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GX液相色谱法的原理

jopojo 2011-07-20 06:13:24 480  浏览
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全部评论(6条)

  • 小丶爷乄 2011-07-21 00:00:00
    fggffgf

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  • 527250989g 2011-07-23 00:00:00
    老兄,网上到处是。。。。。。。 这手不应该伸吧?

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  • 贾成本 2011-07-21 00:00:00
    基本原理就是塔板理论 根据柱子不同,分离原理各不相同 原理:溶质疏水性不同;极性不同;所带电荷不同;分子尺寸不同;疏水性对盐的依赖度不同;与填料上配基之间的相互作用力不同;手性化合物与配基之间的手性识别 。

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  • 欧蓝旭 2011-07-21 00:00:00
    GX液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(Z高输送压力可达4.9107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。 一、特点: 1.高压:液相色谱法以液体为流动相(称为载液),液体流经色谱柱,受到阻力较大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。一般可达150~350×105Pa。 2. 高速:流动相在柱内的流速较经典色谱快得多,一般可达1~10ml/min。GX液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少于 1h 。 3. GX:近来研究出许多新型固定相,使分离效率大大提高。 4.高灵敏度:GX液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器,进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外,用样量小,一般几个微升。 5. 适应范围宽:气相色谱法与GX液相色谱法的比较:气相色谱法虽具有分离能力好,灵敏度高,分析速度快,操作方便等优点,但是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而GX液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于 400 以上)的有机物(这些物质几乎占有机物总数的 75% ~ 80% )原则上都可应用GX液相色谱法来进行分离、分析。 据统计,在已知化合物中,能用气相色谱分析的约占20%,而能用液相色谱分析的约占70~80%。 二、性质及原理:GX液相色谱按其固定相的性质可分为GX凝胶色谱、疏水性GX液相色谱、反相GX液相色谱、GX离子交换液相色谱、GX亲和液相色谱以及GX聚焦液相色谱等类型。用不同类型的GX液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。其不同之处是GX液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好,且须在色谱仪中进行。 GX液相色谱法的主要类型及其分离原理 根据分离机制的不同,GX液相色谱法可分为下述几种主要类型: 1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。 LLPC与GPC有相似之处,即分离的顺序取决于K,K大的组分保留值大;但也有不同之处,GPC中,流动相对K影响不大,LLPC流动相对K影响较大。 a. 正相液 — 液分配色谱法(Normal Phase liquid Chromatography): 流动相的极性小于固定液的极性。 b. 反相液 — 液分配色谱法(Reverse Phase liquid Chromatography): 流动相的极性大于固定液的极性。 c. 液 — 液分配色谱法的缺点:尽管流动相与固定相的极性要求完全不同,但固定液在流动相中仍有微量溶解;流动相通过色谱柱时的机械冲击力,会造成固定液流失。上世纪70年代末发展的化学键合固定相(见后),可克服上述缺点。现在应用很广泛(70~80%)。 2 .液 — 固色谱法 流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性ZX发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性ZX吸附的是S),可表示如下: Xm + nSa ====== Xa + nSm 式中:Xm--流动相中的溶质分子;Sa--固定相中的溶剂分子;Xa--固定相中的溶质分子;Sm--流动相中的溶剂分子。 当吸附竞争反应达平衡时: K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa] 式中:K为吸附平衡常数。[讨论:K越大,保留值越大。] 3 .离子交换色谱法(Ion-exchange Chromatography) IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。 以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下: X-(溶剂中) + (树脂-R4N+Cl-)=== (树脂-R4N+ X-) + Cl- (溶剂中) 当交换达平衡时: KX=[-R4N+ X-][ Cl-]/[-R4N+Cl-][ X-] 分配系数为: DX=[-R4N+ X-]/[X-]= KX [-R4N+Cl-]/[Cl-] [讨论:DX与保留值的关系] 凡是在溶剂中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法来进行分离。

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  • 明SaME赱 2017-10-08 00:00:00
      原理:  流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。达到平衡时,服从于GX液相色谱计算公式:  式中,cs—溶质在固定相中浓度;cm—溶质在流动相中的浓度; Vs—固定相的体积;Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似之处,即分离的顺序取决于K,K大的组分保留值大;但也有不同之处,GPC中,流动相对K影响不大,LLPC流动相对K影响较大。  补充:  GX液相色谱法又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。GX液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。  GX液相色谱按其固定相的性质可分为GX凝胶色谱、疏水性GX液相色谱、反相GX液相色谱、GX离子交换液相色谱、GX亲和液相色谱以及GX聚焦液相色谱等类型。用不同类型的GX液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。其不同之处是GX液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好,且须在色谱仪中进行。

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  • 啊健身房地方 2018-03-31 00:00:00
    色谱法是一种分离技术,试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。其中的一相固定不动,称为固定相;另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体(气体或液体),称为流动相。当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。按两相状态分类:气体为流动相的色谱称为气相色谱(GC)G-S & G-L;液体为流动相的色谱称液相色谱(LC)L-S 和L-L。

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       以GX液相色谱法为例,这种方法适用范围很广,由于不受分析对象挥发性和稳定性的限制,适用度达80%,而气相色谱法约只占20%。

       GX液相色谱法(HPLC)是现代分离测试的重要手段。是在经典的液相色谱法基础上发展起来的,其分离机制与常规柱色谱相同,但填料更加精细,柱效高,分析速度快。实现了对样品的GX分离测定,吸取了经典液相色谱的研制经验,引入了微处理机技术,提高了仪器的自动化水平和分析精度。现在的GX液相色谱仪自动化程度很高,为色谱分析工作者提供了GX率、功能齐全的分析工具。

       GX液相色谱法的应用范围广泛,适用的样品范围广,具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析和分离高沸点且不能气化的热不稳定生理活性物质的特点,弥补了气相色谱法的不足。


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