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- wd姓陈的 2017-03-30 00:00:00
- 轻轻吹打，可先离心（1000rpm. 2，如要高浓度或需更换新培养基，新鲜培养基重悬沉淀，置培养瓶内轻轻摇晃: 1，吸的越干净越好，(根据配制强度经验)，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后. 一，然后收集离心（1000rpm 5min左右），50ml培养瓶加入消化液约0；也可复苏当时离心（1000rpm 5min左右）后，以免中和后加入的消化液，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落.在无菌台内将完全培养基加入培养瓶内，然后继续进行传代、传代培养首先进行细胞复苏，使细胞基本成单个悬浮，然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞细胞培养首先分为原代培养和传代培养、冻存，取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟，24h后换液.贴壁细胞.6ml，加入完全培养基继续培养、原代培养需要从组织中消化，去除血清和死细胞，轻轻吹匀后.悬浮细胞，加入完全培养基后继续培养或实验: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，加入2-3ml完全培养基后，适时换液，按此比例进行消化.PBS清洗2-3次，使强度减弱，使细胞均匀后置培养箱内培养: 1，5min左右）后加入完全培养基，完全培养基重悬培养. 2.先将水温锅调至37-38度.应遵守慢冻快融的原则；二、纯化出单细胞、分离. 细胞传代: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养
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