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锘海LS18平铺光片显微镜3D全脑成像助力表征神经胶质瘤小鼠模型-荣登Nature杂志

2022年5月11日，国际学术期刊《Nature》在线发表了浙江大学医学院脑科学与脑医学系、良渚实验室研究员，浙大二院双聘教授刘冲团队的新研究成果“ Olfactory sensory experience regulates gliomagenesis via neuronal IGF1 ”。该研究建立超高时空单细胞分辨率小鼠癌症模型体系，用于自发性肿瘤微环境的可视化及功能分析，并从全新角度揭示外部感觉（嗅觉刺激）可以直接影响胶质瘤发生。

动物不断地从周围环境中接收诸如气味、声音、光线和触觉等各类感官刺激，这些感觉刺激对于动物觅食以及躲避天敌来说不可或缺，同时它们也会影响动物的生理状态，甚至在某些情况下这些感觉刺激可能引发癌症。恶性胶质瘤是目前神经肿瘤中致命的肿瘤之一，已有的研究表明神经胶质瘤细胞与诸如星形胶质细胞、内皮细胞、周细胞、免疫细胞以及神经元等多种细胞之间互作，进而形成独特的肿瘤微环境，对其后续发生、转移和侵袭至关重要。然而，在正常生理条件下，外界感觉刺激是否能直接影响恶性胶质瘤的发生发展目前尚不清楚。

刘冲教授研究团队基于条件性敲除技术（conditional knockout，CKO）构建的自发胶质瘤小鼠模型，发现嗅球 （olfactory bulb）胶质瘤的生发概率很高，且肿瘤主要生发于嗅球的突触小球层（glomerular layer，GL）， 突触小球层是嗅觉环路中第一级神经元（olfactory receptor neuron，ORN，嗅觉感受神经元）和第二级神经元（mitral and tufted cells，M/T cells，僧帽/簇状细胞）的信息交流区域。研究团队利用化学遗传学干预手段和物理性嗅觉干预方式，均证实了嗅觉引起的神经元活动可以调控胶质瘤的生长。研究团队进一步追根溯源，发现小鼠大脑中胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor 1，IGF1）主要表达在嗅觉环路第二级神经元M/T cells中，并通过实验证明，嗅觉活动主要是通过IGF-1信号通路调控胶质瘤的发生。

此项研究成果首次通过清晰证据链，证实嗅觉感知可直接调节神经胶质瘤的发生，嗅觉感知体验和神经胶质瘤发生之间存在独特的直接联系，为胶质瘤的临床诊治提供新的思路和靶点。

本文是神经系统胶质瘤研究的颠覆性力作，是继厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室陈洪敏课题组（2022年4月在国际学术期刊《Nature》子刊发表“ Carbonized paramagnetic complexes of manganese (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumors ”，点击链接看文章详情）使用锘海LS18平铺光片显微镜对胶质瘤小鼠模型脑样本进行3D高分辨成像的又一案例。

该文中的胶质瘤小鼠模型脑样本经过组织透明化后，使用锘海LS18平铺光片显微镜进行3D全脑成像。

原文Extended Data Fig. 3a 不同肿瘤发育阶段的CKO模型脑样本，使用锘海LS18平铺光片显微镜成像得到的3D全脑视图，对CKO模型进行了全面表征。Ms19127 没有检测到肿瘤；Ms18980 在 OB 的突触小球层携带一个小肿瘤；Ms19119在突触小球层有明显的肿瘤；Ms18905在OB的突触小球层和颗粒细胞层均携带明显的肿瘤。白色箭头指向 OB 中的肿瘤。

点击视频链接

原文Video S8 视频展示Ms18905在OB的突触小球层和颗粒细胞层均携带明显的肿瘤（其他3个时期对应的视频可点击文章链接进一步查看）。

参考文献：Chen, P., Wang, W., Liu, R. et al. Olfactory sensory experience regulates gliomagenesis via neuronal IGF1. Nature (2022). https://doi.org/10.1038/s41586-022-04719-9 

文章链接：Olfactory sensory experience regulates gliomagenesis via neuronal IGF1

锘海LS18光片显微镜—专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统

针对大组织样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。

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2022年5月13日，国际学术期刊《Frontiers in Neurology》在线发表了复旦大学医学神经生物学国家重点实验室郭景春教授为第一通讯作者，何承峰为第一作者的研究成果“ Knockdown of NRSF Alleviates Ischemic Brain Injury and Microvasculature Defects in Diabetic MCAO Mice ”。 

糖尿病（diabetes mellitus，DM）不仅是影响世界数亿人的主要健康问题之一，也是公认的脑卒中危险因素之一，越来越多的证据还表明糖尿病与更糟糕的脑卒中预后有关，例如认知障碍和痴呆。然而糖尿病及脑卒中后不良预后的生物学机制仍不清楚。

