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- tt1627com 2009-07-20 00:00:00
- http://www.xkb1.com/huaxue/index.html 新课标diyi网>初中化学课件试题
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- babymeehan 2009-07-21 00:00:00
- (1)固体药品:①用镊子或药匙取;②粉状用纸槽送;③块状滑向管底。 (2)液体药品:①瓶塞倒放;②标签对手心;③瓶口紧挨试管口。 二、称量 称量时把称量物放在左盘,砝码放在右盘。用托盘天平有两种方式,一种是先放称量物,后加砝码,这适于称取一种未知质量的物质;另一种是先放砝码,后加称量物,这适于称取一种一定质量的物质。采用后一种方式,当固体称量物只缺很少时,应一只手持药匙,用另一只手轻拍持药匙手的手腕,小心振动药匙,加足药量。 三、研磨 在实验中,有时取用的药品颗粒较大,不便于进行化学反应时,就需要使用研钵,用研磨的方法将大块的固体物质处理成为小块或细粉状物质。实验室中粉碎固体,大块坚硬的可以用铸铁臼和杵。一般物料和化学纯以上试剂只能使用瓷研钵(或玻璃研钵)和杵。在研磨时应注意以下几点:①易燃易爆物不能研磨。研磨两种物质时,一般应分别研磨。②应根据药品的多少选用大小不同的研钵。每次研磨时所装药品不能超过研钵容积的 1/3。 四、溶解 固体物质一般可在烧杯中溶解,实验中应根据需配制溶液的体积大小来选择烧杯,一般所选择的烧杯容积比所配溶液的体积大一倍左右为宜。 五、过滤 一贴,二低,三靠 过滤时应注意:滤纸的边缘应比漏斗稍低,并紧贴漏斗内壁,用蒸馏水润湿,中间不要有气泡;将过滤器放好并调整高度,使下端的管口靠紧烧杯内壁,使滤液沿烧杯壁流下顺倒时,使液体沿着玻璃棒流下,液面要低于滤纸的边缘。如果滤液仍然浑浊,应该把滤液再过滤一次,直到滤液澄清。 六、蒸发 蒸发时应注意:加入蒸发皿的液体不应超过蒸发皿容器的2/3;在加热过程中,用玻璃棒不断搅动,防止由于局部温度过高,造成液滴飞溅;接近蒸干前(即蒸发皿中出现较多量的固体时)应停止加热,利用余热把溶剂蒸发完;取下未冷却的蒸发皿时应把它放在石棉网上,而不能直接放在实验台上。 七、仪器装配与拆卸 装配仪器时遵循先下后上,先左后右的原则。拆卸时正好相反。此外还要考虑一些特殊情况:如制O2时先拆导管后拆灯(防止倒吸);用H2还原CuO时,先拆灯后停止通H2(防止Cu又被氧化)等。 八、气密性的检查 把连接仪器末端的导管插入水中,双手紧握始端仪器,如烧瓶、试管外壁,如不漏气,末端导管口应有气泡冒出;若夏天,或中间连接仪器过多,可在始端稍加热。然后移开双手(或热源),仪器冷却后,导管口处应上升一段水柱。如有多个出气口的复杂装置,检查气密性时,应用水封住其他出口,只留一个出气口,如上所述步骤进行检验。 九、给试营里的固体加热 铁夹应夹持在离试管口大约1/3处,管口略向下倾斜,先进行预热,然后再把灯焰固定在放药品的部位加热。 十、气体的制备和收集 (l)装固体的试管口要略向下倾斜,防止生成水或湿存水流至试管底致使试管破裂;(2)先均匀加热,后固定在放药品处加热;(3)用排水法收集,停止加热前,应先把导气管撤离水面,才能熄灭酒精灯,防止水槽中的水倒吸入试管里,使试管破裂。 十一、洗涤仪器 (1)实验室洗涤仪器的一般程序是:①用去污粉或洗涤剂擦洗;②用自来水冲洗;③用蒸馏水润洗2~3次,即称“一擦二冲三润”。 (2)当玻璃器皿沾有难溶物时,一般先选用某种试剂使其溶解,然后再用水洗。 (3)玻璃仪器洗净的标志是用水洗后器壁上附着的水均匀,既不聚成滴也不成股流下。 十二、容量瓶的使用 (1)构造:细颈、梨形的平底玻璃瓶,瓶口配有磨口玻璃塞或塑料塞,瓶上标有温度(20℃)、容量和刻度线。 (2)用途:用于准确配制一定物质的量浓度的溶液。 (3)注意事项: ①使用前首先要检查是否完好,瓶口处是否漏水。 ②不能作反应器,不可加热,瓶塞不可互换,不宜存放溶液。 ③配制溶液时,必须要等溶液的温度恢复到室温后再将溶液转移到容量瓶中,因为玻璃的膨胀系数会随温度的改变而发生变化。在容量瓶上一般标有使用温度,如果待配制的溶液的温度过高或过低,都会影响所配制溶液的准确浓度。 ④容量瓶不能先用试剂润洗,而滴定管要先用试剂润洗2遍。如果滴定管不用试剂润洗而其中又有少量蒸馏水,当加入试剂后,会使试剂的浓度变小。容量瓶若用试剂润洗,会在容量瓶中存有少量试剂,使配制的溶液的浓度变大。 十三、制取氧化铜 (1) 实验步骤: (2) 实验原理 CuSO4+2NaOH= Cu(OH)2↓+ Na2SO4;Cu(OH)2= CuO+H2O 十四、制取氧气 (1)实验步骤:①检查气密性;②装入药品;③加热,收集;④先撤出导气管,再停止加热;⑤检验。 (2)实验探索:MnO2可作为KClO3分解制氧的催化剂,通过探索,CuO、Fe2O3等也能作为该实验的催化剂,这说明同一反应可能选用不同的物质作催化剂。其差异只是表现在催化作用的效果上。 