应用分享︱使用尺寸排阻色谱柱TSKgel G6000PWXL-CP分离mRNA-LNP
2018年,全 球第 一款采用脂质纳米粒 (LNP) 递送siRNA的核酸药物获批。最近,由于新的脂质成分及生产方法的研发,开发了针对SARS-CoV-2冠状病毒的LNP递送的mRNA疫苗。该LNP的模式图、示意图如下。
图1 双层脂质体(左)和单层脂质体(右)
文献介绍
近期,在 J. Chromatogr. B 期刊上发表的一篇研究文献中,作者等人认为LNP的大小和mRNA含量 (payload) 对于了解药效和副作用是非常重要的。因此采用了尺寸排阻色谱,并在UV检测器、RI检测器以及MALS检测器上直接连接了动态光散射 (DLS) 检测器,在线进行LNP的粒径分析。
文献链接:https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2021.123015
递送mRNA的LNP是表面带正电荷的阳离子LNP,采用了适合分离阳离子大分子的SEC色谱柱TSKgel G6000PWXL-CP,有效分离出半径30~70 nm的各种LNP。另外,还可以看出,SEC的在线分析结果与离线分析结果非常吻合,并且mRNA含量受到LNP的PEG修饰脂质含量的影响。
图2. 采用G6000PWXL-CP色谱柱分离4个mRNA-LNP
LNP分析用SEC色谱柱的选择
阳离子LNP的分离
阳离子LNP的SEC分离与阳离子聚合物的分离基本相同。对于直径在60~140 nm的LNP,推荐使用TSKgel G6000PWXL-CP;直径在20~100 nm的LNP,推荐使用TSKgel G5000PWXL-CP。
非阳离子(中性或阴离子)LNP、脂质体
LNP与脂质体基本相同,但脂质体是中性脂质成分的粒子,可以用普通PWXL系列色谱柱分析。对于直径在60~140 nm的非阳离子LNP,推荐使用TSKgel G6000PWXL或TSKgel G-DNA-PW;直径在20~100 nm的LNP,推荐使用TSKgel G5000PWXL。
LNP分析用色谱柱产品信息
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