NRSF即神经元限制性沉默因子（neuron-restrictive silence factor），又称为REST（repressor element-1-silencing transcription factor，抑制元件1-沉默转录因子），是一种重要的锌指蛋白转录负调控因子，它与神经元限制性沉默元件（neuron restrictive silencer element，NRSE），或称抑制元件1（repressor element 1，RE-1）相结合，调节靶基因的转录。NRSF 在多种神经系统疾病的发展和进展中发挥重要作用，例如缺血性脑卒中、阿尔茨海默病和帕金森病等。先前的研究表明，NRSF在糖尿病和缺血性脑卒中表达升高，而NRSF 在调节糖尿病缺血性脑卒中的作用也尚未完全清楚。本文作者通过高脂饮食和大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）建立糖尿病缺血性脑卒中小鼠模型（DM+MCAO），发现糖尿病增强了MCAO诱导的海马NRSF的升高，此外DM+MCAO小鼠的神经元损伤和学习/记忆障碍加重，血脑屏障（blood brain barrier，BBB）完整性和脉管系统疾病也进一步恶化。作者进一步利用重组腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）shRNA-NRSF基因干扰载体（sh-NRSF），发现NRSF敲低可改善糖尿病加重的缺血性脑损伤，也减轻了由此引起的海马神经元损伤，并可保护微血管免受糖尿病缺血性损伤。由此可见，转录因子NRSF的升高可导致糖尿病缺血性海马中更大的神经元损伤和脑微血管缺陷，为糖尿病性脑卒中的治疗实践提出了新的候选靶点NRSF。

该研究成果是本月继浙江大学医学院脑科学与脑医学系、良渚实验室研究员，浙大二院双聘教授刘冲团队使用锘海LS18平铺光片显微镜在Nature发表“ Olfactory sensory experience regulates gliomagenesis via neuronal IGF1（点击链接看文章详情）” 研究成果后的另一佳作。

该文对糖尿病缺血性脑卒中模型（DM+MCAO）小鼠，通过股静脉注射Lectin染料并对全脑样本进行组织透明化处理后使用了锘海LS18平铺光片显微镜进行3D成像。

原文Fig. 6 A-D采用锘海LS18平铺光片显微镜对sh-NRSF及其对照组进行全脑3D荧光成像（红色：Lectin; 绿色：GFP标记AAV shRNA），尽管两组的对侧海马体积大致相等，但是病毒注射同侧海马体积sh-NRSF约为对照组的1.5倍。

原文Fig. 7 对Lectin标记全脑微血管的3D荧光成像结果进一步评估病毒注射同侧海马血管的荧光分布（A，C：CA1-CA2；B，D：CA3）、体积（E，F）、长度（G，H）和分支点（I，J），各指标显示sh-NRSF相对于对照组均有所改善。

文章链接: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fneur.2022.869220/full

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神经系统是机体内对生理功能活动的调节起主导作用的系统。近年来，随着显微成像技术的快速发展，神经细胞和神经网络的研究已成为学术科研领域的热门研究。为寻求对神经组织更好的染色方案，锘海LS18测样服务中心对小鼠多个器官的神经组织进行透明化TH染色预实验，并通过LS18平铺光片显微镜上的快速扫描成像，得到了以下结果。 在神经科研领域中，对神经走向的研究，离不开对神经细胞和神经网络的观察。锘海LS18测样服务部，致力于为客户带来优质的服务，团队对小鼠的多个器官组织都进行了神经TH（Tyrosine Hydroxylase）染色，总结得到更好的染色方法，对客户样本负责，更是对自己负责！  

 
如今，我们已完成多种小鼠器官组织在LS18平铺光片显微镜上的快速扫描成像，现分享近期成像结果。 

• 小鼠肺神经染色，3.2x快速成像结果展示，如图1及图2所示：

图1 小鼠肺神经成像-volume展示 

图2 小鼠肺神经成像-200um层切局部高清展示

• 小鼠肝脏神经染色，3.2x快速成像结果展示，如图3及图4所示：

图3 小鼠肝脏神经成像-volume展示

图4 小鼠肝脏神经成像-200um层切局部高清展示

• 小鼠心脏神经染色，3.2x快速成像结果，如图5及图6所示：

图5 小鼠心脏神经成像-volume展示

图6 小鼠心脏神经成像-200um层切局部高清展示

• 小鼠肾脏神经染色，3.2x快速成像结果，如图7及图8所示：

图7 小鼠肾脏神经成像-volume展示

图8 小鼠肾脏神经成像-200um层切局部高清展示

锘海生命科学凭借平铺光片专利技术，自主研发生产LS18平铺光片显微镜 (Tiling Light sheet Microscope) 是一款适用于各类透明化大组织样品及活体模式生物长时程动态监测的选择性平面照明显微镜，可在细胞级甚至亚细胞级水平上快速、低光毒性获得多色荧光标记结构的精准3D空间分布。 作为生产商，我们不仅提供成像仪器，亦提供科研服务平台。为各地高校、科研院所、医院及企业提供从 组织透明化 → 免疫荧光染色 → 大样品高分辨3D显微成像 → 大数据分析一体化服务。

另依托公司测样服务中心丰富的实验经验和LS18平铺光片显微镜的成像优势，现已推出自主研发的锘海透明化试剂盒。除此之外，免疫荧光染色试剂盒也即将问世，敬请期待！ 锘海旨在通过精准、快速、多样化的研发服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化解决方案。 

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锘海生物科学“平铺光片显微镜3D荧光成像”发文章赢奖金

LS18光片显微镜成像案例--超长脊柱样本3D重构

锘海LS18平铺光片显微镜高分辨率血管成像重磅来袭！

 联系我们: 

电话：021-37827858、13818273779（微信）

邮箱：info@nuohailifescience.com

地址：上海市松江区顺庆路650号1幢102、202室 

2022年9月27日，学术期刊《Cell Reports》在线发表，南京农业大学动物医学院青年教师李昱辰为通讯作者，其团队研究成果“ Bacillus subtilis programs the differentiation of intestinal secretory lineages to inhibit Salmonella infection ”。