自 我 测 试 1.如何称取5克胆矾? 答: 用托盘天平有两种方式:一种是先放称量物,后加砝码或拨动游码,这适于称取一种未知质量的物质;另一种是先放砝码或拨动游码,后加称量物,这适于称取一种一定质量的物质。称取5克胆矾应采用后一种方式。当固体称量物只缺很少时,应一只手持药匙,用另一只手轻拍持药匙的手腕,小心振动药匙,加足药量。 2.简述用KClO3制取并收集、验证氧气的实验步骤。 答:⑴装配实验装置,检查装置的气密性; ⑵称取一定质量的KClO3,与少量MnO2粉末混合均匀后装入大试管中,用带有导管的单孔橡胶塞塞紧管口; ⑶加热,用排水法收集一试管氧气; ⑷先撤出导气管,再停止加热; ⑸用带火星的木条伸入试管中检验收集的氧气。 3.通过探索CuO作KClO3分解制O2反应的催化剂的实验,你能得到什么启迪? 答:这说明同一反应可以选用不同的物质作催化剂,其差异只是表现在催化作用的效果上。 4.在使用容量瓶配制溶液时,为什么必须要等溶液温度恢复到室温后,再将溶液转移到容量瓶中? 答: 根据“热胀冷缩”原理,热溶液体积偏大,则所加水偏少,导致所配溶液浓度偏高。 5瓶配制溶液时,为什么要洗涤烧杯多次?洗涤液应如何处理
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- ELISA实验要点:降低ELISA背景的四大要素
ELISA实验要点:降低ELISA背景的四大要素
在ELISA试剂盒操作中,我们都认为ELISA实验的原理似乎很简单,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,间中夹杂着洗涤和封闭。然而,即使是平淡无奇的洗涤和封闭,如果做得不太好,也有可能毁了整个实验。在实验结束时,我们是否能获得有意义的信息,这在很大程度上取决于结果的信噪比。背景噪音会影响您对结果的判断。如何降低ELISA的背景,本生技术小编详解。
一、洗涤很重要
洗涤步骤看似很无聊,其实很重要,因为如果未结合的材料(如非特异结合的抗体或检测试剂)残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。如有必要,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,而您怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。
二、封闭更关键
封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高,怀疑封闭不充分,那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液,或适当延长封闭时间。
如果您一直被背景问题所困扰,那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间,但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定,在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用,因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度(正常浓度为0.01-0.1%),它会降低特异结合,产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液,后者可协助洗涤过程中的封闭。
蛋白封闭液则有所不同。它们与开放位点结合并封闭,同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白(BSA)、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过,它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。
三、抗体浓度须优化
我们通常会follow师兄师姐留下来的操作步骤,但是如果试剂稍有不同,则可能需要优化抗体的量。记住,非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点,切勿使用过多的一抗或二抗。
四、检测试剂要适量
另一点也很显而易见:切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高,或者未正确稀释,则会导致高背景。也不要显色过度,如有必要,优化一下何时应加入终止液。
如果您的ELISA试剂盒操作中不幸地遇到了高背景,那么也无需太担心,依次查看ELISA系统中的组分,并排除可能存在的问题。悉心优化,相信很快就会有漂亮的结果。
ELISA试剂盒本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。
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