优级胎牛血清细胞培养中出现黑点的原因

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【导读】　　一旦在优级胎牛血清细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就...

　　一旦在优级胎牛血清细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：
　　1.细胞生长过老，破碎的细胞残骸；
　　2.血清质量不好，反复冻融的结果；
　　3.配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；
　　4.配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点；
　　5.培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。
　　优级胎牛血清细胞培养中如何防止黑点生成？
　　1.尽可能地减少血清冻融次数；
　　2.培养基无需37℃水浴；
　　3.培养基保持Z佳PH值7.0-7.2；
　　4.严格控制配制培养基的水质，容器定期刷洗；
　　5.掌握细胞传代的Z佳时机，细胞切勿生长过老。

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2004-08-12 09:23:04

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