肠道黏膜可以抵抗病原菌的入侵，是机体的重要保护屏障。在Notch、BMP及Wnt等信号通路的共同协调下，肠道干细胞（Intestinal stem cell，ISC）能够向分泌型或吸收型谱系定向分化，来维护肠道的稳态。肠道干细胞与机体其他类型干细胞不同，能够持续与肠道微生物发生直接或间接的接触。因此，解析微生物群与肠上皮分化命运之间的关系，是有效维持病原菌应激下肠道稳态的关键。

该研究成果是继复旦大学医学院神经生物学国家实验室何承峰后用锘海LS18光片显微镜发表“ Knockdown of NRSF Alleviates Ischemic Brain Injury and Microvasculature Defects in Diabetic MCAO Mice” 研究成果后的另一佳作。

该研究探讨了枯草芽孢杆菌对肠上皮分化特别是分泌细胞命运的调节作用，以及对肠黏膜屏障完整性的保护作用，发现了活的枯草芽孢杆菌能刺激小鼠肠类器官和回肠内肠分泌细胞的分化。这些作用被DLL4的添加所抑制，表明枯草芽孢杆菌遏制Notch通路以减少Hes1的表达，从而使ISC分化向分泌细胞方向转变。枯草芽孢杆菌，影响ISC的分化和增殖，以保护黏膜屏障，可调节宿主肠上皮Notch信号通路，为促进肠道健康提供了巨大的潜力。

文章链接: https://doi.org/10.1016/j.celrep.2022.111416

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2022年4月11日，国际学术期刊Nature Communications在线发表了厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室陈洪敏课题组的研究成果“Carbonized paramagnetic complexes of Mn (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumors”。

恶性肿瘤的早期诊断在临床中非常重要。磁共振成像 (MRI) 已广泛应用于恶性肿瘤，如脑瘤、肝癌的诊断。钆造影剂是临床上最广泛使用的磁共振增强造影剂，但因其较低的弛豫率、无靶向性，并且具有体内沉积、诱发导致肾病患者出现肾 源性系统性纤维化等缺点，已被FDA加入黑框警告 (black box) 。

脑胶质母细胞瘤 (GBM) 是最致命的原发性脑部肿瘤，其诊断后的中位生存期仅为 14 个月。主要原因是血脑屏障 (BBB) 的存在阻止了超过98%的小分子和所有大分子化疗药物进入大脑，同时也阻碍了磁共振造影剂的早期脑瘤影像诊断效果。

针对临床磁共振造影剂减毒增效的临床需要和技术需求，本研究设计以食品添加剂锰葡萄糖酸盐和氨基酸为前体，开发出了锰 (II) 碳化顺磁性配合物(Mn@CCs)。研究发现，与临床最广泛使用的马根维显 (Gd-DTPA) 相比，Mn2+密封在碳化壳中实现了超高的Mn2+稳定性和r1弛豫率 (22.1mM−1s−1, 9.4T) ，且同时具备优良的光学性能。

种种优点表明Mn@CCs具有很高的潜力，为早期的分子诊断和生物医学成像提供了新的选择。

该研究成果是继2021年中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）周斌研究组使用锘海LS18平铺光片显微镜在国际学术期刊Science发表“Carbonized paramagnetic complexes of Mn (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumors（点击链接看详情文章）”研究成果后的另一力作。

该文中的小鼠脑样本采用了锘海自主研发的组织透明化试剂盒进行组织透明化，并使用锘海LS18平铺光片显微镜对样品进行3D成像。

原文Fig. 7d 表达RFP胶质母细胞瘤小鼠的完整鼠脑透明化前后（黄色箭头表明肿瘤所在位置）

原文Fig. 7e 3D 荧光成像采用锘海 LS 18 平铺光片显微镜以单细胞分辨率对全脑及肿瘤进行3D荧光成像

（灰色：全脑轮廓；红色：表达RFP胶质母细胞；绿色：Mn@CCs）

查看清晰视频请搜索链接：

https://static-content.springer.com/esm/art%3A10.1038%2Fs41467-022-29586-w/MediaObjects/41467_2022_29586_MOESM6_ESM.pptx

论文采用锘海透明化方法及LS18平铺光片显微镜采集、处理数据

点击此处下载阅读全篇论文

Carbonized paramagnetic complexes of Mn (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumors

锘海组织透明化试剂盒

Cat#：NH210701

锘海自主研发的组织透明化试剂盒依托测样服务中积累到的丰富而宝贵的经验，对各种透明化方法进行测试和比较后对试剂配方进行了精心优化，使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出非常优异的性能。能够轻松实现小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸、淋巴、胎盘、卵巢等各类组织器官的透明化，适用范围广、操作简便、速度快、效率高，是广大科研工作者的不二之选。

锘海透明化试剂盒（Cat#：NH210701）

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锘海LS18平铺光片显微镜

专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统

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自主研发生产新型平铺光片显微镜

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政策背景

根据9月7日国务院常务会议精神，决定对部分领域设备更新改造贷款阶段性财政贴息。主要覆盖对高校，医院和中小微企业等九大领域的设备购置和更新改造新增贷款，中央财政贴息2.5个百分点，期限2年，申请贴息截止至今年12月31日。

