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共聚焦显微镜

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共聚焦显微镜的选购指南

类型:操作使用 2018-11-30 16:25:09 10586阅读次数

  共聚焦显微镜是上世纪80年代发展起来的高科技产品。它通过在荧光显微镜上加装激光扫描及共轭装置,用紫外或可见光激发荧光探针,并利用计算机进行图像处理,从而得到细胞或组织内部微细结构。共聚焦显微镜是细胞生物学、生物化学、药理学、生理学、遗传学、胚胎学、神经生物学、微生物学和寄生虫学等多学科强有力的研究工具。

共聚焦显微镜的常见品牌

  1、尼康

  尼康的共聚焦显微镜系统的激光共聚焦部份叫Clsi,光学部份用TE2000系列显微镜,由于其共聚焦显微镜进入ZG较迟,同前的市场占有率较低。特点是:采用32个光电倍增管的光谱检测器,可全部或部分同时工作;光栅效率增强技术,使接收信号强度提高;双积分器信号处理技术,信号采集时损失少。

  2、奥林巴斯

  奥林巴斯的共聚焦显微镜是FVl000系列。特点是:应用同步双扫系统-SIMScanner,当一束激光对样品进行刺激的同时,另一束激光同时采集到高分辨率的成像,实现光刺激和观察同步进行。应用GX离子沉积镀膜技术的滤光片,增加了系统的灵敏度,使共聚焦显微镜能够观察极弱的激光所激发出的荧光,从而把对活细胞的损伤减至Z小。


  3、徕卡

  徕卡共聚焦显微镜为TCS-SP5型。特点是:内置5组Leicadu家ZL可程序调控分光光谱检测系统,每一组的光谱范围广达400-850nm间(波长分辨率2nm)。因为,光通过滤镜的数目减少,其光学穿透有效率更高,影像更为鲜明,解析更高。棱镜分光的ZL设计保证了高信噪比的优势,光程Z短,中间滤片不再需要,光能透过率达88%,棱镜的光能损失只有3%,总光能损失只有10%。非常好的光传导性可以检测到更微弱的荧光,避免了其他公司为提高灵敏度而加大激光激发强度进而导致样本的荧光淬灭。

  4、蔡司

  蔡司在共聚焦显微镜方面有一系列的产品:

  LSM 510 META DuoScan型是通用型共聚焦显微镜,其特点是:采用X和Y轴独立的双镜,进行完全线性的扫描,可定义多至99个任意大小和任意形状区域,区域精确到一个像素;每个荧光通道均有其独立可调的针孔,在多重标记检测过程中,特别是在一些三维扫描时,保证每个通道扫描光切平面和光切厚度的一致性;高度自动化的“FIND”自动预扫描功能,避免了频繁重新设置扫描参数,减少了样品不必要的激光照射时间而无谓淬灭。

  LSM 5 LIVE DuoScan型是高速共聚焦显微镜,被称为世界上Z快的共聚焦显微镜,只需10s就能截取1000张分辨率为512×512像素的图像。扫描速度:Z快可达120幅/s(512×512像素,12位,双通道)及1010幅/s(512×50像素,12位,双通道),线扫描速度60000线/s。

  LSM 710系列,提出PTC激光概念,激光通过光纤接至扫描头,配置灵活、免维护,同时确保了观察的精确性和可重复性。

共聚焦显微镜的选型评估步骤

  对共聚焦显微镜进行具体选型评估的步骤如下:

  1、举行产品说明会

  共聚焦显微镜技术复杂,科技含量高,不同公司的产品在技术细节、操作方法、成像方式等方面是有很大差异的,本着“优中选优”的原则,召集多家公司的产品应用专家,进行1-2次产品说明会是非常重要的。在说明会上,供方可通过讲座介绍自己的产品,需方可对自己感兴趣的焦点提出针对性的问题,通过互动方式来进行答疑解惑,达到“货比三家”的目的。

  2、外出参观,现场操作,获取更多一手信息

  目前,我国引进的共聚焦显微镜约有二百多台,各种品牌、各种型号均有在ZG落户,它们大部分分布在国内的科研院校中。而国内许多科研院校的实验室是对外开放的,对于共聚焦显微镜,只要支付几百元的费用就可租用1-2h。因此,可积极走出去,制作统一的标本,分别到不同品牌的共聚焦显微镜上进行测试,获取更多一手信息,为今后商务谈判或招标技术参数的确定打下坚实的基础。

徕卡共聚焦显微镜 STELLARIS DLS

  3、选择适合自己的产品

  共聚焦显微镜的选型主要应从两个方面进行考虑:

  ①根据学科研究的需要来进行选型评估:

  共聚焦显微镜各种选配件非常多,而且针对不同的研究方向,一些厂家还配有特定的软件。由于各类选配件及软件都是要另外付费,且价格不菲,因此在选型时应格外严谨。比如:研究的主方向是“药物对活细胞的作用及动力学”,则选型时除考虑共聚焦显微镜要有较高的“线扫描速度”外,还要考虑增配微型CO2培养系统。此外,选型时还应根据研究的方向,考虑空间复消色差水平的要求、温度稳定性的要求、光谱分辨率的要求等多个方面。

  ②根据经济能力,即科研资金的多少来考虑:

  共聚焦显微镜不同牌品、不同型号之间的价格相差悬殊。即便是同牌品、同型号的仪器,价格也会因选配件的不同而有极大的不同。


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