基因导入仪基因枪法原理和作用
基因枪法又称为微弹技术或者粒子轰击细胞法。
定义
1987年,使用该技术在钨粒表面附着MV(烟草花叶病毒)RNA,对洋葱表皮细胞进行轰击。通过检测发现,能够复制病毒RNA,并且使用该技术往洋葱表皮细胞中导入CAT基因由Vlein首先报道。如今,在番木瓜、甜橙、葡萄、、棉花、大豆、菜豆、小麦、黑麦草、甘蔗、烟草、水稻上应用该技术获得成功。
原理
基因枪技术又叫做微粒轰击技术或者生物弹道技术,是通过高压气体加速或者huo药爆炸直接往完整的组织或者细胞中送入包裹了DNA的球状金粉或者钨粉颗粒的一种技术。其为基因转移技术中的一种方法。
对微粒加速装置进行使用,从而使得裹着外源基因的微米级的金或钨(它们比重大, 而且化学性质都很稳定)颗粒获得足够的动量,往靶细胞或组织打入,是该技术的基本原理。
作用
通过压缩气体(氦或氮等) 动力使一种冷的气体冲击波产生,进入到轰击室(所以使细胞因为“热”气体冲击波导致损伤的情况得以避免),向着细胞打入粘有DNA 的细微金粉,将细胞壁、细胞膜、细胞质等穿过到达细胞核,使基因转移完成,此即是基因枪的作用。
大多数细胞会由于没有合适的力道而遭受失败,仅会有很少的细胞达到要求,然而基因转移操作这很少的细胞就可以完成。有较大的密度,容易穿孔;有较小的口活性,对细胞有较小的危害是利用氦气、金粉的主要原因。
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