随后9月15日卫健委发布拟使用财政贴息贷款更新改造医疗设备的通知，预计将覆盖综合医院、专科医院、中医医院（含中西医结合医院、民族医院）、传染病医院及民营医院，要求每家医院贷款金额不低于2000万。贷款使用方向也包括了诊疗、临床检验、重症、康复、科研转化等各类医疗设备购置。

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提供课题组-组织透明化、染色及三维整体成像技术报告及解决方案

平铺光片显微镜Nuohai Tiling Light-sheet Microscope-LS18是一款适用于各类透明化大组织样品及活体模式生物长时程动态监测的选择性平面照明显微镜，可在细胞级甚至亚细胞级水平上快速、低光毒性获得多色荧光标记结构的精准3D空间分布。LS18所采用的平铺光片专利技术有效解决了传统光片显微镜空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，优良的系统设计即适用于基于水溶性透明化的样品 (SHIELD，CLARITY, CUBIC, Fruit等)，亦适用于基于有机溶剂透明化的样品 (BABB，iDISCO/uDISCO, PEGASOS等)，可实现整鼠、小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肠道、肝脏、乳腺、肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现，亦可展示诸如斑马鱼等活体生物的发育进程，可广泛应用于脑科学、发育生物学、肿瘤学、药物研发和筛选、干细胞研究、组织胚胎学、植物生理学等各个领域。

已购买锘海LS18平铺光片显微镜客户

复旦大学、中国医学科学院药物研究所、厦门大学、西湖大学、华东理工大学、广东医科大学、昆明医科大学、山东第一医科大学、华中科技大学同济医学院、北京协和基础医学院、中国科学院生物与化学交叉研究等……

用LS18平铺光片显微镜成像发表文章

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LS18成像展示

WT 成年小鼠脊髓稀疏标记运动神经元+局部放大

ChAT-eGFP成年小鼠腰段脊髓及稀疏标记感觉神经元+局部放大

脊髓神经+提取单个神经元

鼠脑胶质瘤及纳米材料

组织透明化试剂盒

由于生物组织的不均匀性，诸如水、脂质、蛋白质等易造成光散射以及各类色素易造成光吸收，不仅限制成像深度而且大幅度降低图像对比度，对组织三维成像造成极大挑战。因此，组织透明化技术是开启光学显微全部潜能的关键！

锘海透明化试剂盒基于不同透明化方法测试和比较后，精心优化配方，可以穿透细胞而不损伤自身及蛋白质结构，进行脱色脱脂，采用亲水性温和环境的设计，使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出色。能轻松实现小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸、淋巴、胎盘、卵巢等各类组织器官的透明化。结合锘海LS18平铺光片显微镜荧光成像，轻松实现清晰的组织结构三维可视化。

仪器生产商+一站式科研服务

您还在为研究方向寻找合适的方法吗？

1. 神经科学研究想要观察整个鼠脑神经分布

2. 病变组织中的免疫细胞和血管分布

3. 胚胎发育过程中神经系统支配，肌肉系统，血管系统、心肺系统及泌尿系统分布

4. 动物/植物组织内细胞种类的分布

…

传统的方法已经不能满足您的需求了？

1. 组织连续切片，工作量大且破坏神经组织，拍摄成像速度慢，一般至少需要数周

2. 深层组织信号没有办法观察，双光子目前大约在600μm-800μm左右的水平

3. 找不到合适的显微镜：传统宽场显微镜，成像速度快但分辨率低；共聚焦显微镜分辨率高，但是成像速度慢

4. 对实验操作者技术要求高

…

锘海为您提供：组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务

锘海简介

锘海生命科学成立于2017年，2020年获得国家高新技术企业资质，2021年7月被列入上海市标准化试点项目单位，项目名称为《光片照明显微镜研发与应用标准化试点》（项目编号：S21-02-025）。总部位于上海漕河泾开发区松江园区内，在北京，广州，成都，沈阳等十余座城市设有办事处, 作为“生命科学的服务者，医疗创新的推动者“，致力于打造完整的生命科学研发、制造、服务生态体系。

锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肝脏、乳腺、肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现。“平铺光片技术”解决了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学等各个领域。为方便广大科研工作者，我们亦提供组织透明化、免疫荧光标记、高分辨大组织3D成像、图像分析与存储，一站式科研服务。

此外，锘海还有纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从筛选到制剂表征全线过程。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。目前，锘海已服务国内多家知名药企并具备成功申报临床的案例。

我们拥有一支专业且经验丰富的研发、销售、技术和本地化服务的团队，团队中大多数人员为高学历硕博人才，致力于为生命科学领域的科研及企业客户提供个性化、专业化的产品、服务和整体解决方案，让生命科学更加简单。

生物组织由各种具有不同光学特性的物质组成，因此，当光线穿过组织时，光分布和光强度由于光散射和光吸收等因素的影响而衰减，从而导致图像模糊或减弱，尤其是在组织深层区域更是显著。即此，组织透明化的目的是尽量减少光的散射和吸收，以获得更好的光学成像性能。有效的组织透明化有助于提高成像深度和对比度，使完整器官甚至啮齿类小鼠样品的全身3D成像成为可能。

