对水中细菌菌落总数进行检验时怎么采水样?
细菌菌落总数(CFU)是指1 mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中,于37 ℃培养24 h后所生长的腐生性细菌菌落总数。它是有机物污染程度的指标,也是卫生指标。在饮用水中所测得的细菌菌落总数除说明水被生活废物污染的程度外,还指示该饮用水能否饮用。但水源水中的细菌菌落总数不能说明污染的来源。因此,结合大肠菌群数以判断水的污染源的安全程度就更全面。那么对细菌菌落总数检验时怎么采集水样呢?就让小编带你了解一下吧。
水样采集保存
采集水样的器具必须事前灭菌。
河湖、井水、海水的采集要用特制的采样器,采样器是一金属框,内装玻璃瓶,其底部装有重沉坠,可按需要坠入一定深度。瓶盖上系有绳索,拉起绳索,即可打开瓶盖,松开绳索瓶盖即自行塞好瓶口。水样采集后,将水样瓶取出,若是测定好氧微生物,应立即改换无菌棉花塞。
自来水水样的采集先冲洗水龙头,用酒精灯灼烧水龙头,放水5~10 min,在酒精灯旁打开水样瓶盖(或棉花塞),取所需的水量后盖上瓶盖(或棉塞),迅速送回实验室。经氯处理的水中含余氯,会减少水中细菌的数目,采样瓶在灭菌前加入硫代硫酸钠,以便取样时消除氯的作用。硫代硫酸钠的用量视采样瓶的大小而定。若是500 mL的采样瓶,加入1.5%的硫代硫酸钠溶液1.5 mL(可消除余氯量为2 mg/L的450 mL水样中全部氯量)。
水样的处置水样采取后,迅速送回实验室立即检验,若来不及检验放在4℃冰箱内保存。若缺乏低温保存条件,应在报告中注明水样采集与检验相隔的时间。较清洁的水可在12 h以内检验,污水要在6 h内结束检验。
检验方法
地表水
稀释水样在无菌操作条件下,以10倍稀释法稀释水样,视水体污染程度定稀释倍数。取在平板上能长出30~300个菌落的该种水样的稀释倍数。
接种用无菌移液管吸取三个适宜浓度的稀释液1 mL(或0.5 mL)加入无菌培养皿内,再倒培养基,冷凝后倒置37 ℃恒温箱中培养。
计菌落数将培养24 h的平板取出计菌落数。
自来水
以无菌操作方法,用无菌移液管吸取1 mL充分混匀的水样注入无菌培养皿中,倾注入已融化并冷却至50 ℃左右的营养琼脂培养基,平放于桌上迅速旋摇培养皿,使水样与培养基充分混匀,冷凝后成平板。每个水样倒三个平板。另取一个无菌培养皿倒入培养基冷凝成平板作空白对照。将以上所有平板倒置于37 ℃恒温箱内培养24 h,计菌落数。算出三个平板上长的菌落总数的平均值即为1 mL水样中的细菌总数。
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