QuickShuttle转染试剂 QuickShttleTM Transfection Reagents

QuickShuttle转染试剂www.shsolarbio.com
QuickShttleTMTransfectionReagents
（#KX0110041，0.8ml）
产品描述：
QuickShuttle是上海索莱宝生物科技有限公司新近研发的阳离子转染试剂，具有GX、低毒和易于使用等优点，推荐用于哺乳动物细胞和昆虫细胞的瞬时转染以及稳定细胞系构建，可以将转染实验操作缩短到一分钟即可完成。
重要提示：
1、以24孔细胞板转染实验为例，推荐一次（即每孔）转染实验的低内毒素质粒DNA用量为2ug，转染试剂用量为3-5ul（转染试剂的Z适用量需要根据不同细胞和不同培养基来优化，但理论上不超出3-5ul范围），转染实验中使用无菌生理盐水稀释质粒和转染试剂即可。
2、为获得Zgao转染效率并尽可能降低细胞毒性，建议转染时细胞密度控制在50-80%范围内，而且在不影响转染效率的前提下，尽可能减少转染试剂的用量。
3、QuickShuttle转染试剂极大简化了转染步骤，转染试剂和质粒混合后无需室温静置孵育，可直接加入含血清的细胞培养基中进行转染，而且无需在转染后补加血清和更换培养基。
4、如果实验目的在于筛选抗药性稳定细胞系，使用QuickShuttle进行转染实验可做进一步简化，即细胞传代后可直接进行转染实验，从而节省了18-24小时的转染前细胞培养时间。
5、QuickShuttle转染试剂建议储存温度为2-8℃，但在-30℃到室温范围内均可长时间稳定保存。
转染步骤：
下述所有实验步骤均针对哺乳动物贴壁细胞在24孔细胞板中的转染实验优化建立，不同细胞和不同培养基可能需要优化转染试剂的用量以获得Z佳实验效果。质粒DNA：请用能够去除内毒素的方法制备高质量的质粒DNA。稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，高压消毒或CJ过滤。
1.转染前18-24小时接种细胞到24孔细胞板中，每孔5-10*104细胞，1ml完全培养基。备注：如果筛选抗药性稳定细胞系，可以考虑简化的实验步骤，即在细胞传代后直接按下述步骤2-5进行转染实验，无需18-24小时的等候时间。
2.将2ug质粒DNA和3-5ul转染试剂分别稀释到50ul生理盐水中。备注：转染试剂的Z适用量需要根据不同细胞和不同培养基来优化，但理论上不超出3-5ul范围。
3.合并上述两溶液并混匀。备注：无需其他转染试剂所需的10-30分钟的等待时间。
4.将上述复合物直接加入到24孔细胞板中的细胞培养基中，轻摇细胞板以混匀。备注：转染复合物可直接加入含血清的细胞培养基中进行转染实验。在极少情况下会出现贴壁细胞脱落现象，可先从待转染细胞孔中吸取500μl培养基与转染复合物预混后再加入细胞中；若在细胞瓶中进行转染，直接加入到无细胞贴壁的侧面并摇匀即可。
5.将细胞板移至37℃/5%CO2孵箱中进行培养。备注：无需在转染后4-6小时补加血清或更换培养基。
6.24-72小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。
附表：
培养器皿
表面积（cm2）
培养基用量（ml）
DNA用量（μg）/生理盐水用量（μl）
转染试剂用量（μl）/生理盐水用量（μl）
96孔板
0.4
0.2
0.4/25
0.8/25
24孔板
2
1
2/50
4/50
12孔板
4
1.5-2
4/50
8/50
6孔板（包括35mm培养皿）
9
2-3
8-10/100
16-20/100
60mm培养皿
27
6-8
20-25/200
40-50/200
25cm2培养瓶
25
6-8
20-25/200
40-50/200
100mm培养皿
75
15-20
40-50/400
80-100/400
75cm2培养瓶
75
20-25
40-50/400
80-100/400

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