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利用流式衰老抗体染色特定组织细胞，随后根据发射光的荧光强度和波长将不同类型衰老细胞分选出来，进一步研究衰老细胞理化性质。

应用原理

• 流式细胞术分选衰老细胞的原理

衰老相关-β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）在正常人体细胞主要表达在溶酶体，*适 pH 是 4~4.5；而在衰老细胞中，SA-β-gal 不仅大量积累，*适 pH 还偏移至 6，因此人为给予 β-gal 作用底物 X-gal 和 pH 6 的环境，衰老细胞可以在 β-gal 的作用下，将底物转变为深蓝色，利用荧光标记的 β-半乳糖苷酶底物即可利用流式将衰老细胞分选出来。

• 衰老细胞的特征

DNA不稳定、端粒损耗、表观遗传改变、蛋白质稳态丧失、营养感应失调、线粒体功能障碍、细胞衰老、干细胞耗竭和细胞间通讯改变。

使用流式细胞术分选衰老细胞分选的特点

1、只要样本制备成单个细胞或生物颗粒悬液均可以分析。

2、测量速度快，每秒中可以测量数千个乃至数万个细胞。

3、同时测量每个细胞的多参数特征。

4、在进行细胞特征分析的同时可以把指定特征的细胞分离出来，以便对特定细胞做进一步培养、克隆化、观察或进行某些实验，这就是分选技术。

流式细胞术分选衰老细胞的步骤

1、首先，制备单细胞悬液，经过特异性荧光染料标记抗体进行染色，在恒定气体的压力下进入检测区域。

2、其次，流式细胞仪的激光激发细胞或微粒上的荧光染料，使其产生荧光。之后收集单细胞上的荧光信号。

3、统计收集到荧光信号情况（所测细胞膜表面抗原强度或细胞内物质的浓度会导致荧光强度出现变化）。

4、根据所测定的各个参数将指定的细胞从细胞群体中分离出来。