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- 幯棏葰 2011-04-05 00:00:00
- 1、50ul外周抗凝血+荧光抗体,室温避光孵育15分钟; 2、加500ul红细胞溶解素,室温避光孵育10分钟; 3、1500rpm5分钟,弃上清,加1ml PBS洗细胞 4、1500rpm5分钟,弃上清,加300ul 0.5%多聚甲醛的PBS重悬细胞,ok
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金相制样的目的是显示样品的真实组织。样品可以是金属、陶瓷、烧结碳化物或者其他固态材料。金相制样是指在试样尺寸较小或者形状不规则导致研磨抛光苦难而进行的镶嵌或夹持来使试样抛磨方便,提高工作效率及实验的准确性的工艺方法。金相制样一般分为冷镶和热镶。
金相制样的制备方法:
金相制样要经过以下几个步骤:取样、镶嵌、磨光(粗磨和细磨)和抛光。每项操作都必须细心精确,任何阶段的失误都可能影响后面的操作步骤,在甚至不正确的制作可能造成假组织,从而得出错误的结论,因而金相制样设备的好与坏,尤其金相制样质量是决定抛光工序成败的关键。抛光是将制样上磨制产生的磨痕及变形层去掉,使其成为光滑镜面的工序。
1)取样
金相制样式样的选取应根据研究的目的,取其具有代表性的部位。待确定好部位,就可以把式样截下,式样的尺寸通常采用直径12~15mm,高12~15mm的圆柱体或边长12~15mm的方形式样。取样方法可用手锯、锯床切割或锤击等方法。
2)镶嵌
如式样尺寸太小,直接用手来磨制困难时,可把式样镶嵌在低熔点合金或塑料中,以便于式样的磨制和抛光。
3)磨制
切好或镶好的式样在砂轮机上磨平,尖角要倒圆。然后用2﹟、1?﹟和1﹟等粗砂布磨光,再换400.600.800.1000.1200.1500.2000.2500.3000等金相砂纸逐级细磨,一直磨到W10砂纸方可进行粗抛光和细抛光。磨制式样时,每换一次磨制步骤(即每换一号砂纸)时,式样磨制方向应转90°。这样才能看出上次磨痕是否磨去。式样在每一号砂布(纸)上磨制时,要沿一个方向磨,金相制样切忌来回磨削,而且给式样施加的压力要适当。
4)抛光
细磨的式样还需进行抛光。抛光的目的是去除细磨时遗留下来的细微磨痕而获得光亮的镜面。式样的抛光是在专用的抛光机上进行的,转速一般100~150r/min。抛光时在抛光盘盘面上铺有丝绒等织物,并不断滴注抛光液。抛光液是由àl2O3、Cr2O3或MgO等极细粒度的磨料加水而形成的悬浮液,依靠抛光液中极细的抛光粉末与式样磨面间产生的相对磨削和滚压作用来消除磨痕。抛光时应使式样磨面均匀地压在旋转的抛光盘上,并沿盘的边缘到ZX不断作径向往复运动。除机械抛光方法外,还有电解抛光、化学抛光等其他抛光方法。
5)浸蚀
经抛光后的式样还必须经过浸蚀后才能在显微镜下进行观察。浸蚀主要是依靠浸蚀剂对金属的溶解或电化学腐蚀过程,使金属式样表面的晶粒与晶界及各组成相之间呈现轻微的凹凸不平,在显微镜下就可以清楚地观察到式样表面,浸蚀时间要适当,一般式样磨面发暗时就可停止。如果浸蚀不足重复浸蚀。浸蚀完毕后立即用清水冲洗,然后用酒精冲洗,用吹风机吹干,金相制样完成即可置于金相显微镜上进行观察。
(来源:上海西努光学科技有限公司)
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