将将任何来源(包括土壤、植物和动物的组织/器官、细菌、酵母、真菌、孢子、古生物标本等)原始DNA、RNA和蛋白质进行提取和纯化，低温研磨样品能够有效YZ核酸降解、保留蛋白质活性，减少样品的挥发，更完整保留样品成分含量。药物有效成分的异构体之间常常存在重大区别，低温研磨可预防分子因压力和受热而降解。对于高韧塑料、高强塑料、树脂等难研磨样品，低温研磨可大大提高研磨效果及效率。在国内很多高校和科研机构都获得不错的口碑！
　　俗话说得好，要提高实验效率，装备得选好啊！

　　这么好的设备，赶紧申请SY，来亲身体验一下吧（二维码）

　　性能特点：
　　1.温度可自定义调节：
　　研磨温度可根据实验要求自定义调节，制冷可调：-50至37度
　　2.样本处理通量高，研磨效果好：
　　一次处理多达192个样品，1.15秒内处理量可同时处理64个样品，适用12位和24位的液氮冷冻适配器，研磨效果好，出料粒度5um
　　3.操作简便，重复性稳定
　　内置程序控制器，可对参数进行设置；可存储十组实验数据，根据不同实验样本，设置有动物心脏脾肺肾、骨骼、皮肤、毛发模式，相同研磨程序获得相同效果
　　4.无交叉污染：
　　在研磨过程中处于全封闭状态，避免交叉污染；
　　5.安全性高，低噪音：
　　具备安全罩及安全锁，无需涉及液氮操作，安全性高；仪器运行过程中，噪音小于55dB，不会对其它实验或仪器产生干扰。
　　6.维护方便：不锈钢内腔，清洁消毒方便，无需定期维护

　　实验效果图：

　　开学季福利，惊喜SY中！
　　SY须知：
　　活动时间：即日起至10月15日
　　申请流程：
　　1.点击阅读原文填写SY申请；
　　2.提交成功后，净信工作人员会联系申请用户，确定SY时间；
　　3.SY周期为一周，SY结束后，收回SY仪器。

2020-09-16 18:25:09 320 0

提取RNA的血液怎样保存:

提取RNA时如何去除DNA的污染:

血液中DNA的提取与纯化回收: 怎么读，实验结果不会写... 怎么读，实验结果不会写展开

组织中提取dna和血液中提取dna有什么不同:

为什么DNA和RNA的提取方法不同？: 二者的原理有何不同？

ctab法提取rna和dna的异同:

RT-PCR是提取DNA还是RNA:

是否有方法可以同时提取DNA 和RNA:

血液提取dna试剂盒可以提取组织么:

11月突出贡献榜

推荐主页

仪器网（yiqi.com）欢迎您！

联系我们

关注我们