从技术上讲，所有成像步骤的目标是期望以高通量方式拍摄理想分辨率（细胞到亚细胞）的细胞/器官/组织/完整实验模型图像。在众多的成像技术中，光片显微镜（LightSheet Mciroscope, LSM）因其优异的光切成像能力和高质量的成像速度而特别适用于透明化组织或模式生物的 3D成像。实际图像采集及应用中，应根据实验需求平衡图像质量、采集数据量和采集时间，不言而喻更高分辨率的图像会增加数据量及采集时间。而随着检测物镜NA值的增加，横向分辨率比轴向分辨率增加得更快，这使得保持空间分辨率各向同性变得更加困难。所以，LSM实际使用过程如何根据实验需求选择合理拍摄条件尤为重要。

锘海LS18平铺光片显微镜不仅可以实时预览和自动校准光片，且可以根据用户成像应用需求灵活调整平铺光片数量（1-10 tile），以满足快速和高分辨成像的不同需求。通常在某一放大倍数下，通过选择合适的平铺次数得到的轴向分辨率，以接近横向分辨率即可实现空间分辨率的各向同性，这种性能对于重要结构信息的判断尤为重要，对于原始信号的保真性也尤其重要，可以更大程度的减少光学畸变对原始信号的影响及数据的解读、分析。

LS18平铺光片显微镜具有各向同性分辨率的成像能力，但我们建议用户应在特定应用中合理地选择空间分辨率及平铺次数，兼顾数据存储、软件图像处理能力和数据分辨率之间的平衡，毋庸赘述图像采集时间和数据量随3D 空间分辨率和组织大小成比例增加。锘海LS18平铺光片显微镜给予客户更大权限的选择，可灵活选择少量平铺、不平铺传统光片成像模式，可有效提高成像效率、缩短成像时间、减轻对数据存储和处理压力，对于仅仅是简单定性或分辨率要求不高的成像实验相对高效。同时亦可以选择多次平铺的独特模式，可以有效提升采集信号的各项等性空间分辨率，满足高质量数据的解读需求，此类模式在同等空间分辨率条件下，成像效率、成像时间显著优于传统光片对数据的采集。

通过比较图像采集和图像重建过程，可以清楚地揭示使用常规光片显微镜和平铺光片显微镜在相同空间分辨率下对相同样本体积进行成像的不同效率。

• 针对大组织样本成像时，传统光片显微镜空间分辨率和成像视野之间存在矛盾

• 镜锘海LS18 平铺光片显微镜，在保持大的成像视野、快的成像速度的情况下

  使用薄的光片厚度，实现大组织样本高分辨率成像

以往我们的标准配置以高质量的各向同性分辨率成像设置（标准模式）为主，目前考虑到客户多样化的需求，更加灵活的专家模式即将开放给广大用户。以下展示一组成像结果的对比用于说明不同平铺次数成像模式之间的差异，可以让大家更直观地了解平铺所带来空间分辨率优势所在：

使用锘海LS18平铺光片显微镜对透明化Thy1-eGFP 小鼠脊髓成像（6.3X），分别使用平铺6次（6 tile，上行图像）和1次（1 tile，下行图像）模式进行对比，如图横向（A-B）和轴向（C-D）更大强度投影（MIP）。（C）和（D）中选定区域（黄色）的放大视图分别为（E）和（F），即使是较小胞体的形态在6 tile模式下依旧清晰可辨，但是在1 tile模式下会丢失部分信息，但是毫无疑问1 tile的速度相比于6 tile模式至少可提升6倍之多！

平铺 LSM 比传统 LSM 更有效地对具有高空间分辨率的透明化组织进行成像，因为通过平移光片而不是样本来减少对样本的扰动，这样更快、更准确、更灵活。锘海LS18平铺光片显微镜可以与所有组织透明化方法兼容，并且可以灵活地满足不同的成像需求，可通过相位调制对光片进行自动校准，因此也很可靠且易于操作。

锘海LS18平铺光片显微镜不仅注重3D成像能力，满足从透明化大组织中获得所需的数据，同时还注重优化和调整成像性能的能力，使得显微镜更灵活的兼容各类应用场景。与其他光片显微镜不同，LS18平铺光片显微镜采用专利的光学设计和相位调制方法，使其在透明化组织成像方面的能力、可靠性和灵活性更高。与其他光片显微镜相比，LS18平铺光片显微镜具有多项先进功能：首先，基于自主研发的平铺专利技术，与传统 LSM 相比，平铺光片用于样品照明时空间分辨率和成像效率可以同时得到提高，解决空间分辨率与丞相速度之间的矛盾。其次，检测物镜NA、检测放大倍率和激发光片平铺次数可轻松调节，使显微镜能够以微米级到亚微米级的空间分辨率对厘米级的透明化组织进行3D成像。第三，由二进制空间光调制器 (SLM) 进行相位调制生成的照明光，可满足样品照明时灵活的的平铺光片数量需求，且调制便捷只需要软件参数设置，无需任何硬件调试。此外，通过 SLM 的相位调制，可校正几乎所有的对准误差，这重要的保障了光片显微镜成像性能的稳定性及成套系统可靠性。显微镜与所有组织透明化方法兼容，并且很容易适应通过不同方法得到的不同形状和机械强度的组织成像。

参考文献

Chen Y, Li X, Zhang D, et al. A Versatile Tiling Light Sheet Microscope for Imaging of Cleared Tissues. Cell Rep. 2020;33(5):108349. doi:10.1016/j.celrep.2020.108349

Susaki EA, Ueda HR. Whole-body and Whole-Organ Clearing and Imaging Techniques with Single-Cell Resolution: Toward Organism-Level Systems Biology in Mammals. Cell Chem Biol. 2016;23(1):137-157. doi:10.1016/j.chembiol.2015.11.009

