TSKgel PW系列聚合物基质尺寸排阻色谱柱的清洗方法
高效液相色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,出现柱效下降或伴有峰形拖尾、分叉等情况。需要定期进行清洗和再生,以保证色谱柱的柱效和使用寿命。
本篇介绍的是TSKgel亲水性聚甲基丙烯酸酯树脂分子尺寸排阻色谱柱的清洗方法及注意事项。
TSKgel PW、PWXL系列、SuperMultiporePW系列以及SuperOligoPW系列产品都是用于高分子分子量测定的亲水性聚甲基丙烯酸酯树脂SEC色谱柱。此类型色谱柱中的充填介质与样品间常会发生:(1) 离子相互作用;(2) 疏水相互作用等现象。
吸附的主要原因
离子性吸附:
分子尺寸排阻色谱柱中的树脂充填介质,由于羧基带有负电荷(尽管非常少),会与样品中带有正电荷的组分发生离子吸附作用。
疏水性吸附:
聚合物基质的SEC色谱柱的充填介质,会与一些疏水性较高的样品(如:具有苯环的化合物)发生疏水吸附作用。
清洗方法
1、去除离子性杂质:
对于阳离子性吸附物质,可以通过提高盐浓度进行过柱清洗。
2、去除疏水性杂质:
对于疏水性吸附物质,可以通过提高有机溶剂的浓度进行过柱清洗。
3、去除难溶性蛋白质:
使用含尿素的溶液清洗。
请根据样品性质,从方法1和2中选择适当的清洗方法。如果色谱柱性能仍不能恢复,可考虑采用方法3。但需注意尿素可能会残留在色谱柱上。
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