293细胞株和293T细胞株

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【导读】一、细胞名称293细胞株293T细胞株种属：人　　二、组织来源　　293细胞株是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T...

一、细胞名称

293细胞株

293T细胞株

种属：人　　

二、组织来源

　　293细胞株是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3（PO4）2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高，转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。

三、形态特点

上皮细胞　　

致瘤性 + 　　

产物或抗原大T抗原　　

染色体核型亚三倍体人细胞系。染色体众数为64，30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der（1）t（1;15）（q42;q13）, der（19）t（3;19）（q12;q13）, der（12）t（8;12）（q22;p13）,还有四条标记染色体，有的细胞另有5条标记染色体。der（1）与M8 （or Xq+）常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体，两条Xq+，一条Xp+。

四、生长特性　　

粘附

五、文献平价

293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒（Ad 5） DNA的永生化细胞。[RF32725] 　　表达转染的腺病毒5的基因。[RF32725] 　　早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764]，现已清楚仅含有左端序列。[RF50113] 　　此细胞系人腺病毒滴度高。　　室温不贴壁，37℃几日后重新贴壁。　　表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体. [RF33793] 　　The Ad5 insert was cloned and sequenced, and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 （19q13.2）

六、传代

293:弃培养基，含0.25% 胰酶, 0.03% EDTA 消化液洗涤，弃去，加1-2ml消化液室温或37℃消化。　　加入新鲜培养基，吸出，分到新培养皿中。一传二至一传四。　　293T:生长快，通常倍增时间不到一天。每3~4 天1：10至1：20稀释，5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶过度消化。

七、培养基更换

每2-3天一次

八、冻存液

95%培养基；5%,DMSO；culture medium 95%; DMSO, 5%；

九、培养基条件

ATCC培养基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-谷氨酰胺，1.5g/L碳酸氢钠，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸钠；10%加热灭活的马血清　　37℃培养

2004-07-19 09:04:13

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