锘海LS18平铺光片显微镜 ——专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统

针对透明化样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。

锘海LS18平铺光片显微镜，请点击链接：锘海LS18平铺光片显微镜

锘海一站式科研服务 —— 让科研变得更简单

组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器（上海）有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务，旨在通过准确、快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。

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2022年4月18日，国际学术期刊Chinese Medicine在线发表了复旦大学基础医学院中西医结合学系冯异团队的研究成果“Three-dimensional visualization of electroacupuncture-induced activation of brown adipose tissue via sympathetic innervation in PCOS rats”。

多囊卵巢综合征 (PCOS) 是一种复杂且异质性的女性生殖内分泌和代谢紊乱性疾病，与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病、肝损害等密切相关。在所有PCOS女性患者中，约有一半存在向心性肥胖，不孕、心血管疾病、糖尿病和非酒精性脂肪肝的发生率明显高于瘦型PCOS患者。并且PCOS对后代的新陈代谢也有显著的影响。最近的研究表明，脂肪组织包括白色脂肪组织 (WAT) 和棕色脂肪组织 (BAT) 在PCOS的发生、发展和预后中发挥着重要作用。哺乳动物WAT的功能是储存和释放能量，而BAT的功能是针对不同的刺激消耗能量和产生热量。BAT的产热活性主要依赖于位于线粒体内膜的线粒体棕色脂肪解偶联蛋1 (UCP1)的功能。临床实践中，EA已被证明可改善PCOS患者的肥胖和生殖功能障碍，在PCOS大鼠模型研究中表明EA可以影响WAT。然而，BAT在PCOS和EA治疗后的功能和神经调节仍然未知。本研究应用双氢睾酮 (DHT) 或高脂饮食，分别建立PCOS和肥胖模型，并利用透明化三维成像技术探讨BAT在PCOS大鼠模型中的作用及其与EA的关系。

该研究成果是本月继厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室陈洪敏课题组使用锘海LS18平铺光片显微镜在Nature子刊发表 “Carbonized paramagnetic complexes of manganese (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumors(点击链接看文章详情)” 研究成果后的另一佳作。

该文通过对大鼠脂肪样本进行免疫染色和组织透明化处理后使用了锘海LS18平铺光片显微镜进行3D成像。

原文Fig. 4A-C采用锘海LS18平铺光片显微镜对肩胛骨BAT进行3D荧光成像，结果显示肥胖和PCOS模型TH（酪氨酸氢化酶，标记交感神经）和 UCP1 （解偶联蛋白1，标记BAT活性）阳性细胞的数量减少，并且经过 EA 治疗后有所恢复（红色：UCP1;绿色：TH）。

原文Fig. 4D 三维荧光成像结果层切展示TH（绿色）和 UCP1（红色）的共定位。

锘海LS18平铺光片显微镜成像案例

原文Video S1 视频展示对照组BAT使用UCP1（红色）和TH（绿色）抗体染色后三维荧光成像结果。

• 文章链接

锘海LS18平铺光片显微镜

专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统

针对大组织样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的平铺光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。

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锘海一站式科研服务

让科研变得更简单

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《Nature》子刊：锘海LS18平铺光片显微镜和组织透明化技术助力开发新型MRI造影剂用于原位肿瘤早期诊断

锘海LS18光片显微镜助力ProTracer技术发现成体肝细胞来源-荣登Science杂志

我们郑重地邀请到西湖大学的高亮博士，解读用于透明化大组织纳米级到微米级分辨率三维成像的平铺光片显微镜

7月7日，早上10:00，诚邀老师们和我们一起（扫描文中二维码注册参与直播）

为强化基础研究，突破“卡脖子”技术，推动核心技术发展，中国光学工程学会开启了首届“金燧奖”中国光电仪器品牌榜评选活动。

评选邀请了多位投身国产仪器发展、了解国内外光电仪器技术产品情况的专家学者组成评审团队，为用户展示优秀的国产仪器。评选出我国自主研发、制造、生产的高端光电仪器，为我国自主高端科学仪器开拓国内外应用市场创造新机遇。

经过近70位专家的评审与线上答辩论证，锘海LS18平铺光片显微镜荣获“金燧奖”银奖。展现平铺光片显微镜在大体积生物组织三维成像中分辨率的优势和模式灵活可调的特点。

在此感谢专家评委与广大科研工作者对锘海的信任和支持，我们也将继续努力钻研和开拓，竭诚为广大科研工作者带来高质量又便捷的产品与服务。

获奖仪器

生物组织透明化及三维成像整体解决方案

2021年7月1-3日，锘海LS18平铺光片显微镜及智能透明化电泳仪Smart CLear装机培训在华中科技大学同济医学院顺利举行。

锘海生命科学工程师在仪器安装完成后，对光片及透明化进行理论和操作培训。内容包括透明化原理和方法、锘海LS18仪器操作演示、产品特点、案例展示及应用方向、服务内容等。随后老师进行样本成像测试，并验收仪器的各项参数，均顺利通过。

培训现场：

锘海LS18平铺光片显微镜简介：

锘海LS18平铺光片显微镜是一款为透明化大组织样品设计的高分辨率3D成像仪器。锘海LS18平铺光片显微镜采用自主研发的动态虚拟光片平铺技术，克服了传统光片显微镜3D空间分辨率、Z轴层析能力和成像视野之间的矛盾，摒弃了原有选择性平面照明显微镜中的单光片照明的方式，利用多个薄的光片分段照明，在不损失成像视野的情况下，获得高分辨率的3D图像。锘海LS18平铺光片显微镜具有高速高分辨率成像、成像模式灵活可调，多色同时成像等优势。

