小鼠ELISA试剂盒样本取血操作步骤及注意事项
小鼠ELISA试剂盒样本取血操作步骤及注意事项
大鼠、小鼠ELISA试剂盒检测中,经常有客户采用鼠类的血清,血浆做检测样本,但是收集样本复杂,BUNSEN本生技术小编就根据大鼠,小鼠ELISA试剂盒样本取血及注意事项。
以小鼠为例:
1 剪尾采血 小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml
左手拇指和食指从背部抓住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,鼠保定后将其尾巴置于50℃热水中浸泡数分钟,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用试管接流出的血液,同时自尾根部向尾尖anmo。取血后用棉球压迫止血并用6%液体火棉胶涂在伤口处止血。
2 摘除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml 左手抓住小鼠颈部皮肤,轻压在实验台上,取侧卧位,左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压,使眼球突出。用眼科弯镊迅速夹去眼球,将鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完毕立即用纱布压迫止血。大鼠少用。
3 心脏采血
小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml 鼠仰卧位固定,剪去胸区被毛,皮肤消毒后,用左手食指在左侧第3-4肋间触摸到心搏处,右手持带有4-5号针头的注射器,选择心搏zui强处穿刺,当刺中心脏时,血液会自动进入注射器。
4 断头采血
小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml 左手拇指和食指从背部抓住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,右手用剪刀剪断鼠颈部约1/2-4/5,让血液流入试管。
5 眼眶静脉丛采血小鼠采血量为0.2-0.4ml,大鼠采血量为0.4-0.8ml 取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管,临用折断成1~1.5cm长的毛细管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。取血时左手抓住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部,轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血,右手持毛细管由内眦部插入结膜,再轻轻向眼底部方向推进,轻轻旋转毛细管以划破静脉丛,让血液顺毛细管流出,接收入事先准备的容器中。采血后纱布轻压眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采取此法取血。刺入深度小鼠为2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠为4-5mm,可采血0.4-0.8ml。
(以上采血均需注意,防止毛絮进入血液导致溶血等,另外就是防止剧烈的晃动,一般采集后须静置,并离心收集血清(或血浆);分离之不可冷冻。分离之后的血清(浆)可视情况进行冻存处理。)
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