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TRIzol总RNA抽提试剂原装促销
产品简介TRIzol是一种新型总RNA抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并YZ细胞释放出的核酸酶。 TRIzol在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性,因此对纯化DNA及标准化RNA的生产十分有用。 TRIzol的成分 TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全YZRNA酶活性,因此TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来YZ内源和外源RNase(RNA酶)。 ※0.1%的8-羟基喹啉可以YZRNase,与氯仿联合使用可增强YZ作用。 ※异硫氰酸胍属于解偶剂,是一类QL的蛋白质变性剂,可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失,导致细胞结构降解,核蛋白迅速与核酸分离。 ※β-巯基乙醇的主要作用是破坏RNase蛋白质中的二硫键。现货特TRIzol总RNA抽提试剂原装促销上海索宝特价1650【021-54100800】TRIzol总RNA抽提试剂原装促销上海索宝特价1650【021-54100800】使用方法用匀浆器将组织磨碎,加入TRIzol处理组织。5分钟后加入氯仿,以每分钟12000转离心5分钟,样品即分成水样层、中间层和有机层。 ※RNA存在于水样层中,收集水样层后可以通过异丙醇沉淀RNA来还原。 ※在除去水样层后,有机层中的DNA和蛋白质也能相继以沉淀的方式还原:乙醇能使中间层的DNA沉淀析出,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白质。 每100mlTRIzol可以抽提100个六孔板中的样品或100个50-80mg的组织样品。无论样品是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(约五百万个)及大量的组织(≥1g)和细胞(超过一千万个)均有较好的分离效果。 每一百万细胞用TRIzol抽提可得5-15微克RNA,每毫克组织用TRIzol抽提可得1-10微克RNA(产量因细胞和组织不同而异)。 TRIzol操作上的简便性允许其同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。 TRIzol抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白质的污染,故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和单分子克隆(PCR)。 ※如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用级联扩大的DNaseI(Cat.No.18068)来处理抽提的总RNA。
※TRIzol试剂能促进不同种属、不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA经过琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7kb和15kb之间的不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体RNA条带位于~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之间(tRNA,5S)。当抽提的RNA用TE稀释时,其A260/A280比值≥1.8。抽提小RNA时宜-70℃沉淀。TRIzol总RNA抽提试剂原装促销上海索宝特价1650【021-54100800】TRIzol总RNA抽提试剂原装促销上海索宝特价1650【021-54100800】ShanghaisolarbioBioscience&TechnologyCo.,LTD
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