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影响elisa试剂盒测定成果的原因和解决办法

来源:本生(天津)健康科技有限公司      分类:商机 2022-02-21 09:33:35 398阅读次数

影响elisa试剂盒测定成果的原因和解决办法

ELISA试剂盒方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定,具有灵敏度高,操作简略等优点,但是在详细实验过程中影响要素较多,而且要按照严厉的阐明要求,在临床检验中除正常反响外,有时常可见到些错误成果(即假阳性或假阴性成果)。

影响ELISA测定错误成果的原因主要有:

①标本要素;

②试剂要素;

③操作要素。

、类风湿因子

人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)能够与ELISA系统中的捕获抗体及酶符号二抗的FC段直接结合,然后导致假阳性。

解决办法:

1.用F(ab)2替代完好的IgG;

2.标本用联有热变性(63℃,10 min)IgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有用);

3.检测抗原时,能够用2-巯基yi醇等加入到标本稀释液中,使RF降解。

二、补体

ELISA系统中固相抗和符号二抗过程中,抗体分子发作变构,其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来,使C1q 能够将二者连接起来,然后形成假阳性。

解决办法:

1.用EDTA稀释标本;

2.用53℃,10 min或56℃,30 min加热血清使C1q灭活。

三、嗜异性抗体

人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig(s) 结合的天然嗜异性抗体,可将ELISA系统中抗和二抗连接起来,也能形成假阳性。

解决办法:

可在标本稀释液中加入过量的动物Ig(s),但加入量不足或亚类不同时无效。

四、嗜靶抗原的本身抗体

抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的本身抗体,有时能与靶抗原结合形成复合物,在ELISA方法中均可干扰抗原抗体测定成果。

解决办法:

测定需用理化方法将其解离后再测定

影响ELISA试剂盒测定成果的原因和解决办法! 先和大家介绍到这,如果想要了解更多ELISA试剂盒信息,可以关注天津本生生物,业给生物医药客户提供生物实验室检测耗材,欢迎广大客户来询。

标签:试剂盒

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最近更新:2024-09-14 09:20:03
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