锘海LS18平铺光片显微镜致力于实现透明化后脑、心、肝、脾、肺、肾、小肠、乳腺、脊柱/脊髓、胸椎、肿瘤等多种完整组织器官的3D高分辨率成像。适用于各种不同类型透明化方法处理的样品，（水性透明化方法如Scale、SeeDB、CLARITY、CUBIC、SWITCH、SHIELD等，油性透明化方法如BABB、3DISCO、iDISCO、uDISCO、PEGASOS等），可得到高分辨率、高信噪比的多色荧光3D图像，能够快速定位宏观样品中的目标细胞，获得高分辨率的3D细胞微结构。

智能透明化电泳仪SmartClear 简介：

智能透明化电泳仪SmartClear 采用不同的电泳设计，在快速去脂的过程中大限度的保护样品蛋白。根据不同的实验需求，可定制化提供不同的样品台，电压、电流、温度，电场旋转速度等多种实验条件可调，使实验者获得好的实验条件。

 产品优势：

• 不同的电泳技术，保护样品蛋白

• 样品定制化，针对不同样品有不同载物台

• 成本低，透明液可维持10天

• 速度快，3天即可完成全器官透明化

应用范围：

•  生物软组织样本（如：脑、肝、脾、心脏等器官）转为澄清透明状态，并维持组织内完整的细胞结构和分子组成。

• 开启完整无损的全脑神经网络3D图像，包括精细回路和分子连接。

根据《科技型中小企业评价办法》（国科发政〔2017〕115号）和《科技型中小企业评价服务工作指引》（国科火字〔2022〕67号）的有关规定，公示上海市2023年首批科技型中小企业名单，锘海顺利入选榜单。

科技型中小企业：依托一定数量的科技人员从事科学技术研究开发活动，取得自主知识产权并将其转化为高新技术产品或服务，从而实现可持续发展的中小企业。

关于锘海：

锘海生命科学成立于2017年，2020年获得国家高新技术企业资质，2021年7月被列入上海市标准化试点项目单位，项目名称为《光片照明显微镜研发与应用标准化试点》（项目编号：S21-02-025）。总部位于上海松江区，在北京，广州，成都，沈阳等十余座城市设有办事处, 作为“生命科学的服务者，医疗创新的推动者“，致力于打造完整的生命科学研发、制造、服务生态体系。

    锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肝脏、乳腺、肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现。“平铺光片技术”解决了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学等各个领域。为方便广大科研工作者，我们亦提供组织透明化、免疫荧光标记、高分辨大组织3D成像、图像分析与存储，一站式科研服务。

此外，锘海还有纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从处方筛选到制剂表征全线过程。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。目前，锘海已服务国内多家知名药企并具备成功申报临床的案例。

我们拥有一支专业且经验丰富的研发、销售、技术和本地化服务的团队，团队中大多数人员为高学历专业硕博人才，致力于为生命科学领域的科研及企业客户提供个性化、专业化的产品、服务和整体解决方案，让生命科学更加简单、高效。

上海市经济和信息化委员会开展了2022年创新型中小企业评定工作，已于1月16日公示通过审核的企业名单，锘海生物科学仪器（上海）有限公司成功入选“2022年上海市松江区创新型中小企业”

什么是创新型中小企业

「上海市创新型中小企业」是根据《上海市优质中小企业梯度培育管理实施细则》（沪经信规范〔2022〕8号），经过严格的专家评审和综合评估后，符合认定标准并予以认定、公示的一项重要资质。

该榜单的入选标志着锘海进入优质中小企业培育库，展现出锘海具有较高专业化水平和较强创新能力和发展潜力，同时表明锘海主营业务和发展符合国家产业政策及相关要求。

此次入选上海市创新型中小企业，是政府与行业对锘海技术水平、研发能力、业务发展及综合实力等方面的认可和肯定。锘海也将紧跟科技和产业发展前沿，持续加大研发投入，加快技术突破，为行业发展提供源源不断的创新动能，一如既往的为用户提供更加专业、便利的产品和服务。

关于锘海

锘海生命科学成立于2017年，2020年获得国家高新技术企业资质。总部位于上海漕河泾开发区松江园区内，在北京，广州，成都，沈阳等十余座城市设有办事处。

作为“生命科学的服务者，医疗创新的推动者“，致力于打造完整的生命科学仪器研发、制造、服务体系。

我们积极推进科学技术转化，在大组织3D荧光成像中，处于光片显微镜行业的先进地位，自主研发的LS18平铺光片显微镜解决了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求。

此外，锘海还有纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从筛选到制剂表征全线过程，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，目前，锘海已服务国内多家知名药企并具备成功申报临床的案例。

2021年是不断进步、稳步发展的一年。感恩客户朋友们的鼎力支持，感谢锘海人的汗水与辛劳。

2022年是乘风破浪、不断超越的一年，我们整装出发一起开创更辉煌的未来！

1月18日，我们满怀着对未来的憧憬与期待迎来锘海生物科学仪器（上海）有限公司2021总结年会，公司全体员工欢聚一堂、喜迎新年！

年会上殷总对锘海在2021年整体情况做出总结回顾，并诚挚送出暖心祝福。之后，对十年如一日的优秀员工进行表彰颁奖。更有紧张刺激的抽奖活动，活泼又有趣的游戏过程令在座的领导和同事时而捧腹大笑，时而阵阵喝彩。整个年会精彩纷呈，充满欢声笑语！

