原代细胞保存方法

原代细胞保存方法：
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔diyi孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
操作注意事项：

1.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
原代细胞FBS胎牛血清25ml
T/E胰酶/EDTA消化液100ml
TNS胰酶中和液100ml
NECDS非酶细胞裂解液100ml
CFM细胞冻存液50ml
SF-CFM无血清细胞冻存液50ml
TB台盼蓝50ml
DPBS磷酸盐缓冲注500ml
HBSS平衡盐溶液500ml
PLL多聚赖氨酸1mg/ml1ml
PLL多聚赖氨酸10mg/ml1ml
FBS胎牛血清500ml
P/S青霉素/链霉素溶液5ml
P/S青霉素/链霉素溶液100ml
AMS抗真菌溶液50ml
ABAMS抗霉菌溶液50ml
CCGW细胞培养超纯水500ml
MDS肌细胞分离液100ml
BPE牛脑垂体提取物25mg
BPE牛脑垂体提取物100mg
ITS胰岛素铁硒传递蛋白100x10ml
L-Gue左旋谷氨酰胺溶液200mM100ml
NEAA非必需氨基酸100X100ml
BPF纤维粘连蛋白-牛源1mg原代细胞

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