关于人丙肝(HCV)中文说明书定性

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【导读】关于人丙肝(HCV)中文说明书定性

关于人丙肝(HCV)中文说明书定性

　　人丙肝(HCV)酶联免疫分析
　　
　　试剂盒使用说明书
　　
　　本试剂盒仅供研究使用。
　　
　　96T
　　
　　使用目的：
　　
　　本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中丙肝(HCV)表达。
　　
　　实验原理
　　
　　本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人丙肝(HCV)表达。用纯化的人乙肝(HBV)抗
　　
　　体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中丙肝(HCV)相结合，经洗涤除去未结合的抗
　　
　　原和其他成分后再与HRP标记的丙肝(HCV)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，
　　
　　经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下
　　
　　转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，与CUTOFF值相比较，
　　
　　从而判定标本中人丙肝(HCV)的存在与否。
　　
　　试剂盒组成
　　
　　130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶
　　
　　2酶标试剂6ml×1瓶8阳性对照0.5ml×1瓶
　　
　　3酶标包被板12孔×8条9阴性对照0.5ml×1瓶
　　
　　4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份
　　
　　5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张
　　
　　6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个
　　
　　标本要求
　　
　　1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
　　
　　马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
　　
　　2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
　　
　　操作步骤
　　
　　1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1
　　
　　孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)
　　
　　2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50µl。然后在待测样品孔先
　　
　　加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不
　　
　　触及孔壁，轻轻晃动混匀，
　　
　　3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
　　
　　4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
　　
　　5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
　　
　　重复5次，拍干。
　　
　　6.加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。
　　
　　7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。
　　
　　9.显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
　　
　　15分钟.
　　
　　10.终止：每孔加终止液50µl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
　　
　　11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止
　　
　　液后15分钟以内进行。
　　
　　计算和结果判定：
　　
　　试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10
　　
　　临界值(CUTOFF)计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
　　
　　阴性判定：样品OD值<临界值(CUTOFF)者为丙肝(HCV)阴性
　　
　　阳性判定：样品OD值≥临界值(CUTOFF)者为丙肝(HCV)阳性
　　
　　。
　　
　　注意事项
　　
　　1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
　　
　　用完，板条应装入密封袋中保存。
　　
　　3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
　　
　　4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
　　
　　5．底物请避光保存。
　　
　　6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm
　　
　　7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须
　　
　　注意安全。
　　
　　保存条件及有效期
　　
　　1．试剂盒保存：；2-8℃。
　　
　　2．有效期：6个月
　　
　　上海恒远生物科技有限公司主营产品/服务:ELISA试剂盒，免疫组化试剂盒，放免试剂盒，标准品，血清，抗体，培养基，生物试剂，基准试剂！
　　
　　ELISA试剂盒，种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒；另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。
　　
　　欢迎广大客户来电来函！

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2006-08-05 12:57:20

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