特色方案｜UHPLC法分析带保护基团的亚磷酰胺单体
特色方案
UHPLC法分析带保护基团
的亚磷酰胺单体
Shim-pack Scepter HD-C18
摘要
本文建立了带保护基团的亚磷酰胺单体N-苯甲酰基-5'-O-(4,4-二甲氧基三苯甲基)-2'-O-甲基腺苷-3'-(2-氰基乙基-N,N-二异丙基)的UHPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack Scepter HD-C18分析此亚磷酰胺单体，结果显示，此亚磷酰胺单体的两个手性同分异构体色谱峰峰型良好，且2个化合物分离度大于1.5，满足分析要求。此方法可为带保护基的亚磷酰胺单体检测提供参考。
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-40BX3 高效液相色谱仪；
色谱柱：ShimNex UP C18
（1.8μm，2.1×100mm；
P/N：380-01231-02）；
Shim-packScepterHD-C18
（1.9μm，2.1×100mm；
P/N：227-31026-05）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1
（+ 60L水箱+取水器）
SHIMSENDisc HPTFE针式过滤器
（P/N：380-00341）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial
(P/N：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet移液枪：
SHIMSEN Pipet PMII-10
（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100
（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000
（P/N：380-00751-06）。
2. 分析条件及实验结果
2.1、分析条件
色谱柱：
Shim-pack Scepter HD-C18
（1.9μm，2.1×100mm；
P/N：227-31026-05）
柱温：20℃
检测波长：235nm
流速：0.3mL/min
进样量：1µL
流动相：
A：10mM乙酸铵（用氨水调节pH为9.0）：乙腈=50：50
B：10mM乙酸铵（用氨水调节pH为9.0）：乙腈=5：95
A：B=70：30
2.2、实验结果
按照上述色谱条件进行采集，对照品溶液如下：
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