回顾2021这一年，锘海有收获，有喜悦，也有不易！这次年会不仅仅是对过去2021年度总结，更是展望2022宏伟蓝图。在未来的征程中，锘海会继续努力奋斗，顽强拼搏，为客户提供匠心、高品质的产品和更专业、更用心的服务！坚持致力于为生命科学领域的科研及企业客户提供完善的一站式科研服务及整体解决方案。2022新的一年，我们一起虎虎生威！

锘海春节放假通知：  

农历春节将至，根据《国务院办公厅公布 2022 年放假安排》，春节期间放假时间，具体安排如下：

l 2022年1月29日（周六）——2022年2月6日（周日），放假9天。

l 2022年2月7日（周一）正式上班。

锘海生物提前恭祝各位福虎新年吉祥如意！阖家幸福！

德国慕尼黑理工大学和心血管研究ZX科学家，利用Wes全自动定量western blot技术，在Nature Medicine（IF: 30.641）发表文章：Somatic gene editing ameliorates skeletal and cardiac muscle failure in pig and human models of Duchenne muscular dystrophy, Nat Med. 2020 Feb;26(2):207-214.阐述其基于基因编辑技术开发杜氏肌营养不良基因ZL方法。

--研究背景--

杜氏肌营养不良（Duchenne muscular dystrophy, DMD）：是一种X染色体隐性遗传疾病，主要发生于男孩。据统计，平均每3500个新生男 婴中就有一人罹患此病。患者一般在3-5岁开始发病，Z早表现出进行性腿部肌无力(爬楼梯困难)，导致不便行走。12岁时失去行走能力，常年与轮椅为伴，20岁-30岁因呼吸衰竭而死亡。

抗肌萎缩蛋白（Dystrophin）：由X染色体短臂Xp21基因编码，分布于骨骼肌和心肌细胞膜的质膜面，起细胞支架作用，维持肌纤维完整性和抗牵拉功能。由于基因变异引起的Dystrophin缺乏是进行性肌营养不良的主要病因。

--研究内容--

编码抗肌萎缩蛋白（Dystrophin）的基因产生移码突变会导致杜氏肌营养不良（DMD），从而导致患者出现终末肌肉和心力衰竭。通过序列特异性核酸酶进行的体细胞基因编辑为恢复DMD阅读框提供了新的选择，表达缩短的但功能强的抗肌萎缩蛋白。本文在缺少DMD外显子52（DMDΔ52）的DMD猪模型以及相应的患者诱发的多能干细胞模型中验证了这种方法。在DMDΔ52猪中，肌内注射腺相关病毒载体（AAV9），该载体携带intein-split Cas9和一对靶向于外显子51（AAV9-Cas9-gE51）的导向RNA，诱导了缩短的抗肌萎缩蛋白（DMDΔ51-52）的表达，以及改善骨骼肌功能。此外，AAV9-Cas9-gE51的全身应用使抗肌萎缩蛋白(DMDΔ51–52)在肌肉（包括隔膜和心脏）中广泛表达，延长了存活时间并减少了心律失常的易感性。类似地，在缺乏DMDΔ52的患者的诱导性多能干细胞来源的成肌细胞和心肌细胞中，AAV6-Cas9-g51介导的外显子51的切除可恢复抗肌萎缩蛋白的表达并减轻骨骼肌肌管的形成，以及异常的心肌Ca²⁺处理和心律失常的易感性。在这些转化模型中，Cas9介导的外显子切除改善了DMD病理学的能力，为DMD患者的ZL方法提供了新方向。

57年前, TECNIPLAST泰尼百斯曾为实验动物业界提供diyi个塑料开放笼盒
25年前, TECNIPLASTE泰尼百斯曾向推出diyi款IVC
13年前, TECNIPLAST泰尼百斯为实验动物行业全面升级IVC
如今, TECNIPLAST泰尼百斯将重新定义实验动物饲养·实验模式,IVC的D时代已经来临
TECNIPLASTE泰尼百斯DVC(数字化独立通气笼)将多项先进的传感技术、科研分析平台与实验动物房管理软件平台进行有机结合。为实验动物的行为学、偏好学、肿瘤学、神经系统、代谢过程等学科项目提供真实可靠的大数据(24小时无间断数据监测搜集),与可视化统计图表输出。以供科研人员进行硏究分析,为科研论文提供坚实的数据基础。
2019年6月13日TECNIPLASTE泰尼百斯DVC(数字化独立通气笼)登上Nature杂志。


DVC-数字化独立通气笼盒
◆通过数字化技术，DVC给动物福利、设施运营及实验研究带来了标准化的提升。
◆笼盒内环境监测
◆动物行为、饲养环境监控
◆肿瘤、神经科学、偏好学研究
◆动物房运营管理
◆单位笼盒独立识别
◆人力资源调配与分级工作安排
 
DVC系统为动物实验室提供了创新型动物数据管理和分析系统，对传统的IVC独立通气笼进行了软件和硬件的升级改造。能够在不影响实验小鼠正常生活及实验室原有SOP的情况下，提升动物实验室的工作效率，研究数据的准确性。