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- 【导读】染色缓冲液(BSA)的配制:PBS含有1%FBS和0.09%NaN3,置于冰上或4度冰箱备用。准备单细胞悬液:淋巴组织、骨髓、血液或培养的细胞。用冰染色缓冲液洗细胞2次,离心细胞,...
染色缓冲液(BSA)的配制:
PBS含有1%FBS和0.09%NaN3,置于冰上或4度冰箱备用。
准备单细胞悬液:淋巴组织、、血液或培养的细胞。用冰染色缓冲液洗细胞2次,离心细胞,用冰染色缓冲液重悬细胞,使终浓度为2×107细胞/ml。各取50ul(106细胞)细胞悬液到2个圆底的Ep管中。根据抗体说明书在其中1个Ep管中加入合适的抗体量,另外1个加入同型对照抗体,冰上避光孵育20分钟(建议每5分钟轻轻混匀,以免细胞沉积)。根据荧光抗体的亲和力适当延长染色时间。用1ml染色缓冲液洗2次去除未结合的抗体,300×g离心5分钟,每次离心后小心吸取上清。用适量染色缓冲液(如500ul)重悬细胞。流式细胞仪分析染色结果(不超过4小时)。如果暂时无法检测,也可以将染色后的细胞用4%多聚甲醛固定后,避光储存在4度。固定后的细胞可以保存Z多一个星期。仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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- 2004-12-01 09:23:14
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