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ICPMS前沿应用之临床质谱免疫分析——人绒毛膜促性腺激素的测定

来源:赛默飞色谱与质谱中国      分类:商机 2021-12-28 13:40:45 600阅读次数

强大的ICP-MS的扩展功能

提到电感耦合等离子体质谱(ICP-MS),Z 容易联想到是用其测定无机样品中元素含量。ICP-MS是一种优秀的元素分析手段,可以用来检测绝大多数无机元素的含量,部分元素的检出限甚至可以达到PPT(10-12)级别,且线性范围宽。但ICP-MS绝不仅仅是一台无机样品元素分析仪,其同样可以适用于生物及临床应用,并表现出强大适应性和超高的灵敏度。如ICP-MS用于单细胞分析时,区别于传统的细胞平均值指标,可以提供单个细胞层面的信息,为临床诊断提供新的方向;如激光烧蚀与ICP-MS联用的生物成像技术能获取元素的空间分布,可以帮助医生获取病理信息;ICP-MS同样可以应用于临床免疫分析,用于疾病的检测与筛查,如新生儿遗传病筛查,维生素检测,氨基酸类检测等,与传统的化学发光法相比,临床质谱免疫分析可以直接标记检测物,不需要酶-底物反应体系,拥有更高的灵敏度,具有很高的临床应用潜力。根据Danna Pu等人在Clinical Laboratory 杂志中发表的文章①,其采用赛默飞世尔iCAP RQ ICP-MS可以用于人体中人绒毛膜促性腺激素(HCG)的检测,其通过反应将稀土金属元素标记在生物样品上后,使用ICP-MS即可测出相应样品的含量。该方法的检出限低,灵敏度高,且具有非常低的背景,让我们一起来跟随文章①看看他们是如何做到的。


人绒毛膜促性腺激素(HCG)概述

人绒毛膜促性腺激素(HCG)是一种胎盘的滋养层细胞分泌的糖蛋白激素,由α和β二聚体的糖蛋白组成,分子量约为37kDa。该激素在孕期的诊断和管理中起到了重要作用,也是监测滋养层疾病疗 效的重要标志物。在临床医学上,该激素已经成为了常规检测的指标之一。与此同时,该激素的检测在体育竞赛中也显得非常重要。HCG由于具有掩盖合成代谢类固醇,增加睾丸激素分泌的作用,被国际反兴奋剂组织(WADA)明令禁止。然而由于多种兴奋剂和代谢产物的存在,运动员在滥用后,体内HCG的含量依旧会保持在一个较低的水平,检测较为困难。因此需要一种同时具备高灵敏度和高准确性的HCG检测方法。



常用HCG检测方法及缺陷

目前检测HCG含量的方法主要包含,凝集实验(AGIDs) ;化学发光免疫分析(CLIA);电化学发光免疫分析(ECLIA);免疫胶体金法(IGCA)等。然而上述方法都具有较大的限制。AGIDs是Z先开发出的检测方法,可以用于孕期诊断,但无法进行定量分析。IGCA具有快速,简单,低成本的特点,是目前检测HCGZ常用的方法,但灵敏度非常有限,且重复性差。ECLIA具有很好的重复性和灵敏度,然而操作复杂,测试 用的试剂和仪器维护费用较高。CLIA则由于背景较高,会影响测试的准确性。因此开发一种高效、准确、具有较高灵敏度且低成本的HCG检测方法具有现实意义。



赛默飞ICP-MS助力检测HCG的测定

在HCG被钐离子Sm3+标记后,采用赛默飞世尔iCAP RQ ICP-MS进行检测,即可得到一种高效的HCG检测方法。该仪器系列在检测中具有独特的优势:

■独特的四极杆碰撞反应池Qcell Flatapole设计,提供灵活多样的碰撞/反应气选择,无惧复杂样品基质干扰;

■ 专利接口嵌片设计,使样品产生超声射流,减少盐分析出,提高耐盐能力;同时束缚离子的大角度扩散,形成物理聚焦,提高灵敏度;

■ RAPID 偏转聚焦透镜,90°偏转去除中性粒子和光子,降低噪音,提高信噪比,且无需清洗维护。



文章①根据美国临床与实验室标准学会(CLSI)发布的指南,建立起ICP-MS测定HCG的方法,并对其分析性能进行评估,包括检出限(LOD)、定量上限(ULoQ)、线性、精密度、回收率、交叉反应性和干扰等。



前处理过程如图所示,将样品孵化30分钟,形成免疫磁珠(IMBs)。随后加入靶抗原形成生物素化抗体和靶标抗原的结合体。Z 后引入钐离子Sm3+标记抗原,形成免疫磁珠-抗原-稀土元素的复合体。组成的复合体中,Sm3+的含量与HCG的含量成比例关系,使用ICP-MS检测出Sm3+含量即可测出HCG的含量。



该方法的Z 低检出限 0.33 mIU/mL,Z 高定量限为11300 mIU/mL。在该范围内具有优异的线性及较好的回收率(97.08%-103.5%)。其高含量和低含量样品的组内误差为2.97%和6.08%;高含量和低含量样品的组间误差为3.98%和7.08%,且具有较好的抗干扰性。在收集到的130个临床样本中,将分析得到的数据与ECLIA的测试结果对比,该方法的结果与ECLIA的结果展现出很强的相关性和一致性,具有很高的临床应用潜力。


结论

赛默飞世尔ICP-MS 具有很强的扩展性,无论用于常规的元素分析,还是应用于单细胞分析、纳米颗粒分析、车载大气污染物实时在线分析、色谱联用中元素形态分析、激光剥蚀联用中无机质谱成像等技术分析中,均具有非常好的扩展空间与应用场景,具有巨大的科研潜力。赛默飞世尔ICP-MS不仅仅是一台元素分析仪,快让它来助力您扩展研究的边界吧。



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最近更新:2024-09-05 09:08:15
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