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“沃”的专家团

这是一档来自瑞沃德解决方案专家团队的分享栏目，瑞沃德解决方案专家团队人员规模超50，其成员均为知名高校生物医学相关专业的硕博研究生，可为客户提供垂直细分领域的实验方案、解决日常产品应用难点，全力帮助客户取得成功。

脂肪组织冷冻切片，是临床和科研上避不开的一类常见组织切片。
临床上周边带脂肪比较多的组织主要有淋巴结、乳腺癌小肿块等；科研上主要是一些皮肤组织像腹部皮肤，颈部皮肤等。接下来就跟大家交流一下脂肪组织切片的相关细节和注意事项。

组织前处理

临床上没有太多的时间处理带脂肪多的组织，简单的操作就是取材完，把组织放置于吸水纸上，轻轻按压，尽量挤出脂滴后，再用包埋剂包埋，然后放置在冷冻切片机箱体里冷冻。科研上因为时间比较充裕，可以有更多时间剔除掉周边脂肪组织，提高切片质量。

速 冻

1.样本托提前预冷
在我们自己和客户的实际切片操作中发现，放置于室温包埋好的组织再放到速冻台上制冷，因为托本身前后温差大，就会产生水汽，造成结霜结晶，影响切片质量，所以第 一步就是样本托提前放置在箱体预冷，当然是要干燥的样本托。

2.取材

取材尽量不要太厚，厚度在2-3mm为宜，因为厚度太小可能取材难度较大，取材不完整，厚度太大冷冻慢，当然能满足需求的前提下，取得薄效果更好，大小在1-2cm为宜。

3.包埋
样本托尺寸可以选择大一些的，方便组织摊开，提高冷冻效率。包埋剂不宜过多，一是包埋剂过多，冻得比较慢，另外包埋剂预冷容易卷曲，给后期展片加大了难度。

必要时为了加快冷冻，可以使用冷锤轻压在组织表面辅助冷冻（注意轻压时机，不宜过早，容易粘住）。

切 片

在切片之前，要调节好冷冻切片机切片温度，根据经验和反馈，双制冷机器（同时拥有箱体制冷和样本头制冷）的切片效果要比单制冷机器（只有箱体制冷）好。

因为带脂肪组织切片温度需求较低，甚至低于单制冷机器箱体能设置的Z 低温度的下限，所以这时候就需要其他的制冷方式来辅助。可以用液氮制冷，但成本较高；也可以采用双制冷机器，一般样本头温度可设置范围为-10℃~-50℃。保证脂肪组织切片效率。

固 定

我们经常在镜下看到片子的着色不深或者细胞退变等现象，主要原因就是固定不及时，这个跟个人习惯有比较大的关系，为了初步判定切片的效果，习惯性的贴好片后会等下看一下片子情况，就是这极短的时间导致组织在干燥的空气中出现细胞退变，尤其是高温环境，影响更深，这就要求我们及时切片，及时把片子放入固定液中固定。

但这也对技术人员和冷冻切片机提出了更高的要求，那就人员要求更加专业，机器要求制冷和温控性能要更好。

经验复盘

怎样做好脂肪组织切片，所涉及的因素很多，有主观的，有客观的，我们站在前人的肩膀上，所做的就是要提升，要优化，所以经验复盘很重要。永远都是只有更好，没有Z 好，切片也是一样，行业标准在提高，技术人员也要时刻提升自己。

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