应用方案┃分光光度法测铁离子含量
01
第一部分:引言
一、分光光度法测定物质含量时应注意的事项:
1、是显色反应的条件
2、是测量吸光度的条件。显色反应的条件有：显色剂的用量 、显色时间、干扰物质的消除方法、介质的酸度、显色时溶液的温度等。测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液等。
紫外分光光度计法测定微量铁的显色剂可以选择邻二氮菲(phen)在pH=2～9的条件下，Fe2+离子与邻二氮菲生成稳定的橘红色络合物，反应如下：
此络合物lgK稳=21.3，摩尔吸光系数。
显色前，要用盐酸羟胺把Fe3+离子还原为Fe2+离子：
测定时应控制溶液酸度在pH=5左右为宜，酸度太高，反应进行较慢，酸度太低，Fe2+离子水解，影响显色。
02
仪器：UV-1500PC（上海有限公司）
试剂 ：1、100铁标准溶液
2. 10铁标准溶液由100稀释制得
3.盐酸羟胺10%溶液
4.邻二氮菲溶液0.15%
5.NaAc溶液1mol/L
03
1、测量波长的选择
在50ml容量瓶中按次序准确加入以下溶液，10铁标准溶液5ml，10%盐酸羟胺1ml，摇匀，再加入1mol/LNaAc溶液5ml，0.15%邻二氮菲3ml。用水稀释至刻度。在分光光度计上，用1cm比色皿以水为参比溶液，测定其在440～580nm之间的吸光度。并绘制图，从曲线上找出大吸收的波长。
2、显色剂用量的选择
取7个50ml容量瓶，各加入1ml10铁标准溶液，1ml盐酸羟胺，摇匀。再分别加入0.10、0.30、0.50、0.80、1.0、2.0、4.0ml邻二氮菲和5mlNaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀，放置10min。以水为参比溶液，在选择的波长下测定各溶液的吸光度。并绘制,从曲线上找出显色及的适宜用量V。
3、显色时间的选择
在1个50ml容量瓶中，加入1ml10铁标准溶液，1ml盐酸羟胺，再加入由上述选择的适宜邻二氮菲Vml，5mlNaAc，以水稀释至刻度，摇匀。立刻用比色皿以水为参比在选择的波长下测量吸光度。然后依次测定放置5、10、30、60min后的吸光度。绘制图，选出与邻二氮菲显色反应所需的适宜时间。
4.标准曲线的绘制
在6个50ml容量瓶中，分别加入0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml 10铁标准溶液，再分别加入1ml盐酸羟胺，2ml邻二氮菲，5mlNaAc溶液，用水稀释至刻度，摇匀。以水为参比溶液在选择的波长 、选择的适宜显色剂用量、适宜显色时间下测定各溶液的吸光度。绘制标准曲线图。
数据记录与处理
1.测量波长的选择
由上图知，适宜波长为=510nm
2.显色剂用量的选择
显色剂体积V/mL
由上图知，适宜指示剂用量为V=1.0ml
3.显色时间的选择
由上述图知，直线斜率K=1.0×10-4≈0，故可认为显色时间对吸光度几乎无影响。
4.标准曲线的绘制
铁标准溶液体积v/mL
04
UV-1500PC紫外可见分光光度计
仪器特点
*采用单片微机控制，128*64位液晶显示
*宽大的液晶显示器可显示多组数据
*巨大的内存空间，可存储多组数据和曲线
*自动调0、调100%功能
*波长自动调节
*光源自动切换，滤色片自动切换
*宽大样品池（5mm～100mm）
*具有Z多十点标样建标准曲线测量功能
*可通过直接输入K、B因子建立标准曲线进行定量测量
*可直接输入标样和对应浓度值建立标准曲线进行定量测量
*可断电保存测量设置的标准曲线参数
*配备通用并行打印接口，可打印标题栏、测量数据、曲线参数、曲线标准样品点和曲线
*可通过PC软件控制实现光谱扫描等更精确和灵活的测量要求
技术指标及基本参数
*波长范围：190～1100nm
*光谱带宽：2nm
*波长准确度：±0.5nm
*波长重现性：≤0.2nm
*透射比准确度: ±0.3% τ
*透射比重复性：0.15% τ
*杂散光：≤0.05% τ (220nm NaI，340nm
NaNO2)
*稳定性：0.001A/h（500nm预热后）
*测光方式：透过率、吸光度、浓度、能量
*波长调节：自动调节
*光度范围：-0.3～3A
*显示方式：128*64液晶
*检测器：进口硅光二极管
*光源：进口氘灯，进口钨灯
*电源：AC 220V/50Hz或110V/60Hz
*功率：120W
*仪器尺寸：480×350×220mm
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