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- 【导读】高迁移率族蛋白1(HMG-1检测试剂盒简介高迁移率族蛋白于1973年首次在牛胸腺中被提取和鉴定,因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的高迁移能力而得名。具体可参见FerrariS,Finel...
高迁移率族蛋白1(HMG-1检测试剂盒简介
高迁移率族蛋白于1973年首次在牛胸腺中被提取和鉴定,因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的高迁移能力而得名。具体可参见FerrariS,FinelliP,RocchiM,BianchiME(July1996)."Theactivegenethatencodeshumanhighmobilitygroup1protein(HMG1)containsintronsandmapstochromosome13".Genomics35(2):36771.doi:10.1006/geno.1996.0369.PMID8661151.。根据分子质量大小、序列相似性和DNA结构特性,HMG可进一步分为HMGA、HMGB、HMGN3个家族。而HMGB家族又有3个成员,即HMGB1、HMGB2和HMGB3,三者在氨基酸序列上有80%的一致性。HMGB1是含量Z丰富的HMG蛋白,在典型的哺乳动物细胞内约有106个分子,平均10~15个核小体即可含有1个HMGB1分子。HMGB1广泛分布于淋巴组织、脑、肝、肺、心、脾、肾等组织中,HMGB1除在肝、脑组织中主要存在于胞浆外,在大多数组织中存在于胞核;而HMGB2/3分布较局限,HMGB2仅分布在睾丸和淋巴组织中,HMGB3仅在胚胎中被发现,二者可能与胚胎发育有关。HMGB1先前也称HMG1,在进化过程中其氨基酸序列高度保守,啮齿类动物与人的氨基酸序列同源性高达98%以上,小鼠与大鼠氨基酸序列同源性更是高达1**%。
高迁移率族蛋白1(HMG-1检测试剂盒操作方法
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
我司elisa试剂盒的优点:操作简单、快速、灵敏度高、特异性强、性价比高、样品所需量少
1.操作简单、快速。所有操作步骤,都有图谱示意,让你简单明了,不必为研究操作步骤而耽搁时间。
2.灵敏度高。酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。我们的试剂盒实现了在ug、ng、pg水平上对其进行定量。
3.特异性强。特异性来自抗体或抗原的选择性。采用国际知名的原装进口抗体抗原,保证的试剂盒品质。
4.性价比高,质量稳定。
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- 2004-12-14 09:23:09
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